Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:59 мин. • April 28th, 2025
Возьмите предметное стекло, содержащее неподвижные и пермеабилизированные криосекции корональной ткани крысы.
Обведите участки гидрофобной ручкой, чтобы создать контролируемую среду для окрашивания.
Переместите срезы в камеру влажности, чтобы предотвратить высыхание реагентов и тканей на последующих этапах.
Обработайте срезы сывороточными белками для блокирования неспецифических сайтов связывания.
Смойте буфером, чтобы удалить излишки сывороточных белков.
Инкубируйте с первичными антителами, нацеленными на определенные белки микроглии и нейронов.
Промойте буфером, чтобы удалить несвязанные первичные антитела.
Инкубируйте с флуорофор-конъюгированными вторичными антителами, которые связываются с первичными антителами.
Промойте буфером, чтобы удалить несвязанные вторичные антитела. Затем смойте водой двойной дистилляции.
Нанесите водный монтажный материал для защиты флуоресцентного сигнала, установите покровное стекло и загерметизируйте его.
Визуализируйте срезы под флуоресцентным микроскопом, чтобы визуализировать иммуномеченую микроглию и нейроны.
Высушите края предметных стекол и сделайте водоотталкивающую границу по краю предметного стекла с помощью ручки, чтобы обеспечить равномерное покры
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео