Summary
I patogenesen av bein metastasering, er angiogenese en viktig prosess, og representerer derfor et mål for bildebehandling og terapi. Her presenterer vi en rotte modell av stedsspesifikk brystkreft bein metastasering og beskrive strategier til ikke-invasiv bilde angiogenese
Abstract
Angiogenese er en viktig funksjon for kreft vekst og metastasering formasjon. I bein metastasering, angiogenic faktorer er avgjørende for tumor celleproliferasjon i benmargen hulrom samt for samhandling av tumor og bein celler resulterer i lokal bein ødeleggelse. Vårt mål var å utvikle en modell for eksperimentell bein metastasering som gjør in vivo vurdering av angiogenese i skjelett lesjoner med ikke-invasive imaging teknikker.
For dette formålet, sprøytet vi 10 5 MDA-MB-231 menneskelige brystkreft celler inn i overfladiske epigastric arterien, som utelukker vekst av metastaser i kroppen på andre områder enn de respektive bakbenet en. Etter 25-30 dager etter svulst celle inokulasjon, stedsspesifikke skjelettmetastaser utvikle, begrenset til den distale femur, proksimale tibia og fibula proksimale en. Morfologiske og funksjonelle aspekter av angiogenese kan bli undersøkt på langs i bein metastases bruker magnetisk resonans imaging (MRI), volumetrisk computertomografi (VCT) og ultralyd (US).
MR viser morfologiske informasjon om bløtvevet del av skjelettmetastaser som opprinnelig begrenset til benmargen hulrom og senere overstiger kortikale benet mens framdrift. Ved hjelp av dynamisk kontrast-forsterket MR (DCE-MRI) funksjonelle data inkludert regionale blodvolum, perfusjon og fartøy permeabilitet kan oppnås og kvantifiseres 2-4. Bone ødeleggelse fanges i høy oppløsning ved hjelp av morfologiske VCT bildebehandling. Komplementær til MR-funn, kan osteolytisk lesjoner være plassert ved siden severdighetene intramedullær tumorvekst. Etter kontrastmiddel programmet, avslører VCT angiografi den macrovessel arkitekturen i benmetastaser i høy oppløsning, og DCE-VCT gir innsikt i mikrosirkulasjonen av disse lesjonene 5,6. USA er aktuelt å vurdere morfologiske og funksjonelle egenskaper fra skjelettet lesjoner på grunnlokal osteolyse av kortikale benet. Bruk av B-mode og Doppler teknikker, kan struktur og perfusjon i bløtvevet metastaser bli vurdert, henholdsvis. DCE-US tillater sanntids avbildning av vascularization i skjelettmetastaser etter injeksjon av mikrobobler 7.
I konklusjonen i en modell av stedsspesifikk brystkreft skjelettmetastaser multimodal imaging teknikker, inkludert MR, VCT og amerikanske tilbudet utfyllende informasjon om morfologi og funksjonelle parametre for angiogenese i disse skjelettet lesjoner.
Protocol
1. Cell Culture
- Kultur MDA-MB-231 menneskelige brystkreft celler (American Type Culture Collection) i RPMI-1640 (Invitrogen, Tyskland) supplert med 10% FCS (Sigma, Tyskland). Hold alle kulturer under standardbetingelser (37 ° C, fuktet atmosfære, 5% CO 2) og Passage cellene 2-3 ganger i uken for å holde dem i logaritmisk vekst. For dyremodell som er beskrevet nedenfor, er det ikke behov for bruk av bein-spesifikke sublines av MDA-MB-231 celler som svulsten take rate er over 90% 1.
- Harvests sub-konfluent tumorceller etter å ha brukt 2 mM EDTA i PBS-(fosfat-bufret saltvann uten Ca 2 + og Mg 2 +) og 0,25% trypsin (Sigma, Taufkirchen, Tyskland). Count MDA-MB-231 celler i en Neubauer kammer og utsette dem i RPMI-1640 (5x10 5 celler i 1 ml).
2. Nude Rat Model of Bone Metastase
- Alle forsøkene ble godkjent av ansvarlig statlige Animal etikk komité.
- Bruk naken rotter i en alder av 6-8 uker og holde dem på patogen-frie forhold i en passende liten dyr (f.eks mini-barriere system). Holde dyr under kontrollerte forhold (21 + / - 2 ° C romtemperatur, 60% fuktighet, og 12 t lys-mørk rytme) og tilby autoklaveres fôr og vann ad libitum til rottene.
- Før dyr kirurgi, injisere en smertestillende legemiddel (f.eks carprofen 4 mg / kg sc; på grunn av sin enkel administrasjon og kort halveringstid (ca. 8 timer), bør carprofen ikke påvirke tumorvekst). Anesthetize rotter med en blanding av oksygen (0,5 l / min) og isofluran (1 til 1,5 vol.%) Og sørg for at rotta er bedøves skikkelig og puster regelmessig før du starter følgende prosedyre.
- Plasser bedøvet dyret under en passende kikkert driftsresultat mikroskop (f.eks Leica) og arbeide med en forstørrelse på 16 ganger.
- Begynn den kirurgiske prosedyren ved å kutte hud og underhud i inguinal regionen i en lengde på 2-3 cm med saks (BC060r Iris saks 108 mm). Alle arteriene forgrening av lårarterie (FA) må dissekert inkludert overflatiske epigastriet arterien (SEA), synkende genicular arterie (DGA), popliteal arterie (PA) og saphenous arterie (SA).
- Sett klipp på lårarterie proksimale av havets opprinnelse så vel som på DGA, til PA og SA timelig occlude lokal blodstrøm. Ligate SEA på sitt distal del å tillate åpning av dette skipet uten blødning (figur 1A).
- Kutt SEA bruke saks (Vännäs Micro-SCR-Sporet STR 85 mm) proksimalt av ligation (figur 1B) og administrere en 1% papaverin løsning på SEA, for å lette den påfølgende innsetting av en nål på grunn av avslapning av fartøyet ( Figur 1C).
- Skjær omtrent halvparten av havets diameter med saks og sette inn en nål (0,3 mm diameter og 42 mm lengde) inn i lumen av SEA mens holding cut-enden av fartøyet med en tang (figur 1D, E). Når tilgjengelig, fikse nålen i en ekstern enhet for å redusere uregelmessige bevegelser som kan resultere i perforering av karveggen. Koble en sprøyte til nålen. Fjern klippet fra distale FA og plasser den på saphenous arterien (figur 1F).
- Injiser MDA-MB-231 celler suspendert i 0,2 ml media sakte i sjøen. I kraft av klippene MDA-MB-231 celler er rettet til DGA og PA. Fjern nålen og ligate havet for å hindre blødning før du tar av Arteria klippene. Lukke såret med kirurgiske klemmer og avslutte innånding anestesi.
- For post-prosedyre overvåking, er rotter normalt avlives 7-8 uker etter svulst celle inokulasjon for å unngå alvorlige skjelett komplikasjoner. I løpet av denne tiden, bør dyrene overvåkes daglig for å vurdere tumor størrelse og eventuelle bevis av smerte (f.eks atferdsmessige avvik, vekttap, motor defekter). Dersom dyr viser en svulststørrelse overstiger etisk tillatt grense eller bevis av smerte under tumorvekst, må de avlives.
- Immuno-mangelfull (naken) rotter ble brukt for xenogenous transplantasjon av humane MDA-MB-231 brystkreft celler. Nude rotter ble ikke valgt for å bedre visualisere den voksende svulst.
3. Magnetic Resonance Imaging (MRI)
- Etter svulst celle inokulasjon, la ca 25-30 dager tumorvekst før du starter med bildebehandling. For MR bruke en dedikert eksperimentell skanner eller en menneskelig MR-systemet med en passende dyr spiral. Vi brukte et menneske MR system (Symphony, Siemens, Tyskland) og en hjemme-bygget spole for radiofrekvens eksitasjon og deteksjon, utformet som en sylindrisk volum resonator med en indre diameter på 83 mm og en brukbar lengde på 120 mm (Figur 2A).
- Anesthetize rotta med oksygen og isofluran som gitt ovenfor. Plasser et kateter i halen venen og fest den på halen med et trykk e. Koble til en sprøyte som inneholder kontrastmiddelet (f.eks 0,1 mmol / kg Gd-DTPA i ca 0,5 ml; Magnevist, Bayer-Schering, Tyskland).
- Plasser rotte i MR-systemet opprettholde innånding anestesi. Begynn med en morfologisk MR sekvens for å finne beinet metastase (f.eks T2 vektet: turbo spin ekko sekvens, TR 3240 ms, TE 81 ms, matrise 152 x 256, 90 FOV x 53,4 2 mm, skive tykkelse 1,5 mm, 3 gjennomsnitt, skann Klokka 03:40 min).
- Bestem en bit av beinet metastasering med størst diameter og starte sekvensen for DCE-MRI (f.eks metning recovery turbo flash sekvens, 373 TR ms, TE 1,86 ms, 192 matrise 144 x, 130 FOV x 97,5 2 mm, skive tykkelse 5 mm, målinger 512, en gjennomsnitt, skanning 06:55 min). Etter ca 30 sek, begynner å injisere kontrastmiddelet over en periode på 10 sek. Den totale tiden for ovennevnte prosedyrer for å utføre en MR-undersøkelse er ca 15-20 min per dyr.
- Velg en passende CT system, enten et menneske eller en eksperimentell skanner. Her brukte vi en prototype av en flatskjerm utstyrt volumetrisk computertomografi tomograph (Figur 2B, Volume CT, Siemens, Tyskland).
- Anesthetize rotta med oksygen og isofluran som gitt ovenfor. Plasser et kateter i halen venen og fest den på halen med en tape. Koble til en sprøyte som inneholder kontrastmiddelet (f.eks 1 g jod per kg i ca 0,5 ml, 400 Imeron, Bracco, Tyskland).
- Plasser rotte på skanneren etter innånding anestesi. Bruk følgende skanneparametrene for VCT: tube spenning 80 kV, tube strøm 50 mA, skanning tid 51 sek, rotasjonshastighet 10 sek, bilder per sekund 120, 512 matrise x 512 og skive tykkelse 0,2 mm. Injiser kontrastmiddelet under andre rotasjon av flatskjerm-systemet. Den totale tiden for ovennevnte prosedyrer for å utføre en VCT undersøkelse er ca 5-10 min per animal.
- Rekonstruere bilder med en modifisert FDK (Feldkamp-Davis-Kress) membran-beam rekonstruksjon algoritmen (kernel H80a, Afra, Tyskland).
5. Ultralyd (US)
- Eksperimentelle og kliniske amerikanske systemer er tilgjengelig for dette formålet. Vi brukte den kliniske systemet Acuson Sequoia 512 ultralyd-system med en 15L8 lineær transduser (Figur 2C; Siemens-Acuson, Mountain View, CA).
- Anesthetize rotta med oksygen og isofluran som gitt ovenfor. Plasser et kateter i halen venen og fest den på halen med en tape. Koble en sprøyte som inneholder en mikrobobleutskillere kontrastmiddel (f.eks 1,6 ml / kg i ca 0,5 ml; SonoVue, Bracco, Italia). Fest USA svingeren på de respektive bakbenet bruker stativ og bruke amerikanske gel mellom svingeren og bakben.
- Utfør B-mode avbildning (overføring frekvens: 17 MHz, mekanisk indeks: 0,51) for å bestemme den største diameteren av bein metastasering og fikse svingeren i tsin stilling. Legg Doppler signal på B-mode bilder for informasjon på vev perfusjon. Vær oppmerksom på at bare lesjoner som forstyrrer kortikalt ben er tilgjengelig for amerikanske bølger.
- For dynamisk kontrast forbedret USA (DCE-US) satt USA enheten i tråkkfrekvens kontrast puls sekvensering (CPS) modus (overføring frekvens: 7 MHz, mekanisk indeks: 0,18), injiserer mikrobobler og spille inn en cine sløyfe på 90 sek lengde. Den totale tiden for ovennevnte prosedyrer for å utføre en amerikansk undersøkelse er ca 10-15 min per dyr.
6. Postprosessering av bildedata
- Bruk den morfologiske opplysninger fra MR, VCT og USA for å karakterisere den myke vev svulsten (MRI, USA) og skjelett ødeleggelse (VCT) av skjelettmetastaser og bestemme plassering, lesjon størrelse og volum av lesjoner med en DICOM Viewer (f.eks Osirix DICOM Viewer).
- For å oppnå forgrening mønster av skip i skjelettmetastaser (angiografi), kan VCT data bli brukt. Rekonstruere 2D eller 3D bilder ved hjelp av informasjonen den arterielle fase med eller uten subtraksjon teknikker (f.eks Osirix DICOM Viewer).
- For å tallfeste parameterne for vascularization fra DCE-MRI, DCE-VCT og DCE-US, bruke dataverktøy spesifikke for modaliteter. For DCE-MRI, bestemme vaskulær parametrene amplitude A (assosiert med blod volum) og valutakurs konstant k ep (assosiert med perfusjon og fartøy permeabilitet) i benmetastaser med Dyna Lab (Mevis Research, Bremen, Tyskland) basert på to- kupé modell av Brix 8,9. Alternative farmakokinetiske modeller for evaluering er tilgjengelige, for eksempel ved tuftene modell 10.
- For å kvantifisere DCE-VCT data, utføre en deskriptiv analyse av data for å beregne parametere som areal under kurven (AUC) eller peak enhancement (PE) med Dyna Lab (Mevis Research, Bremen, Tyskland).
- Kvantifisere informasjon fra sanntids DCE-US bruker kvantitativ analyse programvare (f.eks Qontrast, Bracco, Italia) ved å analysere cine-buer i henhold til gjennomført bolusinjeksjon modell. Plasser regionen av interesse (ROI) over ben metastaser, bestemme enten beskrivende faktorer som areal under kurven eller kvantitative parametre fra fargekodede kart, f.eks regional blodvolum, regional blodgjennomstrømning og fyller tiden.
7. Representative Resultater
Etter intraarterial injeksjon av MDA-MB-231 celler i sjøen (figur 1), stedsspesifikke skjelettmetastaser utvikle seg i de respektive bakben av naken rotte. Osteolytisk lesjoner begrenset til femur, kan tibia og fibula bli fotografert non-invasiv ved MR, VCT og USA (figur 2) begynner ca 25-30 dager etter injeksjon og fulgt opp i flere uker. Når man kombinerer MR, VCT og USA inkludert innebygd og kontrast forbedret teknikker, kan utfyllende informasjon vurderes i skjelettmetastaser som består av et mykt vevtumor (tumorceller og stroma) og den respektive osteolytisk lesjon (ben ødeleggelse). For sammenligning av de respektive data mellom teknikkene, kan alle tre bildediagnostikk brukes sekvensielt i samme rotte. MR viser morfologi av bein metastatisk mykt vev som er i utgangspunktet begrenset til benmargen hulrom og senere overstiger kortikalt bein i løpet av utviklingen. Funksjonelle parametre som regional blodvolum, perfusjon og fartøy permeabilitet kan fås fra DCE-MRI og kvantifisert (figur 3). Bone struktur, og særlig osteolytisk endringer i metastaser er vurdert i høy oppløsning av VCT. Komplementær til MR-funn, er osteolytisk lesjoner lokalisert i umiddelbar nærhet intramedullær tumorvekst. VCT angiografi avslører den endrede macrovessel arkitektur skjelettmetastaser, og DCE-VCT viser respektive sider av mikrosirkulasjonen (figur 4). På grunn av lokal ødeleggelse av kortikale benet i metastatic lesjoner, er USAs aktuelt å vurdere morfologiske og funksjonelle trekk ved den myke vev svulsten ved bruk av B-mode og Doppler teknikker. Ved anvendelse av mikrobobler, gjør DCE-US for sanntids avbildning av vascularization i skjelettmetastaser (figur 5).
Figur 1. Hind leg av en naken rotte forberedt for svulst celle inokulasjon som avbildes gjennom en operasjon mikroskop. A, forgrening mønster av lårarterie (FA) inkludert overflatiske epigastriet arterien (SEA), synkende genicular arterie (DGA), popliteal arterie (PA) og saphenous arterie (SA). Arterielle klipp plassert på SA, PA og proksimal FA samt ligation av SEA, B, ble SEA kuttet proksimale av ligation, C, muskel avslapning av sjøen etter tilsetting av papaverin, D, innsnitt i SEA (tatt opp av en tang), E, innsetting av nålen inn SEA, F, fiksert nål i havet (ekstern fi xating enhet) og injeksjon av MDA-MB-231 kreftceller via sjøen til DGA og PA kraft av klippene.
Figur 2 A, menneskelig MR system (Symphony, Siemens, Tyskland) og en hjemme-bygget spole for radiofrekvens eksitasjon og påvisning plassert i skanneren;. B, flat panel utstyrt volumetrisk computertomografi tomograph (Volume CT, Siemens, Tyskland), C, klinisk ultralyd system Acuson Sequioa 512 (Siemens-Acuson, Mountain View, CA).
Figur 3. Aksiale MR seksjoner. Venstre panel, T2w MRI, midtre panelet, amplitude A (DCE-MRI), høyre panel, valutakurs konstant k EP (DCE-MRI). Piler peker på skjelettmetastaser. Fargen kartet for DCE-MR dataområder fra rød (høye verdier) til blå (lave verdier).
78/4178fig4.jpg "/>
Figur 4. 3D VCT rekonstruksjoner av osteolytisk bein metastase (venstre panel) og en angiografi (midten panel), samt en DCE-VCT seksjon i aksial orientering fra parameter topp ekstrautstyr (høyre panel). Fargen kartet for DCE-VCT dataområder fra rød (høye verdier) til blå (lave verdier).
Figur 5. Amerikanske bilder fra B-mode (morfologi, venstre panel), Doppler (perfusjon, midtre panelet) og CEUS (høyre panel, peak forbedring etter injeksjon av mikrobobler fra sanntids avbildning av vascularization) av et bein metastasering.
Supplemental filmen en. Klikk her for å vise supplerende film .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Metoden for å indusere eksperimentelt skjelettmetastaser presenteres her i kombinasjon med radiologisk rutiner gjør for å følge opp osteolytisk lesjoner i nakne rotter lengderetningen. I vår modell, er MDA-MB-231 menneskelige brystkreft celler injisert i sjøen som er en anastomose mellom bekkenarterien via pudendoepigastric bagasjerommet og lårarterie. Følgelig er det blod flyte inn den medfølgende regionen i kneleddet opprettholdes etter ligation of the Sea. Fordelene med denne modellen i forhold til etablerte modeller av bein metastasering er stedsspesifikk utseende skjelettmetastaser sammenlignet med intrakardiell injeksjon modell 11 og inkludering av de patogene prosesser av tumor celle bloduttredelse og migrasjon til målet vev i forhold til tibia injeksjon modell 12. Videre i denne modellen en systemisk tumormasser, særlig visceral formidling, er utelatt som gir mulighet for longitudinelle studier over several uker, og dermed gjør det mulig reduksjon av nødvendige dyr 1,13.
Rollen angiogenese som viktig prosess for å fremme tumor celleproliferasjon og indusere benresorpsjon i patogenesen av bein metastasering ble tidligere demonstrert i ex vivo studier 14,15. Her presenterer vi in vivo imaging teknikker for ikke-invasiv vurdere angiogenese i disse lesjonene søker MRI, VCT og USA. Ved hjelp av en naken rotte modell, utfyllende informasjon om vascularization herunder funksjonell informasjon om blodvolum og fartøy permeabilitet / perfusjon (DCE-MRI, DCE-VCT), fartøy morfologi i høy oppløsning (VCT angiografi), perfusjon (US Doppler) og real-time avbildning av vascularization (DCE-US) kan innhentes 1-7,16.
Imaging av angiogenic parametere ved hjelp MR, VCT og USA gjør at klarlegging av patogene rolle angiogenese i skjelett metastaser non-invasiv og in vivo 3,4,6. Et annet program for ovennevnte avbildningsteknikker er etterforskningen av terapeutiske effekter i longitudinelle studier upon anti-angiogenic eller standard behandling for skjelettmetastaser. For demonstrasjon av farmakologisk respons, longitudinelle studier som dekker opp til 70 dager etter at tumor celle inokulering med konsernets størrelser mellom 8 og 17 rotter ble utført for å demonstrere anti-tumor, anti-angiogenic og anti-resorptive effekter 2-7,17. På grunn av anvendelsen av imaging metoder på skannere for menneskelig bruk i en klinisk relevant dyremodell, de presenterte prosedyrene er av høy overføringsverdi for vurdering av behandling hos pasienter med skjelettmetastaser 16.
I konklusjonen, kan bruke dette stedsspesifikk dyremodell av brystkreft skjelettmetastaser, morfologiske og funksjonelle aspekter ved angiogenese bli fotografert non-invasiv og in vivo
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Ingen interessekonflikter erklært.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB-TR 23 og SFB-TR 79, TB og DK). Forfatterne ønsker å takke Renate Bangert, Karin Leotta og Lisa Seyler for utmerket teknisk assistanse.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| MDA-MB-231 human breast cancer cells | American Type Culture Collection | HTB-26 | |
| RPMI-1640 | Invitrogen | 61870 | |
| FCS | Invitrogen | 10270 | |
| Trypsin-EDTA | Invitrogen | 25300 | |
| Carprofen Rimadyl | Pfizer Pharma GmbH | PZN 110208 | |
| Magnevist | Bayer-Schering | PZN 6961516 | |
| Imeron 400 MCT | Bracco | PZN 228654 | |
| SonoVue | Bracco | PZN 1567358 | |
| Papaverin | Alfa Aesar | L 04152 | |
| Isofluran | Baxter Internationl Inc. | HDG 9623 | |
| Symphony (Magnetic resonance imaging) | Siemens AG | ||
| Volume CT (Volumetric computed tomography) | Siemens AG | ||
| Acuson Sequioa 512 (Ultrasound) | Siemens-Acuson |
References
- Bäuerle, T. Characterization of a rat model with site-specific bone metastasis induced by MDA-MB-231 breast cancer cells and its application to the effects of an antibody against bone sialoprotein. Int. J. Cancer. 115, 177-186 (2005).
- Merz, M., Komljenovic, D., Zwick, S., Semmler, W., Bäuerle, T. Sorafenib tosylate and paclitaxel induce anti-angiogenic, anti-tumor and anti-resorptive effects in experimental breast cancer bone metastases. Eur. J. Cancer. 47, 277-286 (2010).
- Bäuerle, T. Cilengitide inhibits progression of experimental breast cancer bone metastases as imaged noninvasively using VCT, MRI and DCE-MRI in a longitudinal in vivo study. Int. J. Cancer. 128, 2453-2462 (2011).
- Bäuerle, T., Merz, M., Komljenovic, D., Zwick, S., Semmler, W. Drug-induced vessel remodeling in bone metastases as assessed by dynamic contrast enhanced magnetic resonance imaging and vessel size imaging: a longitudinal in vivo study. Clin. Cancer Res. 16, 3215-3225 (2010).
- Bäuerle, T. Imaging anti-angiogenic treatment response with DCE-VCT, DCE-MRI and DWI in an animal model of breast cancer bone metastasis. Eur. J. Radiol. 73, 280-287 (2010).
- Bäuerle, T. Bevacizumab inhibits breast cancer-induced osteolysis, surrounding soft tissue metastasis, and angiogenesis in rats as visualized by VCT and MRI. Neoplasia. 10, 511-520 (2008).
- Merz, M., Komljenovic, D., Semmler, W., Bäuerle, T. Quantitative contrast-enhanced ultrasound for imaging anti-angiogenic treatment response in experimental osteolytic breast cancer bone metastases. , Forthcoming (2012).
- Brix, G. Pharmacokinetic parameters in CNS Gd-DTPA enhanced MR imaging. J. Comput. Assist. Tomogr. 15, 621-628 (1991).
- Brix, G. Microcirculation and microvasculature in breast tumors: pharmacokinetic analysis of dynamic MR image series. Magn. Reson. Med. 52, 420-429 (2004).
- Tofts, P. S. Estimating kinetic parameters from dynamic contrast-enhanced T(1)-weighted MRI of a diffusable tracer: standardized quantities and symbols. J. Magn. Reson. Imaging. 10, 223-232 (1999).
- Arguello, F., Baggs, R. B., Frantz, C. N. A murine model of experimental metastasis to bone and bone marrow. Cancer Res. 48, 6876-6881 (1988).
- Kjonniksen, I., Winderen, M., Bruland, O., Fodstad, O. Validity and usefulness of human tumor models established by intratibial cell inoculation in nude rats. Cancer Res. 54, 1715-1719 (1994).
- Bäuerle, T. Treatment of bone metastasis induced by MDA-MB-231 breast cancer cells with an antibody against bone sialoprotein. Int. J. Oncol. 28, 573-583 (2006).
- Andersen, T. L. A physical mechanism for coupling bone resorption and formation in adult human bone. Am. J. Pathol. 174, 239-247 (2009).
- Nyangoga, H., Mercier, P., Libouban, H., Basle, M. F., Chappard, D. Three-dimensional characterization of the vascular bed in bone metastasis of the rat by microcomputed tomography (MicroCT). PLoS One. 6, e17336 (2011).
- Bäuerle, T., Semmler, W. Imaging response to systemic therapy for bone metastases. European Radiol. 19, 2495-2507 (2009).
- Bretschi, M. Cilengitide inhibits metastastic bone colonization in a nude rat model. Oncol. Rep. 26, 843-851 (2001).
