Брейн Сорс изображений в Доклинические крыс Модели фокальной эпилепсии с помощью высокого разрешения ЭЭГ записей

Общая цель этой процедуры заключается в проведении анализа источников мозга с использованием записей ЭЭГ с высоким разрешением, полученных от крыс с фокальной эпилепсией. Это достигается путем помещения мини-колпачка ЭЭГ в дистиллированную воду с 0,2% хлорида на ночь, а на следующий день заполнение каждого электрода смешанной проводящей пастой для улучшения импеданса электрода. Второй шаг — установить мини-колпачок ЭЭГ на крысу под действием седативных препаратов и записать данные ЭЭГ с высоким разрешением.

Далее записанные сигналы ЭЭГ предварительно обрабатываются для получения усредненных сигналов для различных типов интериктальных эпилептиформ с использованием метода пороговых значений и метода вейвлет-декомпозиции. Последним шагом является создание модели объемного проводника головы крысы с положением электродов на основе индивидуальной или вероятностной МРТ. В конечном счете, обратное решение ES Loretta вычисляется, чтобы показать предполагаемые источники мозга, которые, как ожидается, связаны с эпилептогенными областями мозга.

Доклинические модели RAM очень полезны для изучения эпигенеза с помощью электрофизиологического метода. Несмотря на то, что инвазивная электрофизиологическая запись использовалась в прошлом для изучения эпилептических крыс, не существует доступных методов для проведения визуализации всего мозга у этой крысы без игольчатой анестезии. В данном исследовании мы предлагаем целую методологию для ее достижения.

В этом видео я покажу вам, как подготовить и настроить ЭЭГ мини. Я возьму на себя все процедуры по подготовке к записи. Во время записи G я буду работать с записывающим оборудованием и программным обеспечением.

Кроме того, я покажу, как проводить анализ источника мозга по записанным данным. Для начала этой процедуры смешайте электродную пасту ЭЭГ с 0,9% раствором NACL. Добавьте каплю метиленового синего, чтобы визуализировать электродную пасту внутри электродов и на коже.

Далее поместите смешанную пасту в шприц и убедитесь, что в ней нет пузырьков воздуха. Затем заполните все 32 электрода пастой снизу без введения пузырьков воздуха в рамках процедуры подготовки крысы, после чего обрежьте голову крысы, уменьшите изофтор до 2%Затем поместите крысу на грелку в стереотаксическом аппарате. Зафиксируйте ушные проходы с помощью ушных планок и закрепите носовой конус для подачи анестетика.

Далее нанесите офтальмологическую мазь на глаза животного. Впоследствии побрейте голову и натрите кожу 90%-ным изопропиловым спиртом, чтобы стимулировать сосуды и удалить жир. Затем положите тампон с солевым раствором на кожу головы и полностью покройте его, чтобы сохранить хорошую проводимость кожи до тех пор, пока мини-шапочка ЭЭГ не будет готова к размещению.

Подключите к телу крысы датчики температуры дыхания и три электрокардиограммы в отведении, чтобы непрерывно контролировать его физиологию во время процедуры записи. Во время этой процедуры удалите тампон с солевым раствором с кожи головы крысы и поместите приготовленный мини-колпачок ЭЭГ на его кожу. Зафиксируйте мини-колпачок резинками.

Нанесите слой электродной пасты с высокой проводимостью как на заземляющий, так и на референсный электроды. Впоследствии поместите их на соответствующие уши. Затем подключите мини-шапочку ЭЭГ к усилителю.

Посмотрите на предварительный просмотр трасс ЭЭГ и проверьте работу всех электродов. Затем введите Декстер в дозе 0,25 мг/кг крысе внутрибрюшинно и немедленно снизьте уровень изооф фтора до 0%Если частота дыхания не находится в диапазоне от 30 до 60 ударов в минуту, осторожно увеличьте изооф фтора максимум до 1%. Теперь начните запись ЭЭГ и проверьте наличие пароксизмальной активности в следах ЭЭГ. После записи отметьте положения трех выступающих кругов мини-шапочки ЭЭГ поверх кожи, вставив внутрь них цветную ручку.

Прежде чем снять мини-шапочку для ЭЭГ, сфотографируйте голову крысы с ориентирами. Обнаружение и классификация СВУ Используя самостоятельно разработанные коды в matlab, для анализа источника мозга используются средние сигналы ЭЭГ для каждого подтипа ИЭГ. В следующей процедуре мозговой штурм программного обеспечения с открытым исходным кодом будет использоваться с атласом МРТ для вустерских крыс, ввод МРТ и поверхности мозга в программное обеспечение, генерация поверхности головы с настройками по умолчанию.

Затем сгенерируйте скальп и внутренние внешние поверхности черепа на основе МРТ Для расчета свинцового поля проверьте ориентацию и расположение каждой поверхности по отношению к МРТ, используя опцию визуализации, используя полученное изображение головы крысы для совместной регистрации положений трех ориентиров на МРТ и точек сетки ориентиров. В качестве эталонов сгенерируйте положения электродов по мере закрепления электродов на каркасе. Затем введите сгенерированный файл канала для мозгового штурма отображения программного обеспечения и подтвердите расположение всех электродов для вычисления матрицы поля свинца.

Введите значения проводимости, которые удовлетворяют соотношению кожи, черепа и мозга. Получение матрицы поля свинца на основе модели объемного проводника и созданных положений электродов. После этого введите средние сигналы ЭЭГ для подтипа ИЭУ, выбрав вариант метода оценки источника, например S Loretta.

Обратное решение будет получено на основе рассчитанной матрицы поля отведения и входных сигналов ЭЭГ на конечном графике. Показанные здесь оценочные источники представляют собой временные ряды расположения источников СВУ в мозге по отношению к различным кластерам в спайках и резких волнах. Оценка проводилась в определенное время, отмеченное красной вертикальной линией.

Вот топографии ЭЭГ, а вот источники коркового тока. На этом рисунке показаны предполагаемые источники мозга во время припадка, время экземпляра отмечено красными вертикальными линиями. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как подготовить простую мини-шапочку для записи высокооборотной ЭЭГ, а также для проведения анализа источника мозга на крысе.

Методология, которую мы представили здесь, была применена к клинической модели, чтобы понять механизмы лежащего в основе эпигенеза.