Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:42 мин. • May 29th, 2025
Начните с обезболенной трансгенной личинки данио-рерио, обездвиженной в агарозе и помещенной в чашку Петри, содержащую раствор анестетика.
Поместите его под двухфотонный лазерный микроскоп, который использует два фотона для детальной визуализации.
Сосредоточьтесь на верхних и нижних слоях мозга, чтобы установить границы визуализации.
Делайте снимки на разной глубине для наблюдения за нейронами перед лазерным лечением.
Настройте фокус на интересующей области и отрегулируйте размер кадра, чтобы уточнить фокус на нейронах.
Выберите и облучите нейроны с помощью двухфотонного лазера.
Лазер индуцирует локализованное тепло, что приводит к гибели нейронов с минимальным повреждением окружающих тканей. Сделайте снимок.
Сравните изображения до и после лечения для оценки изменений флуоресценции.
Перефокусируйте нейроны в более глубоких плоскостях и повторите облучение, чтобы обработать все нейроны в интересующей области.
Сделайте повторный захват изображения и сравните его с изображением, полученным до обработки. Потеря флуоресценции после лазерного лечения подтверждает успешную нейрональную абляцию.
Поместите внедренную в агарозу личинку под 2-фотонный лазерный сканирующий микроскоп и запустите систем
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео