Биолюминесцентная визуализация in vivo нейронных клеток-предшественников человека в мозге мыши

Начнем с мыши с иммунодефицитом, которой ввели в мозг генетически модифицированные человеческие нейронные клетки-предшественники, или NPC.

Эти клетки экспрессируют люциферазу, фермент, производящий свет.

Введите люциферин, субстрат для люциферазы, внутрибрюшинно мыши.

Обезболите мышь, затем нанесите на глаза офтальмологическую смазку, чтобы предотвратить высыхание, и побрейте голову для визуализации.

Расположите мышь в положении лежа внутри камеры визуализации с заданными условиями для визуализации.

Люциферин циркулирует в кровотоке и попадает в ткани мозга, проходя через эндотелиальные клетки, достигая трансплантированных NPC.

Внутри клеток люциферин вступает в реакцию с люциферазой и производит биолюминесцентный свет.

Система визуализации улавливает эти биолюминесцентные сигналы, излучаемые местом трансплантации NPC.

Эти биолюминесцентные сигналы подтверждают успешную трансплантацию человеческих NPC в мозг мыши.

Введите люциферин внутрибрюшинно, а через пять минут обезболите животных непрерывным приемом изофлурана. Побрейте усыпленных животных в области головы с помощью обычной бритвы для волос. Поместите животное в камеру визуализации и начните визуализацию через 15 минут после инъекции