Невирусная инженерия первичных Т-клеток человека с помощью гомологически опосредованного целевого соединения больших матриц ДНК

1.4K просмотров

06:10 мин.

9 мая 2025 г.

1.4K просмотров

Matthew J. Johnson¹^,²^,³ , Anthony P. DeFeo¹^,²^,³ , Nicholas J. Slipek¹^,²^,³ , Timothy D. Folsom¹^,²^,³ , Tom Henley⁴ , Modassir S. Choudhry⁴ , Beau R. Webber¹^,²^,³^,⁵ , Branden S. Moriarity¹^,²^,³^,⁵

¹Department of Pediatrics, University of Minnesota, ²Masonic Cancer Center, University of Minnesota, ³Center for Genome Engineering, University of Minnesota, ⁴Intima Bioscience, Inc., ⁵Stem Cell Institute, University of Minnesota

Представлен подробный протокол использования технологии CRISPR/Cas9 для достижения высокоэффективного целенаправленного вбивания больших мультицистронных конструкций в первичных Т-клетках человека с помощью пути репарации ДНК, опосредованного гомологией (HMEJ). Т-клетки, сконструированные с использованием этого протокола, адаптированного к cGMP, поддерживают превосходную клеточную экспансию, цитотоксичность и выработку цитокинов.