Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:08 мин. • April 28th, 2025
Начните с образца ткани мозга, который непрозрачен из-за наличия пигментов и липидов. Эти компоненты вызывают рассеяние света в флуоресцентно меченых нейронах.
Последовательно инкубируйте ткань в растворах с возрастающей концентрацией метанола, чтобы удалить из нее воду и постепенно обезвоживать ткань.
Затем обработайте эту ткань концентрированным метанолом, чтобы удалить остаточную воду, обеспечивая полное обезвоживание.
Затем переведите ткань на первоначальный очищающий растворитель, содержащий дихлорметан и метанол.
Инкубируйте с легким встряхиванием, чтобы растворитель проник глубоко в ткань.
Дихлорметан удаляет пигменты и липиды из тканей, уменьшая рассеивание света и повышая прозрачность.
Наконец, переведите ткань на дибензиловый эфир, гидрофобный растворитель, и инкубируйте без встряхивания.
Растворитель действует как окончательный очищающий агент, который еще больше повышает прозрачность ткани.
Этот процесс улучшает проникновение света, позволяя более четко визуализировать меченые нейроны и их связи в тканях мозга образец.
Инкубируйте образец последовательно в 20%, 40%, 60%, 80% и 100% метаноле в течение одного часа при комнатной температуре. Затем инкубируйте его в свежем 100%
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео