Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:14 мин. • May 29th, 2025
Начните с отделов мозга на нейродегенеративной модели мыши.
Инкубируйте с блокирующим раствором с добавлением моющего средства, чтобы увеличить проницаемость тканей и блокировать неспецифическое связывание. Выбросьте раствор.
Вводите первичные антитела, нацеленные на бета-амилоидные бляшки. Инкубируйте с возбуждением, чтобы антитела взаимодействовали с бета-амилоидными бляшками, затем промойте.
Добавьте вторичные антитела, помеченные красным флуорофором, и инкубируйте в темноте, чтобы антитела могли взаимодействовать.
Промойте для удаления несвязанных антител, затем промойте спиртом.
Добавьте куркумин, который связывает богатые бета-листами амилоиды с высоким сродством, затем умойтесь.
Далее проводят лечение с повышением концентрации алкоголя, обезвоживающим отделы головного мозга. Добавьте ксилол, чтобы удалить следы реагентов.
Установите срез на предметное стекло и наблюдайте под флуоресцентным микроскопом.
Используйте лазер с длиной волны 590 нанометров, чтобы возбудить красные флуорофоры на вторичных антителах. Сделайте снимок.
Переключитесь на лазер с длиной волны 480 нанометров, чтобы возбуждать куркумин, излучающий зеленую флуоресценцию.
Наложите изображения; красная и зеленая флу
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео