Визуализация сетчатки мышей in vivo с помощью оптической когерентной томографии

Возьмем генетически модифицированную мышь под наркозом с атрофией зрительного нерва.

Зрачки расширены для усиленного проникновения света.

Введите обезболивающее средство для обездвиживания глаз. Наносите капли для увлажнения роговицы. Затем заверните мышь в марлю, чтобы сохранить тепло тела.

Нанесите гель, чтобы свести к минимуму преломление света. Закрепите мышь в кассете системы оптической когерентной томографии в спектральной области, обеспечив правильное положение головы.

Совместите оптические оси правого глаза и линзы изображения. Используйте элементы управления выравниванием для центрирования диска зрительного нерва в поле визуализации, обеспечивая правильное выравнивание сетчатки.

Низкокогерентный свет, направленный на сетчатку, отражается от слоев с различными показателями преломления. Отраженный свет объединяется с опорным лучом для создания интерференционных картин, создавая изображение поперечного сечения сетчатки с высоким разрешением.

После создания образа дайте мыши восстановиться.

Анализ ОКТ-изображений показывает утолщение слоя комплекса ганглиозных клеток, что является признаком атрофии зрительного нерва.

Удалите капли и повторите установку 10% фенилэфрина и 0,5% тропикамид. Когда глаза достаточно расширены для визуализации, смажьте глаза вязкими глазными каплями на основе гликоля, чтобы обеспечить увлажнение роговицы, и оберните мышь листом хирургической марли, чтобы она оставалась теплой.

С помощью губки или хлопчатобумажного фитиля нанесите на каждый глаз тонкий слой офтальмологического геля с добавлением 0,3% гипромеллозы. При этом отложите ресницы и бакенбарды в сторону. Расположите мышь в кассете головой прямо и направленной вперед, и осторожно положите кусачий брусок ей в рот. Подложите ватный валик под бок животного для исследуемого глаза.

Затем, удерживая зажимной наконечник прицела на объективе, предназначенном для мыши, поверните винт Z-переводчика против часовой стрелки, чтобы направить объектив к глазу. Установите положение мыши, вращая и поворачивая кассету и поворачивая прикусочную планку и винты X-переводчика до тех пор, пока экспериментальный глаз не будет расположен так, чтобы смотреть прямо в объектив.

Когда оптические оси глаз и хрусталика будут совмещены, выберите первое сканирование в исследовании. Нажмите «Начать прицеливание» и с помощью винта Z-транслятора переместите сетчатку по вертикали на левой панели и горизонтально на правой панели. Вращая кассету, переместите головку зрительного нерва вверх или вниз, чтобы переместить ее в середину правой панели. С помощью прикусочного винта выпрямите сетчатку в правой панели и поверните кассету, чтобы расположить головку зрительного нерва в центре левой панели.

Затем с помощью винта X-транслятора выровняйте сетчатку в пределах левой панели и, помня об основной функции каждого модулятора, дополнительно отрегулируйте положение сетчатки для идеальной централизации на диске зрительного нерва. Когда сетчатка окажется в нужном положении, нажмите кнопку «Начать снимок», чтобы начать сканирование оптической когерентной томографии в спектральной области.

Не забудьте сохранить скан и отчет. При необходимости отрегулируйте централизацию. Извлеките мышь из кассеты. Нанесите на каждый глаз офтальмологический гель с 0,3% гипромеллозой, и поместите мышь на нагревательную пластину с контролем до полного выздоровления.