Импедансные измерения инвазии раковых клеток головного мозга

Возьмем пластину вторжения и миграции клеток, содержащую верхнюю и нижнюю камеры.

Верхняя камера содержит микропористую мембрану с массивом золотых микроэлектродов для измерения импеданса на ее дне. Покройте мембрану внеклеточным матриксом или раствором ECM.

Заполните нижнюю камеру средой с высоким содержанием сыворотки.

Затем добавьте среду с низким содержанием сыворотки в верхнюю камеру и инкубируйте для акклиматизации к условиям культивирования.

Прикладывайте слабый электрический потенциал к микроэлектродам, чтобы измерить базовое сопротивление.

Засейте раковые клетки мозга в верхней камере и дайте им поселиться на ECM.

Среда с высоким содержанием сыворотки действует как хемоаттрактант, направляя движение клеток к ней.

Клетки выделяют протеазы, которые ухудшают ECM, обеспечивая их движение через мембранные поры к хемоаттрактанту.

Когда клетки мигрируют, они прилипают к микроэлектродам, увеличивая клеточное сопротивление.

Со временем все больше клеток мигрируют и прикрепляются к микроэлектродам, еще больше увеличивая клеточное сопротивление, которое отражает инвазивный потенциал этих клеток.

За пять-шесть часов до анализа клеток в реальном времени поместите систему анализа клеток в реа