Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:06 мин. • June 17th, 2025
Начните с обезболенных личинок трансгенных рыбок данио в монтажной камере, содержащей насыщенный кислородом физиологический буфер под стереомикроскопом.
Мозжечок в головном мозге содержит генетически модифицированные нейроны Пуркинье, экспрессирующие флуоресцентные цитоплазматические белки.
Удалите лишнюю среду, затем добавьте расплавленную агарозу, чтобы обездвижить личинок для стабильной визуализации.
Ориентируйте личинки спинной стороной вверх, чтобы визуализировать мозжечок.
После застывания обрежьте излишки агарозы. С помощью стеклянной иглы иссеките пигментированную кожу, покрывающую мозг, чтобы обнажить ее.
Переверните агарозный блок на камеру визуализации, содержащую расплавленную агарозу, для получения изображений под перевернутым микроскопом.
Добавьте физиологический буфер для сохранения функции нейронов.
Расположите камеру под перевернутым конфокальным микроскопом. Применяйте возбуждающий свет для возбуждения флуоресцентных белков, что позволяет визуализировать помеченные нейроны.
Пигментированные клетки кожи, если их не удалить, рассеиваются и поглощают возбуждающий свет, снижая интенсивность флуоресценции.
Удаление кожи улучшает проникновение света для повышения интенсивности ф
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео