Испытание Хвост подвеска

Тест на подвешивание хвоста является распространенным поведенческим тестом, используемым для прогнозирования эффективности антидепрессантов при различных экспериментальных манипуляциях. В этом фильме демонстрируются процедуры этого теста. Тест на подвешивание хвоста валидирован для мыши и не рекомендуется для более крупных грызунов.

В тесте на подвешивание хвоста мыши подвешиваются за хвосты. Мышь остается в подвешенном состоянии в течение шести минут. В течение этого времени записывается поведение субъекта.

По окончании шестиминутного тестового периода лента удаляется с хвоста испытуемого. После завершения теста визуальные записи передаются на компьютер или видеомонитор. Для анализа наблюдатель измеряет время, которое мышь тратит на борьбу в течение всего шестиминутного сеанса.

Соединения с антидепрессивными свойствами увеличивают количество времени, которое я трачу на борьбу. Это отражается в более коротких периодах неподвижности. Например, мы сообщали, что стабилизирующее настроение лекарство литий, который клинически полезен в качестве дополнительного антидепрессанта, уменьшает время неподвижности в тесте на подвешивание хвоста.

Здравствуйте, меня зовут Шон из лаборатории доктора Тодда Гулда на кафедре психиатрии Медицинской школы Университета Мэриленда в Балтиморе. Привет, я Шантель из той же лаборатории. В этом видео мы покажем вам, как провести и оценить тест на заднюю подвеску.

Тест на хвостовую суспензию используется для оценки потенциальной эффективности лечения антидепрессантами. Итак, давайте отправимся в лабораторию и покажем вам, как провести эксперимент. Хотя это и не обязательно, мы используем специально разработанную коробку хвостовой подвески.

Для этого теста. Наша коробка с хвостовой подвеской разделена на четыре отсека, каждый из которых зарезервирован для одной мыши. Разделители мешают мышам наблюдать друг за другом во время теста.

Тем не менее, можно использовать полку или другую конструкцию для подвешивания мышей. Размеры испытательного бокса хвостовой подвески подобраны таким образом, чтобы мыши не могли дотянуться до краев и удержаться за них. Перед началом эксперимента отрежьте достаточное количество фрагментов ленты и отметьте сегмент, который будет использоваться для прилипания к хвосту.

В нашей лаборатории мы будем использовать 17-сантиметровые фрагменты ленты. В двух сантиметрах от конца этой ленты должен быть размечен фрагмент, который будет использоваться для приклеивания к хвосту. Помещаем хвост в середину этой двухсантиметровой части.

Установите испытательный бокс хвостовой подвески и видеокамеру. Перед введением животных бокс следует тщательно промыть стерилизующим раствором для нейтрализации запахов, оставшихся от предыдущих подданных. В нашей лаборатории мы используем две разные коробки хвостовой подвески, идентичные во всем, кроме цвета.

Для мышей-альбиносов темно-серая коробка обеспечивает хороший контраст для видеозаписей. Для более темных штаммов мыши подойдет белая рамка. Запустите генератор белого шума.

Он должен маскировать любые прерывистые звуки. Приведите мышей в процедурный кабинет для акклиматизации. Условия в комнате должны поддерживаться постоянными и свободными от шумов, перепадов уровня освещенности и других возможных помех.

Этот период обычно составляет не менее одного часа. Как только период акклиматизации заканчивается, тест можно продолжить, чтобы предотвратить восхождение определенных линий мышей на их хвосты. Во время испытания хвостовой подвески мы используем пластиковые цилиндры, которые размещаем поверх хвостов.

Эти цилиндры опираются на основание хвостовой части во время испытания. В нашей лаборатории мы используем пластиковые цилиндры длиной четыре сантиметра, диаметром один сантиметр и весом 1,5 грамма. Если для предотвращения лазания используются пластиковые баллоны, их следует разместить на хвосте перед нанесением ленты.

Наклеиваем скотч на самый конец хвоста так, чтобы два-три миллиметра хвоста оставались снаружи ленты. Приклейте ленту к хвостам мышей в их домашней клетке. Используйте отмеченный конец ленты и убедитесь, что лента прилипает к хвосту и обратно на себя.

После того, как лента будет наложена, закрепите каждую мышь на стенках клетки, чтобы предотвратить запутывание ленты, прикрепленной к разным животным. Завершите этот процесс быстро. В противном случае мыши будут подвергаться ненужному стрессу.

Запись должна быть начата до того, как животные будут отстранены. Подвешивайте животных, поместив свободный конец ленты на подвесную перекладину в порядке, который уравновешивается между группами обработки и таким образом, чтобы не загораживать обзор камеры. Поскольку мыши подвешиваются по одной, у каждого животного немного разное время начала теста.

Убедитесь, что вы начинаете оценивать каждую мышь точно в начале периода ее приостановки. Важно не загораживать обзор камеры. Поскольку весь сеанс хвостовой подвески будет оцениваться как препятствующий, изображение с камеры может привести к отсутствию данных.

Убедитесь, что все концы ленты расположены перпендикулярно подвесному стержню с одинаковой длиной провисания. Для каждого предмета запустите таймер. Испытание хвостовой подвески длится шесть минут.

По истечении шестиминутного тестового периода снимите ленту с конца каждого хвоста и верните мышей в их домашнюю клетку. В конце теста информация о предмете должна быть записана на видео. После того, как мыши будут возвращены в помещение колонии, тестовый ящик следует тщательно вымыть и протереть стерилизационным раствором.

Теперь, когда мы закончили с тестированием, мы обсудим оценку поведений. Единственная переменная, которая обычно оценивается при оценке теста на подвешивание хвоста, — это время, в течение которого животные неподвижны. Чтобы получить время неподвижности, мы измеряем время, в течение которого мыши подвижны, и вычитаем это из шестиминутного времени теста. Мы будем оценивать все шесть минут теста.

Сначала мы рассмотрим мышей, которые не оцениваются, чтобы позволить наблюдателю сосредоточиться только на одном животном за каждое затраченное время мыши. Мобильный телефон измеряется с помощью экранного секундомера, управляемого устройством с геймпадом. Здесь, как вы можете видеть, есть два отдельных экранных секундомера, которые управляются одновременно.

Первый секундомер отсчитывает время от 360 секунд и показывает наблюдателю продолжительность теста. Второй секундомер измеряет время, в течение которого объекты остаются подвижными. Как вы можете заметить, второй секундомер закрыт первым секундомером, и наблюдателю видны только его десятичные дроби в миллисекундах.

Таким образом, наблюдатель сможет видеть, считает ли секундомер, но не сможет увидеть общее время подвижности до тех пор, пока подсчет очков не будет завершен. Мы делаем это, чтобы предвзятость наблюдателя не влияла на результаты. Мыши, особенно в начале сеанса, демонстрируют поведение, связанное с побегом.

Это поведение включает в себя попытки дотянуться до стенок снаряда и подвесной перекладины, сильные встряхивания тела и движения конечностей, похожие на бег. Эти движения явно представляют собой подвижность. Однако по мере прохождения теста движения становятся более тонкими.

В нашей лаборатории мы не считаем подвижностью мелкие движения, которые ограничиваются передними ногами, но без каких-либо движений задних ног. Кроме того, маятниковые колебания, которые возникают за счет набора импульса во время предыдущих подвижных схваток, не считаются подвижностью. Теперь давайте посмотрим на оценку реальной сессии испытаний хвостовой подвески.

Обычно сообщается о времени неподвижности, а не о времени подвижности. Время неподвижности можно рассчитать, вычитая общее время подвижности из 360 секунд тестового времени. Озвучивание. Испытание на хвостовую подвеску требует обучения и практики.

Важно установить внутренний стандарт лаборатории и обучать новых наблюдателей до тех пор, пока они не достигнут высокого уровня надежности. В этой статье мы объясняем, как проводить и оценивать испытание на хвостовую подвеску. Удачи вам в дальнейших экспериментах.