Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:20 мин. • May 29th, 2025
Поместите ткань сетчатки, выделенную от трансгенной мыши, с флуоресцентно мечеными ганглиозными клетками сетчатки, или РГК, в записывающую камеру.
Визуальная информация передается в РГК, аксоны которых передают ее в мозг через зрительный нерв.
Подтипы РГК различаются по разветвлению дендритов, которые расслаиваются на подслои внутри внутреннего слоя сетчатки.
Расплющите ткань сетчатки и закрепите ее с помощью тканевого анкера.
Перенесите камеру на предметный столик микроскопа и перфузируйте насыщенный кислородом раствор для поддержания жизнеспособности RGC.
С помощью инфракрасного освещения определите флуоресцентные РГК.
Поместите пипетку, содержащую флуоресцентный индикатор, на RGC.
Приложите положительное давление, чтобы предотвратить засорение.
Переключитесь на отрицательное давление, втягивая мембрану в пипетку, чтобы сформировать уплотнение.
Примените всасывание, чтобы разорвать мембрану, создавая конфигурацию целых клеток, которая способствует диффузии индикаторов в дендриты.
Наблюдайте за дендритной морфологией и стратификацией для выявления подтипов RGC.
Промойте сетчатку в насыщенном кислородом внеклеточном растворе и перенесите ее в камеру со стеклянным дном с помощью пластиково
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео