Протокол разработки модели остеотомии бедренной кости у крыс-альбиносов Wistar

Эта модель остеотомии бедренной кости может помочь исследователям изучить процесс заживления переломов и оценить, как препарат может повлиять на заживление переломов. Это простая и легкая в использовании модель грызунов, которая может помочь исследователям определить, обладает ли препарат свойствами заживления костей, и понять его механизм действия. Несмотря на то, что он в основном фокусируется на наблюдении и анализе заживления переломов, он также может дать представление о патогенезе заболевания.

Этот метод может направлять будущие исследования по заживлению костей в здоровье и болезнях. Он может быть использован для оценки эффекта потенциальных остеоанаболических препаратов. Индуцирование правильной линии перелома и фиксации перелома с помощью K-проволоки является сложной задачей.

Пара практических занятий должна помочь. Простота и воспроизводимость этого метода проявляются в его визуальной демонстрации Паван Пагаку, младший ординатор из моей лаборатории, поможет продемонстрировать процедуру. Для начала поместите восковой блок, содержащий воск, на глубину до 2,5 сантиметров на операционный стол и накройте его стерильными шторами.

Сделав сантиметровый вертикальный разрез кожи на боковой стороне правого бедра, обнажите мышцу vastus lateralis, разделив глубокую фасцию с помощью ножниц Метценбаума. Расщелите vastus lateralis на одной линии с мышечными волокнами до тех пор, пока не будет достигнут стержень бедренной кости. Затем используйте периостальный лифт, чтобы освободить кость от мышц, прикрепленных к ней.

После введения местной анестезии в надкостницу и вокруг нее, создайте углубление в средней трети стержня бедренной кости, используя хирургический клинок No 15. Поместите зубило на углубление и аккуратно постучите молотком по зубилу, чтобы полностью сломать кость в средней трети вала. Внутренне зафиксируйте перелом с помощью одномиллиметрового стерильного K-провода, удерживаемого с помощью силовой дрели с батарейным питанием.

Пропустите К-проволоку в медуллярный канал дистального фрагмента через место перелома. Затем просверлите К-проволоку через дистальный конец бедренной кости. После уменьшения перелома продвигают К-проволоку от дистального конца в канал проксимального фрагмента до тех пор, пока она не приобретется в трохантерической области.

Отрежьте дистальную часть К-проволоки, выступающую через кожу, с помощью проволочного резака. Согните кончик K-проволоки примерно до 90 градусов с помощью плоскогубцев и используйте марлевую повязку, смоченную в бетадине, для заправки на месте штифта. К-проволока действует как интрамедуллярная шина для удержания перелома в уменьшенном положении.

Надавите на область кровотечения, используя стерильную марлю или щипцы артерий, чтобы остановить любое кровотечение. Обеспечьте полный гемостаз перед закрытием кожи с помощью нейлонового шва 4-0. Очистите рану бетадином и накройте ее стерильной марлей и микропористой клейкой лентой.

Для послеоперационного ухода верните крыс в клетки и продолжайте давать стандартную полусинтетическую диету, а также антибиотики и анальгетики внутрибрюшинно в течение пяти дней после процедуры. Наконец, оцените заживление кости с помощью рентгеновского снимка переломного участка один раз в неделю. Здесь показаны рентгеновские снимки бедренной кости крысы с помощью K-wire NC2 до индуцирования перелома и через день после операции.

Заживление перелома контролируется рентгенологически путем последовательного еженедельного рентгеновского снимка прооперированного участка для оценки образования мозоли. Перелом остается уменьшенным и обездвиженным интрамедуллярным К-проводом. После жертвоприношения в заранее определенный момент времени бедренная кость тщательно сохранялась в формалине с последующим декальцификацией кости.

Кость с мозолью была получена после оптимальной декальцификации. Неповрежденная мозоль и сагиттальный отдел мозоли показаны здесь. Каллус периодически оценивается, чтобы обеспечить оптимальную декальцинацию, прежде чем оценивать ее с использованием других методов.

Здесь показаны изображения с низким и высоким увеличением окрашенного гематоксилином и эозином участка участка перелома. Окрашенные участки места перелома показывают твердую мозоль с образованием хряща и новой кости. Здесь можно увидеть переломный конец кости и вторую кортикальную область.

Надкостница наиболее чувствительна к боли частью раны, и важно инфильтрировать надкостницу в месте перелома местным анестетиком перед остеотомией. За ним может последовать иммуногистохимический и радиологический анализ мозолистых, микро-КТ для количественной гистоморфометрии, анализ биомеханической прочности каллусного анализа сыворотки. Данная методика полезна для определения остеогенного потенциала, механизма действия, а также сравнительного анализа перспективных остеоанаболических препаратов.