Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 5:09 мин. • April 28th, 2025
Поместите срез гиппокампа из мозга мыши в лунку, содержащую буфер. Срез содержит сеть нейронов, которые общаются через синапсы.
Терминали пресинаптических нейронов содержат наполненные нейротрансмиттером везикулы с характерными трансмембранными транспортерами, в то время как постсинаптические терминали содержат характерные скеффолдные белки, которые регулируют рецепторы нейротрансмиттеров. Оба служат ключевыми маркерами для синаптических структур.
Замените буфер раствором, блокирующим пермеабилизацию, и инкубируйте с перемешиванием, чтобы проникнуть в клеточные мембраны и заблокировать неспецифические сайты связывания.
Добавьте первичные антитела, нацеленные на пресинаптические и постсинаптические маркеры, и инкубируйте с перемешиванием, чтобы обеспечить связывание.
Промойте ломтик, добавьте флуор-конъюгированные вторичные антитела, специфичные к первичным антителам, и инкубируйте с перемешиванием в темноте.
Промойте кусочек, затем установите его на слайд.
Используя конфокальный микроскоп, определите интересующую область и увеличьте для визуализации синапсов.
Захватите изображения, чтобы идентифицировать флуоресцентно помеченные пресинаптические и постсинаптические маркеры и оценить их к
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео