Иммунофлуоресцентное окрашивание инфицированной фиброваскулярной ткани пациента, полученной от геля

Принимайте регидратированную фибрин-гелевую, фиксированную и пермеабилизированную фиброваскулярную ткань, полученную от пациента. Эта ткань содержит неправильные неоваскулярные структуры с эндотелиальными клетками и перицитами.

Обработайте ткань блокирующим раствором, чтобы предотвратить связывание неспецифических антител.

Инкубируйте с первичными антителами, нацеленными на поверхностные белки на эндотелиальных клетках и перицитах.

Промойте буфером, чтобы удалить несвязанные антитела, затем инкубируйте в буфере.

После промывки буфера инкубируйте с флуоресцентными вторичными антителами, конъюгированными с красителем, для связывания с первичными антителами.

Промойте буфером, чтобы удалить излишки антител, и инкубируйте в буфере.

После промывки буфера добавьте ядерный краситель к окрашиванию ядер клеток. Промойте буфером и деионизированной водой, чтобы удалить несвязанный краситель.

Перенесите ткань на предметное стекло микроскопа.

Нанесите монтажный материал и уплотните его с помощью покровного стекла, содержащего быстрозатвердевающий монтажный материал.

После сушки на воздухе храните предметное стекло при низкой температуре. Затем визуализируйте ткань под эпифлуоресцентным микроскопом, чтобы