עורק המוח האמצעי intraluminal חסימה (MCAO) מודל הוא מודל בשימוש השכיח ביותר בקרב מודלים ניסיוניים שבץ איסכמי. להלן נדגים את המודל כולו בפירוט עם מדריך של flowmetry לייזר דופלר, והתוצאות מי מטעמה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
שבץ הוא הגורם השלישי למוות ואת הסיבה המובילה למוגבלות בעולם, עם עלות משוערת של קרוב 70000000000 $ בארצות הברית בשנת 2009 1,2. עורק intraluminal באמצע מוחין חסימה (MCAO) מודל שפותח על ידי קואיזומי 4 בשנת 1986 כדי לדמות זו הפתולוגיה האנושית השפעה בחולדה. שינוי שיטת MCAO הוצג מאוחר יותר על ידי Longa 3. טכניקות שניהם היו בשימוש נרחב לזיהוי המנגנונים המולקולריים של פגיעה מוחית כתוצאה שבץ איסכמי ו שיטות טיפוליות פוטנציאליים 5. שיטה זו לא פולשנית יחסית בחולדות הוארך להשתמש בעכברים לנצל מהונדס ועל זני בנוקאאוט 6,7. כדי איסכמיה מודל מוקד מוחין, תפר intraluminal מתקדמת דרך עורק התרדמה הפנימי כדי לחסום את הבסיס של MCA. תפר קירוב לאחר תקופת זמן מוגדרת מחקה reperfusion ספונטני, אבל תפר ניתן גם לשמור לצמיתות. סרט הווידאו הזה יהיה הוכחת שתי הגישות העיקריות לביצוע הליך intraluminal MCAO בעכברים באופן הדרגתי, כמו גם לספק תובנות על החסרונות ואת החסרונות פוטנציאליים. רקמת מוח איסכמי יהיה בהמשך להיות מוכתם על ידי כלוריד 2,3,5-triphenyltetrazolium (TTC) כדי להעריך את מידת אוטם מוחי 8.
פרוטוקול
פרוטוקול זה אושר על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש הוועדה (IACUC) באוניברסיטת פלורידה עולה בקנה אחד עם "עיקרון של טיפול בבעלי חיים במעבדה" (NIH פרסום מס '86-23, מתוקנת 1985).
1. חומרים
- בעלי חיים: זכר C57BL / 6 עכברים (הרלן מעבדות, אינדיאנפוליס, אינדיאנה, ארה"ב) במשקל 20-26 גרם בזמן הניתוח.
- הרדמה:
- מכונת הרדמה: הרדמה VetEquip משאיפת....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
המודל הוא מודל MCAO נקבע כי משכפל איסכמיה מוחית במינים Murine. מודל זה שימש לראשונה אצל חולדות ומותאמת לאחר מכן לעכברים. הימנעות craniectomy לחסל את השפעתה של מניפולציה כירורגית על חדירות מחסום דם מוח ו לחץ תוך גולגולתי יתרון של הטכניקה הזו. עם זאת, משתנים רבים, כגון זן הקשורות להבדלים 10, בגודל של תפר קצה 11, משך 6 חסימה, טמפרטורת הגוף 12, 13 הרדמה, וגורמים אחרים יכולים להוביל לחוסר התאמה בכמויות האוטם במודל זה.
יש פרטים טכניים ס.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים מצהירים כי אין להם ניגוד אינטרסים.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות | |
|---|---|---|---|---|
| שם מגיב | סוג | חברה | מספר קטלוגי | הערות (אופציונלי) |
| זכר C57BL / 6 עכברים | בעל חיים | הרלן מעבדות, אינדיאנפוליס, אינדיאנה, ארה"ב | 20-26 GRS | |
| Dissection מיקרוסקופ | מיקרוסקופ | לייקה סטריאו מיקרוסקופ MZ6 | זום 6.3:1 | |
| המאייר סיב אופטי | הפנס | TechniQuip קורפ, ליברמור, קליפורניה, ארה"ב | FO1-150 | |
| Isoflurane | הרדמה | בקסטר רוקחות, Deerfield, IL | 1001936060 | |
| מספריים SuperCut איריס, ישר | כירורגי כלי | העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב | 14218 | |
| Vannas מיקרו מספריים, ישר | כירורגי כלי | העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב | 14003 | |
| דומון מלקחיים קצה קנס | כירורגי כלי | העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב | 503290 | |
| כלי קליפ | כירורגי כלי | העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב | 14120 | |
| תדירות גבוהה ייבוש 900 | כירורגי כלי | העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב | 500397 | |
| 7-0 ניילון כירורגית monofilament תפר | תפר | Ethicon, Inc, סומרוויל, ניו ג'רזי, ארה"ב | 1647G | תפר עבור חסימה |
| 7-0 משי תפר כירורגי | תפר | Ethicon, Inc, סומרוויל, ניו ג'רזי, ארה"ב | 7733G | תפר עבור קשירת |
| סיליקון RTV דבק | סיליקון גומי | העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב | 1571 | |
| Vetbond | דבק רקמות | חברת 3M, סנט פול, מינסוטה, ארה"ב | 70200746587 | |
| Puralube משחה Vet | עין משחה | Pharmaderm, מלוויל, ניו יורק, ארה"ב | ||
| עצירות hydrochlorode | משככי כאבים | Hospira Inc, בלייק פורסט, אילינוי, ארה"ב | NDC 0409-2012-32 | |
| מצרב Thermal Unit | העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב | 501292 | ||
| PeriFlux System 5000 | TCD flowmetry | Perimed, שטוקהולם, Sweeden | ||
| BAT-12 | מדחום רקטלי | העולם Precision מכשירים, Inc, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב | BAT-12R | |
| T / משאבה, TP600 | שמיכה תרמית | Gaymar, ניו יורק, ארה"ב | ||
| 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד | מגיב | סיגמא אולדריץ ושות', בסנט לואיס, מיזורי, ארה"ב | T8877 | |
| עכברים המוח מטריצה מבצעה | המוח מבצעה | מילר Zivic-Lab. בע"מ, אליסון פארק, פנסילבניה, ארה"ב | BSMAS001-1 |
מקורות
- Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders. Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).
- Lloyd-Jones, D.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
