Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:15 мин. • June 17th, 2025
Начните с живого постнатального экспланта сетчатки мыши, установленного на мембранном фильтре и помещенного в инкубационную камеру под конфокальным микроскопом.
Сетчатка трансфицируется для экспрессии флуоресцентного белка в мембранах амакриновых интернейронов со вспышкой звездообразования.
Поместите предварительно смоченный образец груза на сетчатку, чтобы стабилизировать ее.
Заполните камеру буфером.
Поддерживайте оптимальный буферный поток и температуру в камере для сохранения жизнеспособности нейронов.
Поместите погружной объектив в камеру визуализации.
Начните эпифлуоресцентную визуализацию.
Лазерный свет, направленный через объектив, возбуждает флуоресцентный белок в амакриновых клетках.
Излучаемая флуоресценция регистрируется с помощью того же объектива, что позволяет визуализировать меченые амакриновые клетки.
Определите ярко флуоресцентную клетку для визуализации.
Задайте параметры изображения.
Захватывайте изображения в нескольких Z-плоскостях для достижения 3D-визуализации всей морфологии дендритов.
Выполняйте покадровую съемку для отслеживания изменений в морфологии дендритов с течением времени.
Соберите инкубационную камеру для визуализации в реальном времени и заполните ее кислор
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео