Покадровая визуализация радиальной миграции корковых нейронов в трансдуцированных срезах эмбрионального мозга мыши

Возьмем мембранную вставку, содержащую трансдуцированные эмбриональные органотипические срезы мозга мыши, где нейроны и радиальные глиальные клетки экспрессируют флуоресцентные белки, что позволяет их визуализировать.

С помощью флуоресцентной микроскопии выберите срез с флуоресцентными корковыми нейронами, мигрирующими радиально к пиальной поверхности среза, используя неповрежденные радиальные глиальные скаффолды.

Перенесите мембранный вкладыш с выбранным ломтиком в чашку со стеклянным дном с фильтрующим материалом для поддержки клеточной активности во время визуализации.

Поместите чашку в камеру с климат-контролем инвертированного конфокального микроскопа, чтобы убедиться в жизнеспособности клеток.

Отрегулируйте параметры изображения, чтобы получать четкие изображения и свести к минимуму фотоповреждения.

Затем настройте Z-стек в целевой области для визуализации ячеистых структур.

Запускайте интервальную съемку через равные промежутки времени.

Проанализируйте изображения, чтобы оценить радиальную миграцию корковых нейронов из субвентрикулярной зоны к корковой пластинке по радиальным глиальным скаффолдам, выделив закономерности миграции нейронов.

Выберите срез мозга для визуализации, рассм