OP-IVM: Сочетание созревания in vitro после извлечения ооцитов с гинекологической хирургией
9 мая 2021 г.
Созревание in vitro (IVM) перед гинекологической операцией (OP-IVM) сочетает в себе IVM после извлечения ооцитов с обычной гинекологической хирургией и служит расширением обычных применений IVM для сохранения фертильности.
Технология OP-IVM является расширением обычного протокола IVM, который сочетает в себе IVM после извлечения ооцитов с обычной гинекологической хирургией. Он подходит для бесплодных или субфертильных женщин, которым необходимо получить гинекологическую операцию перед лечением АРТ или сохранением фертильности, пациентов с синдромом поликистозных яичников с резистентностью кломифену, которые нуждаются в лапароскопической операции по сверлению яичников, бесплодных пациентов, которые нуждаются в доброкачественных гинекологических операциях, таких как гистероскопическая миомэктомия, полипэктомия, трансторакальная резекция перегородки и лапароскопическая операция на трубе, и оофороцистэктомия перед лечением АРТ, а также пациенты с раком и гематологическими заболеваниями, которые получают химиолучевую терапию или лучевую терапию, они могут сделать эту операцию для сохранения фертильности. Поместите ультразвуковой зонд внутрь влагалища, чтобы сканировать и записывать количество фолликулов в обоих яичниках.
Найдите место, ближайшее к яичнику в качестве места пункции, избегая кишечника, мочевого пузыря и крупных кровеносных сосудов. Промыть аспирационную иглу 19 калибра с одним просветом со стабильной по рН средой обработки, затем ввести иглу в яичники под руководством ультразвука. Аспирировать фолликулярную жидкость с помощью иглы под давлением от 80 до 90 миллиметров ртутного столба, слегка вращая иглу, чтобы аспирировать как можно больше фолликулярной жидкости.
Используйте гепарин для снижения вязкости фолликулярной жидкости во время аспирации. Отрегулируйте положение зонда, чтобы держать его как можно ближе к яичникам в любое время и надавить на вагинальную форникс с надлежащей силой, чтобы уменьшить травму и кровотечение. Обязательно завершите аспирацию фолликулярной жидкости в течение 25-30 минут.
Вытащите иглу после финиша в одном яичнике, промойте иглу с помощью погрузочной среды и проколите другую сторону тем же методом. Работая в гомотермической плоскости с 37 градусами Цельсия, подготовьте рабочую муляж, чашку Петри и клеточный ситечко. Промыть культуральная трубку и ситечко предварительно нагретой средой, стабильной по рН.
Фильтруйте аспирированную фолликулную жидкость с помощью 70-микрометрового нейлонового клеточного ситечка, многократно промывая культуральную трубку и ситечко предварительно нагретой средой, стабильной по рН. Убедитесь, что все незрелые КОК полностью перенесены на блюдо культуры. Переведите кровь в чистые среды обработки.
Затем перенесите клеточный ситечко на новую посуду и вымойте его. Аспирировать и перенести носители обработки с КОК, гранулезными клетками и тканями в новое блюдо. Исследуйте КОК под стереоскопом с 40-кратным увеличением.
Быстро переносите незрелые в предварительно подогретую IVM-среду ооцитов. Затем исследуйте КОК в сгустке крови и в клеточном ситечке. Перенесите КОК и среды обработки в предварительно подогретую среду ооцитов IVM.
Культивировать незрелые КОК в течение 28-32 часов при 37 градусах Цельсия в увлажненный воздух, содержащий 5% углекислого газа и 5% кислорода. К декабрю 2019 года OP-IVM использовался для сохранения фертильности 274 пациентов. Одним из примеров был 28-летний пациент, у которого было диагностировано первичное бесплодие, левая придатковая киста и СПКЯ.
Она получила лапароскопическую цистэктомию и OP-IVM в сентябре 2016 года и 27 незрелых КОК. После 28 часов в культуре семь ооцитов в стадии МИИ были отобраны и оплодотворены ИКСИ. Через пять дней две бластоцисты были заморожены.
Один из них был размороженным в феврале 2017 года и перенесен в матку. Пациентка родила здоровую девочку в ноябре. OP-IVM впервые был применен для извлечения ооцитов бесплодных женщин с СПКЯ, которые проходят операцию по сверлению яичников, и теперь его применение может быть распространено на субфертильных женщин, которым необходимо получить доброкачественную гинекологическую операцию, даже женщин с раком для сохранения фертильности.
Это указывает на то, что диапазон применения IVM может быть расширен путем сочетания его с другими традиционными гинекологическими операциями для сохранения женской фертильности.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Обзор
OP-IVM представляет собой инновационный подход, сочетающий созревание ооцитов in vitro (IVM) с плановыми гинекологическими операциями. Этот метод особенно полезен для женщин с бесплодием или сниженной фертильностью, которым требуется хирургическое вмешательство перед началом программы ВРТ.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Репродуктивная медицина
- Гинекология
- Сохранение фертильности
Введение
- IVM — это метод, используемый для созревания ооцитов вне организма.
- OP-IVM расширяет применение IVM, включая в него хирургические процедуры.
- Данный метод отвечает потребностям женщин с различными проблемами репродуктивного здоровья.
- Он особенно актуален для пациентов, проходящих лечение, которое может повлиять на фертильность.
Цель исследования
- Обеспечить возможность сохранения фертильности для женщин, нуждающихся в гинекологической операции.
- Улучшить исходы для пациенток с такими заболеваниями, как синдром поликистозных яичников.
- Облегчить проведение процедур ВРТ после операции.
Используемые методы
- Ультразвуковой контроль при заборе ооцитов из яичников.
- Использование однопросветной аспирационной иглы 19G для аспирации фолликулярной жидкости.
- Мониторинг количества и состояния фолликулов перед операцией.
- Оценка соответствия пациента критериям отбора на основании медицинского анамнеза и хирургических потребностей.
Основные результаты
- Успешное извлечение ооцитов у пациенток, переносящих гинекологические процедуры.
- Улучшение результатов сохранения фертильности у пациенток с онкологическими или иными заболеваниями, нарушающими репродуктивную функцию.
- Доказанная возможность сочетания IVM с хирургическими вмешательствами.
- Положительные отзывы пациенток о применении данного комбинированного подхода.
Выводы
- OP-IVM представляет собой значительный прогресс в стратегиях сохранения фертильности.
- Данный метод может стать жизнеспособным вариантом для женщин, которым требуется гинекологическая операция.
- Необходимы дальнейшие исследования для оптимизации протоколов и улучшения результатов.
Часто задаваемые вопросы
Значимость для промышленности
OP-IVM расширяет возможности получения зрелых яйцеклеток in vitro (IVM) путем интеграции этого метода в рутинную гинекологическую хирургию, что позволяет сохранить фертильность пациенткам, переносящим доброкачественные хирургические вмешательства. Данный подход восполняет критический пробел в репродуктивной медицине за счет извлечения незрелых ооцитов, которые в противном случае были бы утилизированы в ходе операции, тем самым увеличивая пул жизнеспособных гамет для применения вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Комбинируя забор ооцитов с плановыми гинекологическими операциями, OP-IVM повышает клиническую эффективность и поддерживает стратегии сохранения фертильности, ориентированные на пациента, как при онкологических, так и при доброкачественных заболеваниях.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Первичный поиск и валидация мишени
- Научная ценность: позволяет исследовать пути созревания ооцитов в физиологически значимых условиях после хирургического стресса.
- Практическая ценность: предоставляет воспроизводимую модель для изучения восстановления комплекса «кумулюс — ооцит» (COC) и эффективности созревания после аспирации.
Скрининг и разработка анализа
- Научная ценность: способствует разработке стандартизированных методов оценки качества ооцитов с использованием морфоядерного отбора после культивирования IVM.
- Практическая ценность: упрощает масштабируемые рабочие процессы криоконсервации зрелых ооцитов (стадия MII), полученных в ходе хирургических вмешательств.
Трансляционные и доклинические исследования
- Научная ценность: Предлагает релевантную для заболеваний систему оценки эффективности сохранения фертильности при таких состояниях, как СПКЯ и онкологическая терапия.
- Практическая ценность: Демонстрирует трансляционную преемственность от забора ооцитов через IVM и криоконсервацию до последующих результатов ВРТ.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
OP-IVM позиционирует созревание ооцитов как связующее звено между диагностическими гинекологическими процедурами и последующими этапами ВРТ, обеспечивая плавную интеграцию сохранения фертильности в протоколы хирургического лечения.
- Фундаментальная биология: позволяет проверять гипотезы о реакции фолликулов на гормональные и хирургические стимулы, оценивая выход незрелых КОК и скорость их созревания.
- Скрининг: обеспечивает готовность анализа для оценки функциональности ооцитов с помощью стандартизированного культивирования IVM (28–32 часа) и отбора ооцитов на стадии MII.
- Аналитика: позволяет получать количественные данные, включая выход ооцитов, процент созревания и показатели выживаемости после криоконсервации для сравнения различных условий.
- Трансляционные исследования: связывает хирургическое вмешательство с доклиническим этапом, подтверждая пригодность ооцитов для использования в моделях IVF-ET после размораживания.
- Корпоративное использование: создает универсальную платформу для сохранения фертильности при различных гинекологических показаниях, снижая избыточность процедур.
Операционное и корпоративное воздействие
- Научная ценность: Повышает точность прогнозирования при сохранении фертильности за счет использования незрелых ооцитов, которые в противном случае были бы утилизированы.
- Практическая ценность: Стандартизирует протоколы забора и созревания ооцитов в хирургических и лабораторных условиях.
- Стратегическая ценность: Улучшает принятие решений о целесообразности проведения процедур при планировании лечения бесплодия за счет расширения доступного пула ооцитов перед ВРТ.
- Влияние на портфель: Позволяет проводить приоритезацию вмешательств по сохранению фертильности с учетом рисков в когортах пациентов с онкологическими и доброкачественными заболеваниями.
Особенности реализации
- Требуется опыт в области репродуктивной эндокринологии, аспирации под контролем УЗИ и методах работы в эмбриологической лаборатории.
- Необходим доступ к инкубаторам, подходящим для IVM, средам для манипуляций и средствам стереоскопической оценки.
- Требуется координация действий хирургической бригады, анестезиологов и специалистов лаборатории ЭКО для своевременного переноса ооцитов.
- Требуется адаптация сред для манипуляций и протоколов фильтрации в зависимости от объема и вязкости фолликулярной жидкости.
- Ограничено индивидуальными факторами пациента, такими как доступность яичников, количество фолликулов и временные ограничения хирургического вмешательства.
