In den vergangenen Jahren wurden neue Generation Endoskope wichtige diagnostische Forschung Hilfsmittel zum Auswerten murinen Colitis und kolorektalen Tumoren entwickelt. Wir stellen hier ein detailliertes Protokoll für endoskopische Beurteilung von Entzündungen und kolorektalen Tumoren in Mäusen, sowie eine neuartige Bewertungssystem, das Dezimal-Identifikatoren verwendet, um die Schwere der endoskopischen ulcerosa und kolorektalen Tumoren dokumentiert.
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Methodenartikel
Flexible Koloskopie in der Maus, um die Schwere der Colitis und kolorektalen Tumoren auswerten mit einem validierten Endoskopische Scoring System
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Der Einsatz der modernen Endoskopie für Forschungszwecke hat unser Verständnis von Magen-Darm-Erkrankungen erleichtert. Insbesondere hat experimentelle Endoskopie sehr nützlich für Studien, die wiederholt Einschätzungen in einem einzigen Versuchstier, wie die Bewertung der Mechanismen von chronisch-entzündlichen Darmerkrankungen und das Fortschreiten von Darmkrebs erforderlich gewesen. Jedoch sind die verschiedenen Studien verwendeten Verfahren sehr variabel. Mindestens drei endoskopischen Scoring-Systeme sind für murine ulcerosa veröffentlicht und veröffentlichte Protokolle zur Beurteilung von kolorektalen Tumoren nicht die Anwesenheit von Begleit Kolonentzündung adressieren. Diese Studie entwickelt und validiert eine reproduzierbare endoskopische Scoring-System, die Auswertung der beiden Entzündungen und Tumoren gleichzeitig integriert. Diese neue Scoring-System besteht aus drei Hauptkomponenten: 1) Bewertung des Ausmaßes und der Schwere der Entzündung kolorektalen (basierend auf perianalen Ergebnisse, die Transparenz der wall, Schleimhautblutungen und fokale Läsionen), 2) quantitative Erfassung der Tumorläsionen (Netzkarte und Balkendiagramm) und 3) numerischen Sortierung der klinischen Fälle durch ihre pathologischen und Forschungs Relevanz basierend auf Dezimaleinheiten mit zugeordneten Kategorien von Läsionen beobachtet und endoskopischen Komplikationen (dezimal Kennungen). Die Video-und Manuskript hier vorgestellt wurden vorbereitet, nach IACUC genehmigten Protokolle, damit die Ermittler ihre eigenen Versuchsmäusen punkten mit einem gut validierten und hoch reproduzierbare endoskopische Methode, mit der Möglichkeit, System, distal von proximalen endoskopische ulcerosa (D-PECS unterscheiden ).
Einleitung
Murine Endoskopie hat als nützliches Forschungswerkzeug für über ein Jahrzehnt 1-3 durchgeführt. Bis heute haben die meisten Studien unter Verwendung muriner Endoskopie starre Endoskope verwendet, obwohl einige auch Sigmoidoskopie. Murine Endoskopie liefert sofortige Ergebnisse und eine objektive Schätzung der Höhe der Darm Normalität, der Schwere der Entzündung und Tumorprogression im Vergleich zu indirekten Maßnahmen wie Gewichtsverlust, Durchfall und Histologie (was suboptimal ist, wenn Läsionen sind lückenhaft), während bietet Einblicke auf die allgemeine Gesundheit des Dickdarms. Vor allem ermöglicht die Endoskopie für die wiederholte Beurteilung der ....
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Protokoll
1. Einrichten des Endoskopie-System
- Stellen Sie das System vor der Endoskopie Anästhesie die Mäuse nach der Anleitung des Herstellers. Verwenden Sie ein Video Ureteroskop für den Menschen für dieses Protokoll entwickelt (Abbildung 1). Der Außendurchmesser des Einführungsrohres beträgt 9,9 Fr (3,3 mm), dessen distales Ende 8.5 Fr (2,8 mm), und der Innendurchmesser des Instrumentenkanals 6 Fr (1,2 mm).
- [9] Obwohl die Verwendung von Endoskopen nicht auf die Übertragung von Krankheiten in Verbindung gebracht worden, Sterilisieren des Endoskops und der Linse mit 70% Ethanol 10 oder mit geeigneten Techniken bei der Arbeit mi....
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Ergebnisse
Die in dieser Studie präsentierten Protokoll und Bilder wurden mit einem Olympus-URF-V flexiblen Endoskops 14 und NBI 11,15 hergestellt. Video Bilder wurden in MPEG-2-Format und Bilder im JPG, TIF, PNG oder DICOM-Format mit maximal 1.280 x 1.024 Pixel, Standard-USB-Flash-Speicher tragbaren übertragbar gespeichert. NBI verbessert den visuellen Kontrast von Hämoglobin-haltige Gewebe. Normales Licht und NBI-Bildgebung sind die Hauptmerkmale, die normale Anatomie des kolorektalen Schleimhaut und die Un.......
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Diskussion
Es gibt mehrere Überlegungen zur Modifikation und Fehlerbehebung der endoskopische Technik in Mäusen. Kritische Aspekte des Verfahrens, die während der Nutzung der flexiblen Endoskopie gemeistert werden müssen, gehören die Einstellung der Luftmenge benötigt, um Blähungen und Atemwegs Kompromiss der Maus zu verhindern, und kleinere technische Aspekte der Ansichtssteuerung bei der Koordinierung der Winkelung und Drehmomentsteuerungen . Drehmomentregelung ist wichtig, um das Risiko einer Darmdurchbruch zu minimieren. Wenn .......
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Offenlegungen
Keine finanziellen oder Konflikt offen Interessen.
Danksagungen
Besonderer Dank geht an Sarah Kossak, Mitchell Guanzon, Sung Yeun Yang und Li Guo Jia, für ihre Zusammenarbeit während der endoskopischen Beurteilung ihrer Versuchstiere.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Isofluran, USP | Webster Veterinärchirurgisches | ||
| Gleitmittel | Savage Laboratories | Surgilube, 0281-0205-45 | |
| Phosphatgepufferte Kochsalzlösung | Thermo Scientific | SH30256 | |
| RNAlater | Ambion | AM7021 | |
| Methylenblau 1% wässrige Lösung | Fisher Science Education | S96393 | |
| Flexibles digitales Ureteroskop | Olympus America | URF-V | |
| Videosystem-Center | Olympus | America VISERA Pro OTV-S7 Pro | |
| Xenon-Lichtquelle | Olympus | America VISERA Pro CLV-S40 Pro | |
| Videorecorder | MediCapture, Inc. | MediCap USB200 | |
| Flexible Biopsiezange | Olympus America | FBC-3115 | |
| Anästhesiegerät | Euthanex Corporation | EZ-7000 Classic System |
Referenzen
- Huang, E. H., et al. Colonoscopy in mice. Surg. Endosc. 16, 22-24 (2002).
- Wirtz, S., Becker, C., Blumberg, R., Galle, P. R., Neurath, M. F. Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing....
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Nachdrucke und Genehmigungen
