Affinity осадков активного Rho-GEFs Использование GST с метками Мутант Rho белка (GST-RhoA (G17A)) из эпителиальных клеточные лизаты

18.7K просмотров

Цитируется: 14

11:28 мин.

31 марта 2012 г.

10.3791/3932-v

31 марта 2012 г.

18.7K просмотров

Faiza Waheed¹^,² , Pamela Speight¹^,² , Qinghong Dan¹^,² , Rafael Garcia-Mata³ , Katalin Szaszi¹^,²

¹Keenan Research Centre, Li Ka Shing Knowledge Institute, St. Michael's Hospital , ²Department of Surgery, University of Toronto, ³Department of Cell and Developmental Biology, University of North Carolina at Chapel Hill

Метод, представленные здесь описывается анализ следовать активации RhoA конкретных ВВП / GTP Факторы биржи (GEFs) в культуре клеток путем использования мутантов RhoA стоимость гибридного белка, который имеет высокое сродство к активированный GEFs. GEFs осаждаются из клеточных лизатов, обнаруженные западными блоттинга и количественно денситометрии.