Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:14 мин. • May 29th, 2025
Возьмем, к примеру, камеру визуализации, содержащую иммобилизованную ткань миентерального сплетения толстой кишки мыши, в которой находятся ганглионарные сплетения, состоящие из сетей кишечных нейронов и глиальных клеток.
Эти клетки помечены индикатором кальция, который флуоресцирует при связывании с кальцием.
Далее поместите камеру на предметный столик флуоресцентного микроскопа. Перфузируйте камеру с помощью предварительно подогретого буфера, содержащего ингибиторы для подавления мышечных сокращений во время визуализации.
С помощью микроскопа определите здоровые ганглионарные области, которые проявляют равномерную флуоресценцию.
Получение флуоресцентных изображений для измерения исходной активности, обеспечивающих эталон внутриклеточного уровня кальция.
Перфузируйте ткань агонистом рецепторов для активации нейрональных рецепторов, что провоцирует внутриклеточный приток кальция и увеличение интенсивности флуоресценции.
Активация нейронов косвенно стимулирует окружающие глиальные клетки, что приводит к притоку кальция и последующему увеличению флуоресценции.
Съемка флуоресцентных изображений с интервальной съемкой для измерения изменений интенсивности флуоресценции, которые указывают на д
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео