Визуализация митохондрий в пределах интраэпидермальных нервных волокон
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 5:37 мин. • May 29th, 2025
Начните с участка эпидермальной ткани кожи, содержащего внутриэпидермальные нервные волокна или IENF, тонкие сенсорные нейронные окончания.
IENF богаты митохондриями, обеспечивающими энергию для передачи сигнала нейронов.
Ткань содержит флуоресцентно меченные IENF, митохондрии и ядра эпидермиса.
Используя инвертированный конфокальный микроскоп, последовательно регистрируйте дискретные флуоресцентные сигналы на соответствующих длинах волн для ядер, IENF и митохондрий.
Активируйте сканирование в реальном времени, чтобы зафиксировать сигнал IENF, охватывающий эпидермальный слой.
Затем выполните последовательное сканирование для каждого сигнала, чтобы устранить перекрестные помехи сигнала флуоресценции.
Из объединенного изображения с помощью программного обеспечения обрезайте и изолируйте синие флуоресцентные клетки эпидермиса.
Затем обработайте обрезанную область, чтобы улучшить разрешение зеленых сигналов IENF и красных митохондриальных сигналов.
Затем сгенерируйте 3D-изображение поверхности, чтобы создать маску для IENF, а затем наложите на изображение митохондриальной поверхности, чтобы изолировать нервно-специфические митохондрии.
В конечном итоге IENF отображаются голубым цветом, в то
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео