Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:33 мин. • June 17th, 2025
Начните с оплодотворенного куриного яйца в окне, содержащего эмбрион ранней стадии, нервная трубка которого вырезана на уровне сомитов от одного до семи.
Возьмите меченую GFP донорскую нервную трубку из трансгенного куриного эмбриона, соответствующего стадии, и имплантируйте ее реципиенту, обеспечив правильную анатомическую ориентацию.
Удалите лишнюю жидкость вокруг трансплантата для улучшения адгезии между тканями донора и хозяина.
Заклейте окно прозрачным скотчем, чтобы предотвратить обезвоживание и загрязнение.
Инкубируйте яйцо до тех пор, пока зародыш не разовьется до нужной стадии.
Снимите ленту.
Определите вителлиновую вену на желтке, которая несет кровь к эмбриону, и удалите вышележащую вителлиновую оболочку.
С помощью стеклянной иглы постепенно вводите в вену липофильный флуоресцентный краситель.
Визуализируйте эмбрион под стереофлуоресцентным микроскопом.
Введенный краситель связывается с эндотелиальными клетками, выстилающими кровеносные сосуды, выделяя сосудистую сеть, в то время как меченая GFP нервная трубка позволяет отслеживать нейронную сеть.
Когда вы будете готовы начать процедуру трансплантации, осторожно перенесите рассеченную нервную трубку со стекла часов на эмбрион хоз
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео