Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:34 мин. • May 29th, 2025
Начните с заранее зафиксированных тангенциальных участков уплощенных корковых участков головного мозга. Промойте для удаления фиксирующих следов. Промойте
срезы раствором диаминобензидина или DAB и сульфатом никеля-аммония.
DAB диффундирует в нейроны коры головного мозга и вступает в реакцию с цитохромоксидазой в митохондриях, образуя темный осадок. Сульфат никеля и аммония затемняет осадок, усиливая контраст.
Добавьте параформальдегид, чтобы остановить реакцию окрашивания, затем прополощите.
Установите секции на предметное стекло и обезвожьте их с помощью этаноловых смывок.
Промойте изопропанолом и ксилолом, чтобы очистить секцию и улучшить светопропускание.
Нанесите монтажный носитель и наденьте на него покровное стекло.
При изображении под светлопольным микроскопом внутри нейронов коры головного мозга осадки поглощают и рассеивают свет, делая их темными.
Напротив, неокрашенные, очищенные участки пропускают свет и кажутся яркими.
Этот контраст выделяет корковые модули как темные, пятнистые структуры на более светлом фоне, представляющие собой активные нейронные кластеры, участвующие в обработке сенсорной информации.
Промойте ткань секции в буфере HEPES в течение 15 минут с легким пер
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео