Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:53 мин. • May 29th, 2025
Возьмите покровный лист с культурой вентральных нейронов среднего мозга, полученных из эмбрионов мышей.
Клетки заражаются вирусным вектором для экспрессии показателя кальция.
Перенесите покровное стекло в записывающую камеру конфокального микроскопа, перфузированного с записывающим буфером.
Используя видимый свет, определите область, содержащую несколько нейронов, затем переключитесь на флуоресцентную визуализацию.
При низком внутриклеточном уровне кальция показатель остается несвязанным, проявляя низкую интенсивность флуоресценции.
Внутренние свойства нейронов генерируют потенциалы спонтанного действия, запуская открытие потенциал-зависимых кальциевых каналов и обеспечение притока кальция.
Избыток кальция связывается с индикатором, вызывая конформационные изменения, которые увеличивают интенсивность флуоресценции.
Запишите интенсивность флуоресценции с течением времени, чтобы отследить спонтанную активность кальция.
Введите нейромедиатор в высокой концентрации, который связывается с рецепторами на нейронах, генерируя потенциалы непрерывного действия.
Устойчивая активация потенциал-зависимых кальциевых каналов продлевает приток кальция, вызывая устойчивое увеличение интенсивности флуоресце
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео