Биолюминесцентная визуализация для оценки роста опухоли в органотипическом срезе мозга мыши

Возьмите многолуночный планшет, содержащий органотипический срез мозга мыши с опухолевыми клетками. Эти клетки экспрессируют фермент люциферазу.

Поднимите вкладыш, чтобы добавить раствор люциферина в среду, и хорошо перемешайте. Поместите вставку обратно в лунку.

Люциферин проникает в опухолевую клетку и окисляется люциферазой, выделяя биолюминесценцию.

Поместите пластину в камеру визуализации системы визуализации in vivo, которая может улавливать биолюминесценцию, излучаемую образцом.

Заблокируйте камеру, чтобы предотвратить внешние световые помехи.

Отрегулируйте настройки камеры так, чтобы захватывать одну скважину на одно изображение.

Переместите предметный столик так, чтобы он располагался прямо под камерой.

Оптимизируйте время сбора данных на основе интенсивности излучаемой биолюминесценции.

Определите форму опухоли, затем начните биолюминесцентную визуализацию.

Количественно оцените биолюминесцентный сигнал для оценки роста опухоли на срезе мозга.

Пипеткой 5 микролитров 30 мг на миллилитр раствора люциферина в среду под вкладыши внутри стерильного колпака. Поместите шестилуночный планшет с крышкой внутрь камеры визуализации прибора под неподвижной камерой и заприте дверцу камеры.

Откро