Конфокальная микроскопия интактных дендритных беседок и морфологии позвоночника в очищенном мозге мыши
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:02 мин. • May 29th, 2025
Возьмем очищенный мозг мыши с удаленными для прозрачности клетками, экспрессирующими флуоресцентные белки и липиды, для визуализации глубоких структур с высоким разрешением.
Гидрогелевая сетка сохраняет биомолекулы и поддерживает нейронные сети.
Перенесите мозг в камеру визуализации, содержащую агарозное кольцо для поддержки.
Закрепите ткань клеем и заполните камеру раствором для согласования показателя преломления, чтобы свести к минимуму рассеяние света и создать стабильную среду визуализации.
Поместите камеру на предметный столик для конфокального микроскопа и осторожно опустите объектив в раствор, чтобы образовался непрерывный столб контакта.
Используйте эпифлуоресценцию для определения местоположения интересующих областей. Затем отрегулируйте параметры лазера и визуализации для оптимизации качества изображения.
Захватите серию z-стеков, чтобы создать трехмерное представление ткани.
Используйте соответствующее программное обеспечение для анализа клеточной морфологии, включая дендритные беседки, их шипы, а также распределение и плотность нейронов.
Чтобы построить большую камеру для визуализации тканей толщиной более 5 миллиметров, используйте стеклянную чашку длиной 10 сантиметров
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео