Методика чрескожной аспирации и обработки сперматозоидов придатка яичка матки

Начните с пациента мужского пола с азооспермией, состоянием, при котором в сперме отсутствуют мужские гаметы или сперматозоиды.

Область гениталий дезинфицируется и накрывается простыней, чтобы обнажить только мошонку, орган, в котором находятся яички, производящие сперматозоиды.

Осветите область и определите придаток яичка, структуру, отвечающую за созревание и хранение сперматозоидов.

Введите в ткань яичка шприц, содержащий специализированный культуральный раствор для гамет

.

Применяйте отрицательное давление во время прокола ткани, чтобы извлечь жидкость из придатка яичка, содержащую сперматозоиды.

Переложите собранную жидкость в чашку с питательным раствором для сохранения жизнеспособности сперматозоидов.

С помощью микроскопа подсчитайте зрелые, здоровые сперматозоиды, которые проявляют подвижность.

Перелейте раствор в пробирку, затем центрифугируйте для отделения сперматозоидов и удаления надосадочной жидкости.

Ресуспендируйте клетки в свежем культуральном растворе.

Выделенные сперматозоиды теперь готовы к использованию в процедурах лечения бесплодия.

Для начала соберите пакет хирургических инструментов, два шприца, дезинфицирующий раствор, стерильные резиновые перчатки и лейкопластырь. Осмотрите упаковку хирургических инструментов, подвергшуюся паровой стерилизации под высоким давлением, на предмет повреждений. Поместите упаковку на стол для инструментов и откройте внешний слой. Далее попросите андрологов надеть стерильные резиновые перчатки.

Откройте внутренний слой упаковки хирургических инструментов и проверьте стерилизационную ленту на предмет правильной стерилизации. Затем подготовьте два шприца объемом 5 миллилитров, оснащенных иглами по 0,7 миллилитров для анестезии и хирургического вмешательства. Откройте ампулу, содержащую инъекцию лидокаина. Используйте стерильный шприц объемом 5 миллилитров для аспирации раствора лидокаина и устранения пузырьков воздуха из шприца.

Теперь расположите подготовленного пациента на операционном столе в положении для литотомии. Сняв брюки, закрепите верхнюю одежду выше пупка, чтобы полностью обнажить промежность и нижнюю часть живота ниже пупка. Затем отрегулируйте угол наклона бестеневой лампы, чтобы освещать мошонку пациента.

С помощью овальных щипцов захватите стерильный марлевый шарик. Погрузите марлевый шарик полностью в дезинфицирующий раствор. И продезинфицируйте кожу, начиная с нижней части живота и двигаясь к передней и внутренней поверхности бедер, области промежности, пенису и мошонке. Затем подложите стерильное квадратное полотенце под ягодицы пациента. Расстелите стерильное полотенце вокруг операционной области, полностью обнажив мошонку во всей области.

С помощью стерильной пастеровской пипетки переведите примерно 2 миллилитра питательного раствора G-MPOS-PLUS в чашку для культивирования. После закрытия крышки доставьте чашку медсестре в операционную через передаточное окно. Теперь поставьте форму для культуры на стерильное полотенце на столик для инструментов и откройте крышку.

С помощью еще 5 миллилитров шприца отасуньте примерно 0,2 миллилитра питательного раствора G-MPOS-PLUS и удалите пузырьки воздуха. Затем возьмитесь за мошонку пациента левой рукой, закрепив придаток яичка, который требует прокола. Пальпируйте придаток яичка правой рукой, чтобы подтвердить место хирургического прокола.

Затем с помощью шприца объемом 5 миллилитров, содержащего культуральный раствор G-MPOS-PLUS в правой руке, проколите перпендикулярно коже в ткани придатка яичка. Поддерживая отрицательное давление, многократно прокалывайте ткань придатка яичка, чтобы жидкость могла проникнуть через иглу, затем извлеките иглу для прокола.

Введите экстрагированную жидкость из придатка яичка в чашку для культивирования. После этого аспирируйте близлежащий культуральный раствор G-MPOS-PLUS для промывания шприца, чтобы максимально увеличить количество собранной жидкости из придатка ствола. Теперь перенесите чашку для культивирования, содержащую культуральную жидкость G-MPOS-PLUS и жидкость из придатка яичка, лаборанту по эмбрионам через окно передачи.

Поместите чашку для культуры на предметное столико перевернутого оптического микроскопа и закрепите ее. Включите выключатель питания микроскопа и отрегулируйте интенсивность света соответствующим образом. Затем поверните преобразователь инвертированного оптического микроскопа. Выберите объектив с 10-кратным увеличением и вращайте спирали грубой и тонкой фокусировки, чтобы отрегулировать фокусное расстояние.

После того, как сперматозоиды придатка яичка обнаружены, наблюдайте за ними в 40-кратном увеличении, чтобы оценить их количество и качество. С помощью стерильной пипетки Пастера перенесите жидкость из чашки для культивирования в 15-миллилитровую центрифужную пробирку после наблюдения достаточного количества активных сперматозоидов. Поместите центрифужную пробирку на балансировочный лоток и используйте центрифужную пробирку той же спецификации, содержащую стерильную воду, до уровня.

Затем откройте дверцу центрифуги. Поместите трубки в слот для карты симметрично и закройте дверцу. Нажмите кнопку «Пуск», чтобы начать процесс центрифугирования. После завершения процесса извлеките из центрифуги пробирку с жидкостью из придатка яичка. Затем аккуратно отсасывайте надосадочную жидкость с помощью стерильной пастеровской пипетки и выбросьте набранную надосадочную жидкость.

С помощью стерильной пипетки Пастера перенесите осадок со дна центрифужной пробирки в новую центрифужную пробирку, содержащую примерно 2 миллилитра питательного раствора G-IVF Plus. Аккуратно пипеткой нанесите раствор для тщательной ресуспензии осадка. Перенесите примерно 0,5 миллилитра питательного раствора G-IVF Plus в центрифужную пробирку. Аккуратно продуйте сперматозоиды придатка яичка на дне, чтобы они полностью подвешены, и используйте их для процедуры ИКСИ.