Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:54 мин. • May 29th, 2025
Закрепите иммобилизованную трансгенную дрозофилу с экспонированной головой в регистрирующей камере на предметном столике флуоресцентного микроскопа.
Тело гриба мухи состоит из нейронов, экспрессирующих чувствительный к кальцию биолюминесцентный гибридный белок, который активируется предварительно загруженным кофактором.
Подсоедините к камере перфузионную трубку. Найдите флуоресцентные тела грибов, сосредоточившись на чашечке и медиальных долях. Подтвердите дренаж с помощью буфера.
Установите параметры визуализации и сосредоточьтесь на чашечке и медиальных долях. В темноте получите базовые флуоресцентные изображения тел грибов до воздействия стимулятора.
Перфузия никотина в кальцийсодержащем буфере активирует никотиновые ацетилхолиновые рецепторы, вызывая приток кальция и биолюминесцентное излучение света.
Промойте буфером для восстановления исходных условий. Промывайте
хлоридом калия для деполяризации нейронов, запуская внутриклеточное высвобождение кальция и излучение биолюминесцентного сигнала.
Промойте буфером для восстановления исходных условий.
Анализируйте изображения для оценки пространственной и временной активности кальция в чашечке и медиальных долях.
- Далее поместите образе
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео