Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 5:18 мин. • June 17th, 2025
Возьмем парализованную трансгенную личинку данио-рерио, установленную в перфузионной камере.
Личинка экспрессирует мембранно-локализованные показатели кальция в волосковых клетках невромаста, компонента системы латеральной линии, которая обнаруживает движение воды.
Волосковые клетки состоят из апикальных пучков волос и базальных пресинаптических областей, которые образуют синапсы с афферентными нейронами для передачи сигналов.
Под конфокальным микроскопом используйте малое увеличение, чтобы расположить жидкостную пипетку рядом с личинкой.
Увеличьте увеличение, чтобы найти нейромачту, переместите пипетку рядом с ней и переключитесь на
флуоресцентную визуализацию.
Подавайте импульсы жидкости для отклонения пучков волос, открывая каналы механотрансдукции для апикального притока катионов, включая ионы кальция.
Слабофлуоресцентные индикаторы связываются с кальцием, вызывая локализованное повышение флуоресценции.
Приток катионов деполяризует клетку, вызывая поступление кальция через потенциал-зависимые каналы в базальном пресинапсе, где он связывается с индикаторами и локально увеличивает флуоресценцию.
Визуализируйте апикальную и базальную динамику кальция в режиме реального времени.
Во время эт
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео