Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:36 мин. • April 28th, 2025
Возьми слайд со встроенными в парафин участками нейросфер опухолей мозга, кластерами нейральных стволовых клеток, демонстрирующих специфичные для опухоли ядерные белковые биомаркеры.
Нагрейте до расплавления парафина, удалите его с помощью ксилола и регидратируйте ткань с помощью уменьшающейся концентрации алкоголя.
Нагрейте в кислотном буфере, содержащем моющее средство, чтобы выявить эпитопы на биомаркерах и проникнуть в клеточные мембраны.
Промойте, затем обработайте окислителем, чтобы инактивировать эндогенные ферменты пероксидазы, предотвращая неспецифические сигналы.
Примените блокирующее решение для маскировки неспецифических сайтов привязки.
Инкубируйте с первичными антителами, нацеленными на эпитопы биомаркеров.
Промойте, затем обработайте биотин-конъюгированными вторичными антителами, которые связываются с первичными антителами.
Промойте и инкубируйте с авидином, конъюгированным с ферментом пероксидаза, который связывается с биотином.
Добавьте хромогенный субстрат и окислитель.
Пероксидаза использует агент для преобразования субстрата в цветные осадки, помечая местоположение биомаркера.
Запятнайте ядра, обезвожьте ткань в спирте и установите предметное стекло для визуализации расп
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео