Индукция легкой черепно-мозговой травмы у мышиной модели

Закрепите обезболивающую, подготовленную мышь в стереотаксической рамке с обнаженным черепом.

Определите опорные точки черепа. Затем поместите устройство для поддержки головы под голову животного и надуйте его, чтобы предотвратить повреждение ушей.

Выровняйте стереотаксически управляемый электромагнитный импактор над головой.

Сбросьте стереотаксические координаты, чтобы точно выровнять зонд ударника над целью. Прикрепите контактный датчик к уху животного.

Как только зонд коснется черепа, втяните его. Установите желаемую глубину удара и инициируйте удар с соответствующими параметрами.

Зонд подает контролируемую силу на череп, вызывая растяжение аксонов и сдвиг в кортикальных нейронах, что приводит к легкой черепно-мозговой травме.

Измерьте время выпрямления животного, время, необходимое для восстановления нормального положения тела после травмы.

Оцените мышь на предмет видимых переломов черепа.

Затем уберите мышь из кадра, закройте разрез и примените антибиотики.

Позвольте мыши восстановиться.

Закрепите мышь в стереотаксической раме, используя легкую ацетальную смолу, конические ушные планки, прикусочную планку и маску для анестезии мыши. Затем внимательно следите за дыханием мыши, чтобы убедиться в глубине анестезии. Нанесите на глаза стерильную глазную смазку, чтобы предотвратить высыхание роговицы. Простерилизуйте кожу головы тампонами с повидоном-йодом.

Убедившись в глубине анестезии, сделайте примерно 1-сантиметровый разрез средней линии кожи головы между глазами и шеей с помощью скальпеля, обнажив череп. Дайте черепу высохнуть в течение 1-2 минут, затем определите брегму и лямбду. Затем поместите аппарат для поддержки головы под голову и надуйте лампу водой до тех пор, пока она не будет давить на нижнюю часть головы мыши, но не отрывать голову от планки для укуса.

Переместите импактор на место над головой мыши. Выдвиньте импактор, поместив тумблер выдвижения-втягивания в положение «Выдвинь». Затем выровняйте ударный элемент так, чтобы он оказался по центру брегмы. Сбросьте цифровые стереотаксические координаты x и y в стереотаксическом считывателе на 0. Затем выровняйте зонд по месту удара, переместив зонд из брегмы в целевые координаты как медиальные боковые с точностью до 0 миллиметров и передние задние до отрицательных 1,6 миллиметров.

Нажмите контактный датчик на ухо мыши. Медленно опустите наконечник щупа с помощью выдвинутого щупа до первого контакта с поверхностью. Остановитесь на звуковом сигнале. Затем сбросьте цифровые стереотаксические z-координаты в стереотаксическом считывателе на 0.

Внимательно проверьте, находится ли кончик на одном уровне с черепом. Затем втяните ударный элемент, поместив тумблер на блоке управления в положение втягивания. Наконечник отводится и больше не соприкасается с головой до момента удара. Установите глубину удара, отрегулировав дорсальную брюшную глубину до минус 1,2 миллиметра. Внимательно следите за дыханием мыши, чтобы обеспечить глубину анестезии, и при необходимости регулируйте уровень газа.

Вызовите удар, нажав правый тумблер на удар. Наконечник щупа опускается вниз с отображаемой скоростью, остается внизу в течение заданного времени задержки и втягивается. Запустите таймер сразу после того, как будет получена травма головы или удар ЧВН, чтобы зафиксировать время выпрямления. Среднее время выпрямляющего рефлекса составляет от 5 до 15 минут.

Оцените мышь на предмет видимых переломов черепа, кровоизлияний и апноэ. Извлеките мышь из стереотаксической рамки. Закройте кожу головы, скрепив кожу головы. Затем нанесите на закрытый разрез тройную мазь с антибиотиком стерильным аппликатором с ватным наконечником. Верните мышь в чистую клетку для восстановления.