Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 5:13 мин. • May 29th, 2025
Возьмите предварительно подогретый раствор агарозы, содержащий обезболенную трансгенную личинку данио-рерио, экспрессирующую флуоресцентный белок в спинномозговых двигательных нейронах.
Перенесите личинку в стеклянную посуду с агарозным кольцом.
С помощью микроскопа переверните личинку на бок. Затем дайте агарозе застыть, обездвижив личинку.
Добавьте буфер с анестетиком для поддержания анестезии.
Поместите чашку на предметный столик конфокального микроскопа и с помощью визуализации в светлом поле определите местоположение дорсальной области спинного мозга.
Переключитесь в режим флуоресценции для визуализации флуоресцентных моторных нейронов.
Определите центральную z-плоскость сомы клетки для точной абляции.
Настройте параметры визуализации для получения изображений с высоким разрешением, минимизируя при этом фотоповреждение.
Как только желаемая z-плоскость окажется в фокусе, выполните абляцию целевой области нейронов с помощью сфокусированного ультрафиолетового лазера.
Лазерная энергия разрушает клеточные структуры, вызывая потерю флуоресценции и гибель клеток. Необратимая потеря флуоресценции подтверждает точную абляцию без воздействия на окружающие клетки.
С помощью регулируемой пипе
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео