Неинвазивный метод генерации модели внутрисуставного поражения внутрисуставного хряща крысы, вызванной циклической нагрузкой

Этот протокол показывает, что можно вызвать повреждение хряща у животных, более крупных животных без какого-либо хирургического вмешательства или структурированного разрушения колена животного. Самым большим преимуществом является то, что они оказываются повторяющимися у операторов даже без опыта, чего трудно достичь любым хирургическим методом. Начните с установки анестезированной крысы на фиксирующее устройство.

Поместите обезболенную крысу, лежащую на животе, на опорную пластину правым коленом, прикрепленным к небольшому кусочку смолы с вогнутой бороздкой. Поместите правую заднюю конечность в положение разгибания бедра, сгибания колена и разгибания лодыжки с коленом, согнутым примерно на 140 градусов. Разместите пятку крысы на клиновидной канавке на подвижном приспособлении.

Переместите фиксирующее устройство к прибору для испытания на напряжение и растяжение и убедитесь, что нет контакта с тензодатчиком. Откройте программное обеспечение для управления прибором для испытания на напряжение и растяжение и нажмите кнопку калибровки. После калибровки аккуратно прикрепите верхнюю часть рамы к тензодатчику.

Медленно включайте поворотную ручку на подвижной главной операционной панели, пока преднатяг не достигнет пяти ньютонов, чтобы коленный сустав был плотно прикреплен к раме. В главном меню нажмите на создать новый метод и системную метку. Установите для тестового режима циклический режим и для типа теста значение сжатия.

Нажмите на метку датчика и выберите вкладку теста, чтобы проверить, что предел находится в пределах 60 ньютонов. Затем выберите вкладку обводки и убедитесь, что предел находится в пределах 500 миллиметров. Под контрольной меткой тестирования выберите происхождение роста, чтобы начать основную программу с 0,3% или полной шкалой.

Установите скорость хода в управлении в первой и третьей секциях на один миллиметр в секунду, затем установите максимальную испытательную силу во второй секции в 20 Ньютонов, а минимальную испытательную силу в четвертой секции в пять Ньютонов. Установите продолжительность целого равным 0,5 секунды для пиковой нагрузки и 10 секунд для минимальной нагрузки. Во вкладке предварительной загрузки внизу страницы убедитесь, что на ней установлена проверка, скорость удаления отклонения установлена на 100 миллиметров в минуту, а максимальная сила составляет пять Ньютонов.

Установите материал как металл на этикетке образца. В главном меню в разделе выбор метода и теста выберите метод, который был только что построен, и нажмите кнопку Пуск, чтобы начать тест. Установите число циклов равным 60.

Верните крысу в клетку после загрузки и поддерживайте 12-12-часовой график световой темноты в клетке с достаточным пространством и пищей ad libitum до тех пор, пока не наступит время для анализа. Изучены кратковременные изменения жизнеспособности хондроцитов в образцах, подвергшихся 20 ньютонам циклической нагрузки. Количество мертвых хондроцитов увеличивалось через 12 часов после травмы.

И наоборот, количество живых хондроцитов продолжало уменьшаться. Суставной хрящ коленей крысы, подвергшийся 20 ньютонам динамической нагрузки, был поврежден и во всех образцах была подтверждена одна очаговая зона поражения в латеральном мыщелке бедренной кости. Размер поражения не увеличивался постепенно в течение восьминедельного периода наблюдения.

Граница, соответствующая границе раздела поражения и непораженного хряща, может наблюдаться в пораженной области. Самое главное – это правильная настройка силы тестирования и количество циклов. С помощью этой техники можно контролировать механическую нагрузку на суставное покрытие крови, прокладывая путь к изучению того, как механическая нагрузка влияет на развитие или профилактику остеоартрита.