Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:19 мин. • May 29th, 2025
Начните с очистки ткани гиппокампа мыши, которая становится оптически прозрачной путем удаления липидов. Ткань встраивается в гидрогелевую сетку для стабилизации биомолекул и сохранения клеточных структур.
Ткань содержит астроциты, экспрессирующие красный флуоресцентный белок, и возбуждающие нейроны, экспрессирующие зеленый ядерный белок, что обеспечивает четкую визуализацию.
Поместите ткань на предметное стекло и создайте камеру с помощью горячего клея, оставив небольшой зазор.
Нанесите раствор для выравнивания показателя преломления, чтобы увлажнить ткань и предотвратить образование пузырей, затем запечатайте покровным стеклом.
Заполните камеру раствором для выравнивания показателя преломления, чтобы уменьшить рассеяние света и закрыть зазор.
Визуализируйте ткань с помощью двухфотонного микроскопа.
Ближний инфракрасный свет возбуждает красные и зеленые флуоресцентные белки в фокальной плоскости, обеспечивая получение изображений с высоким разрешением и минимальными фотоповреждениями. Флуоресцентные излучения детектируются отдельно, что ясно показывает пространственную близость между астроцитами и ядрами возбуждающих нейронов.
Во-первых, поместите образец в центр предметного стекла
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео