Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:48 мин. • May 29th, 2025
Начнем с установки флуоресцентного микроскопа, содержащей иммобилизованную диафрагму с диафрагмальными нервами трансгенной мыши.
Нервно-мышечное соединение диафрагмы состоит из моторного нейрона, мышечного волокна и шванновских клеток, содержащих ацетилхолиновые рецепторы и кальциевые каналы.
Эти клетки имеют флуоресцентно меченые ацетилхолиновые рецепторы и экспрессируют внутриклеточные показатели кальция.
Разветвитель изображения, подключенный к установке, позволяет одновременно визуализировать оба флуоресцентных сигнала.
Диафрагмальный нерв расположен в отсасывающем электроде для подачи электрического стимула.
Под флуоресцентным микроскопом визуализируйте ацетилхолиновые рецепторы, чтобы определить нервно-мышечное соединение.
Чтобы установить максимальную базовую флуоресценцию, добавьте раствор хлорида калия для временной деполяризации клеточной мембраны. Это запускает внутриклеточный приток кальция, вызывая увеличение флуоресценции показателей.
Отрегулируйте параметры яркости, чтобы предотвратить перенасыщение флуоресцентного сигнала.
После реполяризации примените электрическую стимуляцию, чтобы вызвать приток кальция в клетку и зарегистрировать изменение внутриклеточной флуоресценци
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео