Генерация окклюзии средней мозговой артерии у детеныша крысы с целью индуцирования локальной ишемии головного мозга

Начните с обездвиженного крысиного щенка на грелке.

Стерилизуйте область шейки матки поочередно этанолом и повидон-йодом. Введите местную анестезию в месте разреза.

Сделайте разрез шейки матки, обнажив общую сонную артерию.

Разместите втягивающие устройства для обеспечения свободного доступа.

Определите внутреннюю сонную артерию или ВСА и удалите окружающие ткани.

Завяжите лигатуру вокруг основания ICA и втяните ее, чтобы временно остановить кровоток.

Наложите свободную вторую лигатуру на ICA.

Сделай надрез между лигатурами.

Возьмите нейлоновый окклюзионный шов с силиконовым покрытием и вставьте его через разрез, пока он не достигнет средней мозговой артерии или MCA.

Это блокирует приток крови к MCA, вызывая локальную ишемию в мозге.

Завяжите лигатуру вокруг окклюзионного шва, чтобы закрепить ее.

Закройте место разреза. Дайте щенку восстановиться перед дальнейшими исследованиями.

После обезболивания щенка с помощью ингаляционного изофлурана в соответствии с утвержденными протоколами убедитесь, что реакции на щипот ноги не последовало. Поддерживайте температуру поверхности тела с помощью грелки под операционным этапом. Закрепите животное в лежачем положении с помощью ленты через плечевые области.

С помощью стерильных ватных тампонов промокните переднюю шейную область с 70% этанолом, а затем нанесите тампон из раствора повидон-йода. Затем локально инфильтрируйте 0,25% бупивакаина в запланированное место разреза. Затем, работая через стереоскоп, сделайте средний разрез на расстоянии от 5 до 7 миллиметров спереди шейного отдела, чтобы обнажить общую сонную артерию.

Установите от 2 до 4 ретракторов, чтобы полость оставалась открытой, а артерия открытой. Затем найдите внутреннюю сонную артерию, затылочную артерию и наружную сонную артерию. Удалите соединительную ткань и жир из артерий, чтобы получить четкий обзор.

После разреза 1,5 сантиметра шелка по 6-0 зашиваем шовной нитью. Расплетите шов, вытягивая отдельные нити. Следите за тем, чтобы отдельные пряди были аккуратными и не потрепанными.

Удерживая прядь шва щипцами под углом 45 градусов, проведите щипцы по дуге под ВСА так, чтобы кончики оказались между ВСА и ОА. Далее возьмитесь за конец нити нити и потяните его так, чтобы конец был легко доступен. Освободите прядь от щипцов и вытащите щипцы из-под ICA, обратив предыдущее движение.

Завяжите временную лигатуру вокруг ICA у основания, ближайшего к тому месту, где она отделяется от CCA. Осторожно втяните ВСА латерально, затем с помощью зажима закрепите втягивающую прядь к лишней коже возле подмышечной впадины на стороне, противоположной разрезу. Убедитесь, что втягивающая прядь достаточно натянута, чтобы остановить кровоток, прежде чем переходить к следующему шагу.

Артерия должна быть ровной и бледной. С помощью щипцов под углом 45 градусов захватите еще одну неплетеную нить шва и провяжите ее под и вокруг ВСА, как и раньше. Расположите эту прядь сбоку от втягивающей нити.

Затем разрежьте артериотомию на 0,2 миллиметра, на полпути между перевязанными и неперевязанными лигатурами, находящимися ближе к перевязанной лигатуре. Теперь с помощью метрической линейки отмерьте 10 миллиметров нейлонового шовного материала с силиконовым покрытием в качестве окклюзионного шва. Разрежьте шов с дополнительным припуском от 2 до 3 миллиметров для удаления во время реперфузии.

Удерживайте окклюзирующий шов щипцами под углом 45 градусов, а прямыми щипцами создавайте изгиб, отмечая точку остановки продвижения. Введите окклюзирующий шов в артериотомию, направляя его параллельно ЭКА и в сторону головки. Плавно продвигайте шов до тех пор, пока не будет достигнут изгиб. Затем используйте прядь, расположенную сбоку от ретракционной нити, чтобы завязать временную лигатуру для фиксации окклюзионного шва. Снимите зажим втягивающего устройства. Затем обрежьте пряди обеих временных лигатур, оставив прядь, по которой будет сниматься узел, длиннее пряди, используемой для ее затягивания. Снимите втягивающие устройства. И закройте полость с помощью плетеного шелка 6-0, чтобы создать три или четыре прерывистых шва.

Извлеките щенка из наркоза и положите его на грелку на комнатный воздух. Наблюдайте за щенком до тех пор, пока он не придет в сознание, достаточное для поддержания лежачего положения на грудине, и убедитесь, что он полностью пришел в себя, прежде чем возвращать его к матери.