Визуализация нейрональных митохондрий с помощью серийного сканирующего электронного микроскопа

0 просмотров3:25 мин • May 29th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Возьмем обрезанный, залитый смолой участок ткани мозга мыши, содержащий гиппокамп.

Этот срез окрашен тяжелыми металлами для усиления контраста под электронным микроскопом.

Установите секцию на алюминиевый штифт с помощью цианоакрилатного клея.

Смажьте боковые стороны блока коллоидной серебряной пастой, чтобы создать проводящую траекторию к алюминиевому штифту.

Осмотрите тканевый блок с помощью серийного сканирующего электронного микроскопа (SBFSEM).

В SBFSEM ультрамикротом последовательно разрезает блок на ультратонкие слои, в то время как низковольтный электронный пучок сканирует открытую поверхность.

Детектор обратного рассеяния электронов захватывает 2D-изображения с высоким разрешением, выявляя митохондрии и окружающие клеточные структуры.

С помощью соответствующего программного обеспечения отрегулируйте яркость и контрастность для повышения четкости изображения.

Выровняйте последовательные изображения, чтобы реконструировать 3D-объем ткани мозга. Эта 3D-реконструкция позволяет точно отобразить морфологию митохондрий, пространственное распределение и их отношения в нейронных компартментах.

Обрежьте образцы в интересующей области и закрепите их на алюминиевом штифте с помощью гелеобразующего цианоакрилатного суперклея. Затем покройте образец коллоидной серебряной пастой по бокам блока, чтобы обеспечить проводящий путь к алюминиевому штифту. Исследуйте образцы тканей с помощью сканирующего электронного микроскопа, оснащенного внутрикамерным ультрамикротомным столиком и детектором низкокиловольтных обратно рассеянных электронов.

Представьте образцы с этими настройками. Начните анализ с выбора типа изображения, затем выберите 8-битный для преобразования изображений в 8-битный формат TIFF из исходного проприетарного 16-битного формата. Если автоматическое преобразование контраста и/или яркости на этом этапе не является идеальным для изображений, повторно откройте 16-битные изображения и нажмите изображение. Отрегулируйте яркость, контрастность.

Выберите диапазон, который подходит для всех изображений, и нажмите Применить. Затем выполните преобразование. Если произошло недопустимое перемещение изображений между срезами, выровняйте стеки изображений, выбрав «Подключаемые модули», «Регистрация» и «Линейное выравнивание стека» с помощью SIFT, и установите выравнивание для режима «Только трансляция», а не для жесткого тела.

Увеличьте размер холста перед регистрацией, выбрав изображение, настройте размер холста. В качестве альтернативы можно уменьшить изображение до области интереса, выбрав нужную область и затем обрезав ее. При необходимости масштабируйте изображения до меньшего, более удобного размера с помощью изображения j, затем выберите изображение и масштаб.

09:09

Целевые исследования с использованием серийного блока лица и целенаправленной ионного луча сканирования электронной микроскопии

Похожие видео

0 Просмотры

09:21

Митохондрии и эндоплазмические ретикулами imaging коррелятийным светом и объемной электронной микроскопией

Похожие видео

0 Просмотры

09:21

Последовательная блочно-лицевая сканирующая электронная микроскопия (SBF-SEM) образцов биологических тканей

Похожие видео

0 Просмотры

08:57

Сосредоточены ионного пучка фрезерные и сканирующей электронной микроскопии ткани мозга

Похожие видео

0 Просмотры

04:50

Нейромодуляция и митохондриальной Транспорт: Live изображений в нейронах гиппокампа в течение длительного времени

Похожие видео

0 Просмотры

01:21

Сканирующая электронная микроскопия с сфокусированным ионным пучком для 3D-реконструкции синаптически связанных нейронов

Похожие видео

0 Просмотры

04:11

Конфокальная визуализация движения митохондрий в олигодендроцитах в органотипических культурах срезов мозга

Похожие видео

0 Просмотры

07:47

Анализ мозга Митохондрии Использование последовательного Block-Face сканирующая электронная микроскопия

Похожие видео

0 Просмотры

11:16

Последовательная блочно-лицевая сканирующая электронная микроскопия (SBEM) для исследования дендритных шипов

Похожие видео

0 Просмотры

08:46

Трехмерная методика визуализации ультраструктурных изменений митохондрий в раковых клетках поджелудочной железы

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 1 августа 2026