Иммунофлуоресцентная микроскопия нервных клеток, дифференцированных из клеток периферической крови

Возьмите многокамерный слайд с покрытыми белком покровными стеклами, содержащими фиксированные и проникнутые нейронные клетки, полученные из периферической крови, включая нейрональные клетки-предшественники, астроциты и нейроны.

Добавьте решение для блокировки неспецифических сайтов привязки.

Инкубируйте с флуоресцентными антителами, конъюгированными с красителем, которые связываются с определенными клеточными белками, позволяя идентифицировать типы нейронных клеток.

Промойте буфером, чтобы удалить несвязанные антитела.

Инкубируйте с флуоресцентным ядерным красителем, чтобы окрашивать ядра.

Перенесите покровное стекло на слайд с монтажным носителем. Затем поместите подготовленное предметное стекло под флуоресцентный микроскоп, оснащенный соответствующими фильтрами.

Используя определенные длины волн света, возбуждайте флуоресцентные красители, заставляя их излучать свет на более длинных волнах.

Излучаемые флуоресцентные сигналы соответствуют меченым клеткам клеток, отчетливо выделяя различные типы нейронных клеток и подтверждая дифференцировку перепрограммированных клеток крови.

Добавьте блокирующий раствор PBS и 5% BSA. Заблокируйте ячейки при комнатной температуре на кулисной пластине н