Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:36 мин. • April 28th, 2025
Возьмем крысу под наркозом.
Побрейте скальп. Затем нанесите гель для глаз для поддержания увлажнения роговицы.
Закрепите животное на стереотаксической рамке и продезинфицируйте место операции. Сделайте разрез по средней линии и втяните его, чтобы обнажить череп.
Просверлите отверстие в правой лобной полусфере, чтобы получить доступ к префронтальной коре.
Поместите стереотаксически управляемый шприц, содержащий суспензию клеток глиобластомы, или опухоли мозга, над просверленным участком.
Используя контроллер насоса, введите клеточную суспензию в префронтальную кору.
Медленно извлекайте иглу, чтобы предотвратить рефлюкс введенных клеток. Затем запечатайте просверленное место костным воском.
Зашить хирургический разрез и продезинфицировать это место.
Верните крысу в клетку и используйте красную лампу для поддержания температуры тела.
После инъекции опухолевые клетки мозга пролиферируют, проникают в окружающие ткани и вызывают ангиогенез, нарушая нормальную функцию мозга и создавая модель глиобластомы.
Для инокуляции в мозг обезболенной 170 грамм самки, рыбацкой крысы F344 с клетками глиомы, сначала подтвердите седативный эффект отсутствием реакции на защемление пальца ноги. Удалите шерсть от уровня глаз до задней части черепа и нанесите мазь на глаза животного. Обездвижите животное с помощью стереотаксического устройства. Продезинфицируйте открытые участки кожи повидон-йодом и обнажите череп с помощью разреза кожи головы по средней линии размером 2 сантиметра. С помощью алмазного сверла сделайте отверстие диаметром 1 миллиметр, 2 миллиметра сзади и 2 с половиной миллиметра сбоку от брегмы в правой лобной полусфере.
Далее загрузите иглу инсулинового шприца 29 калибра 5 микролитрами клеточной суспензии. И используйте контроллер микрошприцевого насоса, чтобы ввести клетки на три миллиметра вглубь черепа под стереотаксическим контролем, и медленно извлекать иглу. Закройте разрез костным воском. Затем зашить и продезинфицировать кожу большим количеством повидон-йода. И использовать красную лампу для стабилизации температуры тела животного, после операции, с контролем до полного выздоровления.