Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:11 мин. • May 29th, 2025
Возьмем крысу под наркозом с открытым черепом, который закрыт простыней.
Просверлите отверстие, чтобы обнажить твердую мозговую оболочку, самый внешний слой мозга, иннервируемый чувствительными к боли сенсорными нейронами, происходящими из тройничного ганглия и ганглиев шейного дорсального корешка.
Постройте барьер для предотвращения утечки, введите ретроградный трассер и загерметизируйте отверстие.
Зашите рану и дайте крысе восстановиться.
Индикатор проникает в аксоны сенсорных нейронов, перемещается ретроградно к их ганглиям и проникает в тела нейронных клеток.
Усыпьте крысу и рассеките ганглии.
Подготовьте секции ганглиев и закрепите их на предметных стеклах.
Добавьте раствор для проникновения клеточных мембран и маскировки неспецифических участков связывания.
Инкубируйте с первичными антителами, нацеленными на индикатор и нейроспецифические нейрон-специфические нейропептиды.
Добавьте флуоресцентно меченные вторичные антитела, специфичные к первичным антителам.
С помощью флуоресцентной микроскопии можно наблюдать за колокализацией нейропептидов и индикаторов в телах клеток, подтверждая ганглионарное происхождение сенсорных нейронов.
Побрейте голову крысы электрической бритвой. Затем прил
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео