Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 6:41 мин. • May 29th, 2025
Возьмите фиксированный толстый участок мозга у мыши, зараженной вирусом бешенства.
Вирус заражает нейроны и реплицируется, в результате чего вирусные белки присутствуют в клетках.
Обработайте моющим средством для проникновения клеточных мембран и блокирующим раствором для маскировки неспецифических участков связывания.
Инкубируйте с первичными антителами, нацеленными на вирусные белки, с последующими вторичными антителами, конъюгированными с флуорофорами, которые связываются с первичными антителами.
Обработайте флуоресцентным красителем, связывающим нуклеиновые кислоты, чтобы пометить ядро.
Обезвоживайте ткань в возрастающей концентрации спирта, затем нанесите очищающий раствор для повышения прозрачности тканей для визуализации.
Установите секцию в камеру визуализации, заполните ее очищающим раствором и запечатайте.
Используя конфокальную лазерную сканирующую микроскопию, визуализируйте ткань отдельно с помощью флуоресцентных меток, а затем объедините их для создания двумерного изображения.
Получайте изображения в разных фокальных плоскостях ткани и объединяйте их для создания трехмерного представления для оценки прогрессирования инфекции.
Для иммуноокрашивания участков ткани головного моз
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео