Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:19 мин. • May 29th, 2025
Поместите химически закрепленный срез мозга мыши в стеклянную донную чашку с буфером и закрепите ее сеткой.
Подсоедините электрод, заполненный анионным гидрофильным флуоресцентным красителем, к источнику напряжения.
Вставьте заземляющий электрод в буфер, чтобы замкнуть электрическую цепь.
Используя светлопольное освещение, продвиньте заполненный красителем электрод к срезу.
Переключитесь на инфракрасную дифференциально-интерференционно-контрастную визуализацию для определения местоположения астроцита.
Проткните сому астроцита электродом, чтобы получить доступ к цитоплазме.
Подайте электрический ток для введения красителя в цитоплазму с помощью ионофореза.
Переключитесь на конфокальную микроскопию для контроля движения красителя.
Гидрофильный краситель, неспособный пересечь гидрофобную мембрану, диффундирует в цитоплазме, заполняя сому и ветви.
Как только ячейка заполнится, остановите ток и вытащите электрод.
Дайте мембране астроцитов восстановиться.
Получение изображений в различных Z-плоскостях и их реконструкция для визуализации морфологии астроцитов.
Для теста на инъекцию красителя аккуратно поместите слегка закрепленный срез мозга в стеклянную миску на дне, наполненную 0,1 моляра PBS при
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео