Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:59 мин. • June 17th, 2025
Начните со среза мозжечка, полученного из постнатального мозга детеныша крысы в многолуночном планшете, содержащем среду.
Удалите среду и инкубируйте срез в цитоплазматическом растворе флуоресцентного красителя, чтобы пометить гранулярные клетки (ГК).
Переложите ломтик на вставную мембрану Transwell и удалите излишки красителя.
Снимите вставку и заполните лунку носителем. Затем установите вставку на место и добавьте медиатор, чтобы покрыть ткань.
Инкубируйте, чтобы ткань прикрепилась к мембране вставки.
Перенесите планшет в инкубатор, прикрепленный к конфокальному макроскопу, и накройте пластину стеклянной крышкой.
Установите условия культивирования, инкубируйте ткань дальше, затем начните визуализацию.
При лазерном освещении меченые ГХ флуоресцируют.
Делайте покадровые снимки, чтобы визуализировать радиальную миграцию ГК через молекулярный слой мозжечка.
Используя программное обеспечение для обработки изображений, проанализируйте миграционное расстояние ГХ.
После нарезки образца с помощью усеченной белой ламповой пипетки перенесите его с небольшим количеством HBSS на шестилуночный планшет. Загрузите до трех ломтиков в каждую лунку. Далее, после опорожнения среды в каждую загруженную лунку,
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео