Bir Geçerliliği Endoskopik Puanlama Sisteminin Kullanılması Kolit ve Kolorektal Tümörlerin Şiddetini Değerlendirmek için Farelerde esnek Kolonoskopi

Summary

Son birkaç yılda, yeni nesil endoskoplar kemirgen kolit ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesinde önemli bir tanı araştırma yardımcıları olarak ortaya çıkmıştır. Bu farelerde enflamasyonun ve kolorektal tümörleri endoskopik değerlendirme, hem de kolit ve kolorektal tümörleri endoskopik şiddetini belge ondalık tanımlayıcıları kullanan yeni bir skorlama sistemi için bu tarifnamede detaylı bir protokol mevcut.

Abstract

Araştırma amaçlı, modern endoskopi kullanımı büyük ölçüde gastrointestinal patolojilerin anlayışımızı kolaylaştırmıştır. Özel olarak, deneysel endoskopi, kronik enflamatuar bağırsak hastalığının mekanizmaları ve kolorektal kanserin ilerlemesini değerlendirmek gibi tek bir laboratuar hayvanına tekrar değerlendirme gerektiren çalışmaları için oldukça faydalı olmuştur. Ancak, çalışmalar arasında kullanılan yöntemler oldukça değişkendir. En az üç endoskopik skorlama sistemleri kemirgen kolit yayınlanan ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesi için protokoller eşzamanlı kolon iltihabı varlığını ele başarısız yayınlanmıştır. Bu çalışma, geliştirir ve aynı zamanda inflamasyon ve tümörlerin hem de değerlendirme bütünleştirir tekrarlanabilir bir endoskopik skorlama sistemi doğrular. Perianal bulgularına dayanarak kolorektal inflamasyon ölçüde ve şiddeti 1) değerlendirme (wal şeffaflık: Bu yeni puanlama sistemi üç ana bileşeni vardırl, mukozal kanama, ve fokal lezyonlar), 2) tümör lezyonları (grid harita ve bar grafiği), ve gözlenen lezyonların atanmış kategorilerin ondalık birimlere dayanarak patolojik ve araştırma alaka klinik vakaların 3) sayısal sıralama kantitatif kayıt ve Endoskopik komplikasyonlar (ondalık tanımlayıcılar). Burada sunulan görüntü ve el yazması araştırmacılar yakın endoskopik kolit (D-PECS gelen distalinde ayırt etmek için sistem seçeneği ile, iyi doğrulanmış ve yüksek tekrarlanabilir endoskopik yöntem kullanılarak kendi deneysel fareler puan için izin, IACUC onaylı protokolleri takip hazırlandı .)

Introduction

Mürin endoskopi bir yılda ^1-3 için yararlı bir araştırma aracı olarak yapılmıştır. Bazıları da fleksibl sigmoidoskopi kullanılan olmasına rağmen bugüne kadar, kemirgen endoskopi kullanılarak çalışmaların çoğu, rijit endoskoplar kullandık. Mürin endoskopi hemen sonuç sağlar ve bağırsak normallik, inflamasyon şiddeti ve vücut kilo kaybı, ishal, ve histoloji gibi dolaylı önlemler, (lezyonlar yamalı zaman suboptimaldir) kıyasla progresyonla ölçüde daha objektif tahmin ederken kolon genel sağlık anlayışlar sunan. Ötenazi ve iki nokta üst üste analiz ¹ için hasat edilecek olan hayvan gerektiren geleneksel histolojik inceleme aksine En önemlisi, endoskopi, zaman içinde laboratuvar hayvan modellerinin tekrar değerlendirilmesi için izin verir. Bu avantajlara rağmen, murin endoskopik teknolojisinin kullanımı yaygın olmamıştır ve implementati için standart protokoller eksikliği ile sınırlıdırve patolojik bulgular puanlama. Düzgün uygulanan, kemirgen endoskopi daha anlayışımızı ve inflamatuvar barsak hastalıkları, kolit, ve kolorektal tümörler dahil olmak üzere birçok kronik gastrointestinal hastalık durumlarında, hayvan modellerinin karakterizasyonu kolaylaştırmak için büyük umut vaat ediyor.

Kemirgen endoskopik teknoloji programı standart bir muayene prosedürlerinin varlığını ve bağırsak patolojileri için tutarlı olmayan gereksiz ve güvenilir puanlama sistemi gerektirir üretilebilmesi ve nesnellik, üzerine menteşeleri. En az üç açıklayıcı puanlama kolit ^4-6 endoskopik değerlendirme sistemleri, hem de kolon tümörleri farelerde ^4,7,8 için yayınlanmıştır. Ancak, bu rapor yaklaşımlar ve puanlama sistemleri çalışmalar arasında kolayca karşılaştırılabilir değildir. Birçok durumda, lezyonların sınıflandırılması için kullanılan kriterlerin net bir tanımı yoktur, ve kriterler verildiğinde, onlar büyük ölçüde değişmektedir. Ayrıca,kolit ve tümörler, tek bir ölçme aracı haline anda ortaya çıkar ve sonuç üzerinde interaktif etkileri olabilir en yaygın kolon patolojilerin iki, hem de değerlendirmesini entegre bildirilen hiçbir skorlama sistemleri vardır. Son olarak, kolit için var olmayan endoskopik skorlama sistemleri genellikle sınırlı ayrımcılık ile inflamatuvar kategoriler var (yani. Genellikle 1-4 kısa tamsayı ölçekleri üzerinde dar puanlama seçenekleri) düzgün hastalığın ilerlemesi senaryolar temsil ve parametrik istatistiksel analiz kullanımını etkinleştirmek için.

Bu yazıda, murin kolit ve kolonik tümörlerin şiddetini değerlendirmek ve perianal bölge, rektum ve distal kolon anatomik değerlendirilmesinde bu teknolojiyi kullanarak için standart bir protokolü tarif etmek için esnek bir endoskop kullanılmasını tarif eder. Biz Travma ve görüntü bozulmalarını en aza indirmek için endoskopi sırasında etkili giderme göstermek, ve biz bir tekrarlanabilir skorlama sistemi tanımlamakvalide yayınlanan klinik parametrelere dayalı. Skorlama sistemi (özel tanı değeri ile bulgularını vurgulamak için 12 iltihap, tümör haritalama olası notları ve komplo seçenekleri ve yeni bir ondalık birim sistemi (yani, ondalık tanımlayıcılar) ile ayrımcılık yüksek düzeyde kullanarak bağırsak iltihabı ve tümörlerin hem de değerlendirme bütünleştirir yani tümör geliştirme, endoskopi, vb sırasında komplikasyonlar). Ondalık tanımlayıcıların kullanılması daha fazla alt analizi hakkında veri setlerinin hızlı izleme sağlar. Son olarak, kolit ve kolit ile ilişkili kanser (dekstran sülfat sodyum (DSS) kaynaklı-kolit, Clostridium difficile enfeksiyonu ve azoksimetan / DSS-kaynaklı kolon kanseri) birden kemirgen modellerinde güvenilirlik ve puanlama sisteminin geçerliliği test gerçekleştirin.

Protocol

1.. Endoskopi Sistemi Kurma

1. Üreticinin talimatlarına, fareler anestezi önce endoskopi sistemi kurun. Bu protokol için, insanlar için dizayn edilmiş bir görüntü üreteroskop (Şekil 1) kullanın. Ekleme tüpün dış çapı 9,9 Fr (3.3 mm) olan, kendi uzak uç 8,5 Fr (2.8 mm) olan ve enstrümantasyon kanalın iç çapı 6 Fr (1,2 mm) 'dir.
2. Endoskop kullanımının hastalık bulaşma ile bağlantılı olmasına rağmen [9], spor oluşturan mikroorganizmalar ile çalışırken% 70 etanol ¹⁰ ile ya da uygun tekniklerle endoskop ve lens sterilize. Bakteriyostatik steril yağ ve non-kaşıma endoskop ucu doyurmak için dokuları silin hazırlayın.
3. Enstrümantasyon kanalın üst hava dolu bir 3 ml şırınga (ya da uygun bir _CO2 gaz karışımı) takın.
4. Gücü açın ve normal beyaz ışık beyaz dengesini kurmak,uygulanabildiği gibi dar bantlı görüntüleme (NBI) modu. Bu karakteristik anormal kanlanmalı ¹¹ var ülseratif ve tümöral lezyonların dahil mukoza üzerinde ince damar yapıları, vurgular gibi 2001 yılından bu yana, NBI tanısal görüntüleme faydalar sağlamıştır. NBI-filtre modunda hemoglobin olan yapıların vurgular 390-445 nm ve 530-550 nm, yakalanan ışığın dalga boyunu kısıtlar.
5. Bulgularını kaydetmek için değerlendirme puanlama formu (Şekil 2) yazdırın. (Bkz. Bölüm 6.1) sınav öncesi beklenen normal ve NBI görüntüleri (Şekil 3A) ve tanım ve her kriter sınıflarda aşina.
6. Arzu edildiği takdirde, kromoendoskopi için fosfat tamponlu tuzlu su (PBS) bir boyar madde bazlı çözelti hazırlayın. Kromoendoskopi olarak, sınav mukozal değişiklikleri vurgulamak için bir kontrast ortamı olarak bir boya kullanılarak gerçekleştirilir. Metilen mavisi (% 0.1-1) ve indigo karmin (% 0.1) çözümleri (Şekil 3B) kullanın. Notbu metilen mavisi numune analiz engelleyebilir oksitleyici radikalleri, amino asit kalıntılarının dolaylı çapraz bağlanmasını, bozulmasını ve DNA ^12, üretebilen bir oksitleme-indirgeme maddesidir.

2. Fare Genel Anestezi

1. Anestezik ajan ve yönetim rotayı seçin. Bağışıklık sistemi ve araştırma hedefleri ile ilaçların olası müdahalesi konusunda bir hayvan kaynak tesis veya Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) bir veteriner danışın. Bazı ilaçlar kemirgenler de dahil olmak üzere ^13, hayvanlarda sitokin profili ifade etkileyebilir. Uygun kontroller ile birlikte, sağkalım endoskopi terminal prosedürleri izofluran veya enjektabl tribromoethanol kullanın.
2. Indüksiyonu için, 0.2-0.5 L / dk 'lık bir oranda% 100 oksijen izofluran 4-5% yönetmek, bakım için 0.5-2% kullanın. Bu protokol, tüm hayvanlar için uygun değildir. Lütfen tesis veteriner hekiminuygun talimatlar ve eğitim için. Hayvan refahı için en yüksek standartlara ulaşmak için ilgili IACUC tavsiyelerine uymak. Fare tamamen anestezi eğer emin olun.
3. "Kayış 'laboratuar yapışkan bant kullanılarak bir dorsal veya ventral bir pozisyonda bir destek yüzeyi tabloya anestezi fare. Lütfen endoskop ekranda anatomik oryantasyon sakının. Alt ekstremite ve kuyruk sabitleyin. Bant bir bant da uzak respiratöre gelen hareketini engellemek, ancak göğüs solunum hareketlerini kısıtlayan önlemek için göğüs üzerine yerleştirilebilir.

3. Ayrıntılı Endoskopik Sınav

1. Sonra anüs yoluyla kapsamını ilerlemek, rektum içine endoskop takmadan önce perianal lezyonlar arayın.
2. Coat steril cerrahi yağlayıcı ile endoskop. Değil CCD (şarj bağlı cihaz) sensör kat yüzeyini emin olun.
3. Endoskop takın ve kaydetmeye başlayın. Kaydedilen videolar m için yararlıdırmuayeneden sonra gerekirse endoskopi eticulous değerlendirilmesi. Mukozal / bağırsak tahrişi en aza indirmek için zaman mümkün olan en az uzunluğu endoskopi gerçekleştirmek için çalışın.
4. Yavaş yavaş bağırsak duvarları ayrı ayarlamak için bir şırınga kullanarak hava uygulayın. Fare boyutuna bağlı olarak, havanın 1-2 ml kullanın. Aşırı hava insuflasyonu kaçının, bu anestezi fare solunum sıkıntısı ve ölüme neden olabilir.
5. Eğer hava veya kapsam nazik rotasyonu ile önünü olarak öne endoskop ilerlemek. Eğer bağırsak ışığını göremiyorsanız endoskop ilerlemek etmeyin. Perforasyonlar ya da kolon / rektal yırtıklar, özellikle genç farelerde (<8-10 haftalık), bu aşamada oluşabilir. Gerektiğinde fotoğraf çekmek.
6. Kapsamı ilerledikçe (tanımlandığı gibi doğal olarak meydana gelen mukozal kanama travmatik endoskopi ile ilişkili olmayan) kendiliğinden kanama olup olmadığını değerlendirmek. Endoskop rektum ve kolon girer gibi spontan kanamalar görülebilir.
7. Olarakkolon duvarının şeffaflık Sess. Şeffaflık kolon içi kan damarları görselleştirmek ve çevredeki diğer organların (Şekil 4) yeteneği olarak tanımlanır. Kapsam nazik hareketi (back-forward, saat yönünde, saat yönünün tersine) kan damarlarının diğer organların bağlamında görülebilir olmadığını belirlemede yardımcı olacaktır. Mezenterik yağ dokusu da görülebilir. Pelvik boşluğun içindeki rektum karın boşluğunda kolonik duvar daha az saydam görünür olmadığına dikkat ediniz.
8. Fokal lezyonların (ödemli alanlar, erozyonlar, ülserler, tümoral kitlelerin) türünü ve sayısını belirlemek için kontrol edin. Bu kolon enflamasyon skoru ve geliştirilmiştir ondalık tanımlayıcıları kullanarak puanlama şeklinde kaydedilecektir.
9. Kolon yakın kolon içine caudally şişiriyor alan ulaşıldığında, yavaş yavaş endoskop çekilme ve sonra ufalanabilirliğinin mukozal kanama nedeniyle oluşur temas (varlığı için bakmakendoskop) ileri veya kaldırılır. Bu kasıtlı olarak kolon yüzeyine temas için gerekli değildir. Sağlıklı kolorektal mukoza uygun endoskopik muayene sonrasında kanamaz.

4. Biyopsi

1. Biyopsileri ihtiyaç olduğunda, enstrümantasyon için özel endoskop kanalından biyopsi forseps yerleştirin. Intestinal perforasyon önlemek için endoskop ekranda forseps ilerlemesini izleyin.
2. 60-80 ° cup-fincan açı yaklaşık forseps biyopsi bardak açın ve ilgi alanına yönlendirmek. Aşırı açılmış forseps veya basınç sağlıklı şeffaf bağırsak duvarlarının bir biyopsi kaynaklı delinmesi ile sonuçlanan bağırsak dokusu, ekstra katmanları kavramak olabilir. Perforasyon ortaya çıkarsa, IACUC şu önerilerde anestezi sırasında hayvan euthanize. Perforasyonlar endotokseminin ve peritonit sonucu.
3. Biyopsi bardak kapatın ve forseps kapalı tutarken onları çekin.
4. Remodoku ve forseps nazik bir çözelti ile yıkama ile doku Forseps numune ettik. RNA daha sonra PBS ve ortak bir çalışma çözüm yolu; gerekirse, örnek çıkarmak için iğne kullanın. Forcep bardak aşındıran ya da kesme kenarları kaçının.

5. Anestezi Kurtarma

1. Kurtarır kadar muayene tamamlandıktan sonra, fare için sıcak bir ortam sağlamak. Bir elektrik ışığı veya 37 ° C'ye ayarlanmış sıcak bir bez ya da kullanma Aşırı ısınmayı önlemek; periferik damar genişlemesi hayvan kurtarma uzlaşma. Tam iyileşme kadar yakından fare izleyin.

6. Ondalık tanımlayıcıları ile Kolorektal Sağlık Entegre Endoskopik Puanlama Sistemi

1. Için: (Parametre Tanımlar ve Protokolü bir ondalık ağırlıklı Puanlama Sisteminin Kullanılması Mürin Kolorektal iltihaplanma ve Tümörler Endoskopik Değerlendirilmesi) puanlama formu (Şekil 2) ve aşağıdaki parametre tanımlarını kullanınörnekler ve nonbiased değerlendirilmesi ve ayrıntılı kayıt tutmak için kurallar olarak isteğe bağlı 'Distal-Proksimal Endoskopik Kolit skorlama sistemi' (D-PECS).
2. Skorlama sistemi şeklinde (Şekil 2) açıklandığı kolorektal inflamasyon dört parametre skor. Titizlikle perianal bölgeyi, bağırsak şeffaflık, kanama bağırsak tipini (varsa) ve varlığı ve fokal lezyonların miktarını (erozif, ülseratif ve / veya tümöral) değerlendirir.
3. Araştırma amaçlı tümörleri değerlendirirken, miktarı, konumu ve boyutunu incelemek ve kolon harita ve puanlama formunda çubuk grafiği kullanarak bunları açıklamak. Elde edilen puanları ve lezyon sayısı (varsa) ait sayısal toplamı plan kolon iltihabı, lezyonun en baskın türü ve lezyonların sayısını belirleyecektir.

Representative Results

Bu çalışmada sunulan protokol ve görüntüleri Olympus URF-V esnek endoskop ¹⁴ ve NBI ^11,15 ile hazırlanmıştır. Video görüntüleri MPEG-2 formatında ve JPG, TIF, PNG, veya standart USB flash taşınabilir belleklere devredilemez maksimum 1.280 x 1.024 piksel, ile DICOM formatındaki resimlerin kaydedildi. NBI hemoglobin içeren dokuların görsel kontrast artırır. Normal ışık ve NBI görüntüleme kolorektal mukozanın normal anatomi ve ülser ve tümör gelişimi (Şekil 3A ve 6A) sırasında normal ve anormal vaskülarizasyon arasındaki farklılıkları göstermek için önemli özelliklerdir. Kromoendoskopi sırasında kontrast madde olarak metilen mavisi ile Görüntüler kolon kript anten, normal bal peteği görünümü (Şekil 3B kadar yakın bakınız) ortaya, yakın çekim görüntüler için faydalarını göstermektedir.

Bugüne kadar, 500 kemirgen endoskopiler Follo yaptıkkanat tekrar inceleme temsil eden yaklaşık% 10 ile bu protokol,. Genellikle, yordamı tamamlamak için 10-15 dakika sürer, anestezi, endoskopi ve derlenme idaresi arasında eşit olarak paylaştırılır. Sınav makattan distal kolon, dalak eğme kapsar. Ayrıca, hemen önce başarılı bir şekilde histoloji (Şekil 6B) için hasat dokulara dokuların postmortem diseksiyon ardından, bazı durumlarda, proksimal kolon, çekum ve ileum postmortem muayene, endoskopik yürütmüşlerdir. Bir durumda, biz de gözlenen nedeniyle barsak yapışıklıkları ciddi duodenum darlığı ve impaksiyon ile etkilenen bir fare şüpheli gastrik dilatasyon doğruladı. Anormal görüntü hafif iltihaplı distal kolon en kafatası açıdan transmurally gözlenmiştir; otopsi gerilmiş mide kolon yan yana olduğunu gösterdi.

Biz güvenilir ve geçerli bir ondalık ağırlıklı s geliştirdikyayınlanan araştırma çalışmalar arasında kemirgen endoskopi standart uygulama geliştirmek için sistem karot. Üç skorlama sistemleri önceden istihdam ve ondalık ağırlıklı sisteminin ^4-6 gelişimi için temel olarak servis edilmiştir. Bu sistemler çeşitli kriterlere ve lezyon şiddetinin seviyelerinin sınıflandırılması için izin olsa da, endoskopik görüntüleri değerlendirmek zor, bazıları uygun kriterleri tanımları, eksikliği. Skorlama sistemleri farelerde endoskopik muayene için şüpheli bir ilgisi var bazı durumlarda, belirsiz parametreler dahil. Onbir yayınlanan parametreler ^4-6 ve endoskopik avantajları, sınırlamalar ve fizyolojik alaka bir özeti Tablo 1'de sunulmaktadır.

Önerilen kemirgen kolon endoskopi skorlama sistemi araştırma amaçlı kullanılabilir olacak çünkü, istatistiksel çıkarsama yapmak için onun yararlılığı temel oldu. Skorlama sistemi vardı emin olmak içinyüksek yapı geçerliliği, ilk, ilgili parametreleri belirlemek için bir kavramsal çerçeve geliştirmiş az kriterlerine (n = 3), bu parametreler gruplandırılmış ve iltihap ve iyileşme fiili varlığı (Şekil 7) ile colinearity ve korelasyon değerlendirildi. Sonra, şiddeti sıra düzeylerini göstermek için ayrı tamsayı kullanarak perianal bulguları eklenmiş, ve ondalık tanımlayıcıları kullanarak tümör indüksiyon ve kalkınma kavramını entegre. Ayrıca, kemirgen endoskopisi rapor daha önce kabul değil, başka bir parametre / gibi 'striktürlere' ekledi. Elde edilen çıkış puanları yüksek geçerliliği üretmek ve parametrik istatistiksel analiz için uygundur. Son olarak, biz haritalama ve ayrıntılı hastalık takibi için sayısal komplo yetenekleri ekledi.

Bizim değerlendirme sistemi yakınsak geçerliğini değerlendirmek için, 36 fare kolonoskopi için üç yayınlanan parametreler elde puanlar puanlar karşı karşılaştırıldı obtaikörü körüne önceki üç skorlama sistemlerini ^4-6 kullanılarak aynı kişi tarafından ned. Her karşılaştırma bizim entegre skorlama sistemi (; Şekil 8 Pearson p <0.0001) yüksek yakınsak geçerliğini gösteren, iyi pozitif korelasyon gösterdi. Bu skoru 0 ve 1, P arasında şiddetli kolit ve geliştirilmiş veri dağılımını (p = 0.0351 durumlarda yaygın olarak mevcut olduğu gibi analiz, kolorektal sağlığını değerlendirmek için klinik kriterlerinin bir parçası olarak perianal bulguların dahil destekler = skoru 2 arasında 0.0086 3, Şekil 8B). (Perianal bulguları eklendikten sonra) entegre edilmiş bir skorlama sistemi, diğer mevcut sistemlere göre zaman, bu 3 diğer sistemlerin 2 nedeniyle olası dört kategoriden birine tamsayı, büyük bir vakaların kümelenme için önemli bir dolaylı sınırlama olduğu açıktı yöntem yanlış sınıflandırma önyargı göstergesidir (Şekil 8C) ^16. Ondalık künyeleri ile, bizim yeni skorlama sistemi kümelenme en düşük olasılığa sahiptirtamsayı kategoride veri noktaları tering.

Şekil 1. Instruments. Esnek endoskoplerin video kontrol sistemi, ışık kaynağı, video kaydedici, ve bu çalışmada kullanılan inhalasyon anestezi makinesi. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

Şekil 2. Farelerde kolit ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesi için bir skorlama sistemi ondalık formu. Sistem olmayan dört eş-doğrusal parametre temel bir enflamatuar bileşeni, t grafiklereumor bilgi ve önemli lezyonlar veya komplikasyonlara ondalık birimler. (Ondalık ağırlıklı Puanlama Sisteminin Kullanılması Mürin Kolorektal iltihaplanma ve Tümörler Endoskopik Değerlendirilmesi) aşağıdaki bölümde ayrıntılı ölçütler ve örneklere bakın. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

Şekil 3,. Normal endoskopik ışık modu, NBI modu, ve kan damarlarının kromoendoskopi. Arborization ile normal mukoza eşleştirilmiş görüntüleri rektum normalde daha az yaygındır. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

FO: İçerik-width = "5in:" src = "/ files/ftp_upload/50843/50843fig4highres.jpg" src = "/ files/ftp_upload/50843/50843fig4.jpg" width = "500px" />
Şekil 4. Farelerde bağırsak duvarı. Endoskopik duvar intestinal damar ve mezenterik yağ görselleştirme ve mesenterik damarlar ve bitişik sağlıklı iç organların yağların bu endoskopik şeffaflık ilkesinin görüntülenmesi için bağırsak döngüler kesit gösterimi, bir çeperi ile mümkündür Sağlıklı bir kolon. Distal kolon periton bölümlerinde bağırsak duvarının iltihaplanması ve kalınlaşma diğer bağırsak segmentleri sağlıklı olsalar bile, diğer organların gelen intramural ve transmu yapıların görselleştirme engeller. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

3/50843fig5highres.jpg "src =" / files/ftp_upload/50843/50843fig5.jpg "width =" 500px "/>
Şekil 5,. Sorun Giderme. Bağırsak içeriği, bulanık görüntü ve peristaltik hareketleri nedeniyle düşük görünürlük çözümleniyor. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

Şekil 6,. Eşli görüntüleri hastalıklı kolorektal mukozada ve diğer proksimal barsak segmentlerinin (normal ışık vs dar bantlı görüntüleme, NBI). NBI Ülseratif ve tümöral lezyonların belirlemeye yardımcı olur. Bazı ülserler NBI ile kahverengimsi görünür; fibrinöze malzeme ile kaplı diğerleri, kalın ve beyaz görünür. Onlar olmadıkları zaman AOM / DSS tümörler özellikle erken evrelerinde, NBI ile daha iyi karakterize olanlümen içine çıkıntı. Yıldız (*) kolon hava ile şişmiş tüm diğer görüntülerde gözlenen değil PBS ile dolu kolon endoskopik objeyi (mukozal Oluklu) vurgulayın. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

Şekil 7. Bağırsak iltihabı şiddeti ve kolon iltihabı görsel ayırt ve sınıf yayınlanmış çeşitli kriterlere yeteneği (bkz. Tablo 1) arasındaki teorik ilişki ve ortak doğrusallık. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

Şekil 8,. Bizim puanlama sistemi ve daha önce yayınlanmış skorlama sistemleri arasında performans karşılaştırması. Veri 36 fare Video endoskopi eşleştirilmiş kör analizlerde perianal lezyonlar dışında inflamatuar parametrelerin (3 parametreler) Sistem A. A) Karşılaştırma (5 parametreleri). B) skorlama sistemi de dahil olmak üzere, perianal bulgular Önemi;. sürekli farelerde orta / ağır kolit durumlarda ilave istatistiksel olarak anlamlı bilgi verilmedi perianal inceleme daha önce rapor sistemleri (36, fare ile karşılaştırıldığında bir video perianal bulguları içeren sonra skorlama sistemi C) performans endoskopiler) her yöntemi ile değerlendirildi. Sistemleri B ve C nedeniyle misclassificat götüren dört kategoriden birinde vakalarının kümelenme önemli bir sınırlama var unutmayıniyon önyargı (Sistem B ve eşdeğer olmayan kategorilerde C küme olgu). Şimdi anlamlı sayısal puanlarının izleme izin verirken ondalık tanımlayıcıları ekleyerek, biz de tamsayı kategorilerde kümelenme şansını düşürdü. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

Farelerde bağırsak iltihabı değerlendirmek için endoskopik kriterler olarak yayınlanmaktadır Tablo 1.. Klinik parametreler. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

Endoskopik AssessmeKemirgen Kolorektal Enflamasyon ve Tümörler nt bir ondalık ağırlıklı Puanlama Sisteminin Kullanılması: Parametre Tanımlar ve Protokol

, Konumu, büyüklüğü ve tümöral lezyonların sayısı 2) kayıt ve 3 dört parametre ve 12 olası sayısal notları ile kolorektal inflamasyon ölçüde ve şiddeti 1) değerlendirme, kolorektal sağlığı için entegre endoskopik skorlama sistemi üç ana bileşeni vardır araştırmacı için özel bir öneme sahip bulguları vurgulamak için primer ya da baskın lezyonlar ve endoskopik komplikasyonlar tahsis tip) ondalık birimleri, burada "ondalık tanımlayıcılar" olarak anılacaktır. Tümörlerin konumu ve büyüklüğü sanal kolon harita üzerinde kaydedilir ve lümene doğru çıkıntı (tıkanma) her bir yüzde olarak tümörlerin sayısının bir grafik üzerine kaydedilmektedir. Bu iki grafikler, üç boyutlu olarak entegre edilebilir tümör bilgi sağlar. Lezyon kategoriler için ondalık birimler 0,0-0,9 arasında değişir. Eğer numBelirli bir kategori için lezyonların ber, ilgili, ikinci ve üçüncü ondalık yerleri lezyonlarının sayısını belirtmek için kullanılır olabilir. Üç lezyonları görülür Örneğin, 0,003 ekleyerek araştırmacı üç lezyonlar olduğunu biliyorum izin istiyorum; 12 lezyonlar varsa, o zaman 0.012 kullanılacaktır. Tekrarlanan endoskopik muayeneler beklenen Bu izleme sistemi, özel fayda. Enflamasyon kriterleri ve şiddeti notlarının ayrıntılı tanımları aşağıda verilmiştir.

Endoskopik kriterleri tanımı - A. dört klinik parametreleri ile kolorektal infamasyon Değerlendirilmesi

1.. Perianal bulgular: post-endoskopi kanama ile karışıklığı önlemek için kapsam belirleme başlamadan önce bu yönüyle değerlendirin. Perianal bölgenin sağlık kolon, deri, ve genel olarak hayvanın tutum sağlık durumu için bir vekil, ve endoskopik muayenenin bir parçası olarak dahil bazı lezyonlar olamaz ve s çünkühould çıplak gözle yakından muayene edilemez. Uygun biyogüvenlik önlemleri egzersiz. Fareler sağlıklı bakım alışkanlıkları kan / deşarjları kaldırabilirsiniz, ancak perianal bölgeden deri lezyonları kaldırmak unutmayın. Puanlama:

0. Normal. Kan yok, ishal, çatlaklar, fistül veya akıntı görülmektedir.
1. Dışkı ya da ishal kümeleri gözlemledik.
2. Kanlı akıntı, gevşek dışkı (ishal), irin, ya da gözlenen minör ülserlerin pıhtılar / kümeleri.
3. Granülasyon dokusu veya çevreleyen derinin en içerir ve hayvan perianal bölgede tahriş ve iltihap işaretli belirtmek görülmektedir lezyonlar, rektal prolapsus.

2. Kolon Şeffaflık: kolon-endoskop olarak kolon duvarından kan damarları veya extramural organları görselleştirmek için yeteneği olarak tanımlanır yavaşça hareket ettirilir. Rektum doğal nedeniyle kas tabakalarına daha az şeffaf olduğunu unutmayın birdaha az kontrast mevcut pelvik boşlukta olduğu d için. Bu, sıçangil kolon genel enflamatuar durum ya da sağlık yansıtır gibi fizyolojik olarak en kapsamlı parametrelerden biridir. Enfeksiyon ya da epiteli üzerinde toksik etkileri erken aşamalarında mukoza erozyon / ülser olmayan bir iltihaplı kolon olması mümkün olduğuna dikkat edin. Fizyolojik izotonik çözelti uzun süreler için kullanılması (Şekil 6'da yıldız işareti bak) ise, örneğin su gibi, hipotonik çözeltiler gibi, farelerde mukoza beyazlatma ve kasılma ile bir değişikliğe yol endoskopi sırasında yıkama için kullanılmalıdır dikkat edin.

0. Normal. Kolon, büyük ve küçük kan damarları ve çevresindeki organlar açıkça görülebilir. Hafif (ileri ve geri, saat / saat yönünün tersine) endoskop taşıyın. Beyaz mezenterik yağ ya da diğer organların koyu içeriği de görülebilir.
1. Küçük gemiler kısmen görünmez ama büyük damarlar görülebilir.
2. Küçük vessels görünmez ve büyük damarların açık değildir. Mukozası görünür kalınlaşmış değildir.
3. Bağırsak duvarı ve / veya mukozal ödem / genelleştirilmiş belirgin kalınlaşma. Kan damarları görünür değildir. Birkaç şişmiş / varisli damarlar bazı durumlarda görülebilir.

3. Mukozal kanama: Ayırt spontan kanama kanama temas. Sağlıklı farelerde rutin standart endoskopik prosedürler kanamaya neden olmamalıdır. Iltihap varsa, artmış mukoza damarlanma ve doku kırılganlık mukozal erozyon ve kanamaya yol açabilir. Bilerek bu parametreyi değerlendirmek için kolon kazımak gerek yoktur.

0. Normal, herhangi bir kanama.
1. Ortak iletişim kanama. Bu travmatik kanama iletişim kanama olarak tanımlanır; sadece endoskop çekildikten sonra değerlendirilmelidir.
2. Uygulanamaz. Kasıtlı natur karar tabip zorlamak için atanmamışKanama e.
3. Endoskop kolon girer olarak görülmektedir, bir non-travmatik ve doğal olarak oluşan kanama olarak tanımlanmıştır kendiliğinden kanama,. Bazen, hava insüflasyonu ciddi kolit sırasında spontan kanama neden olur.

4. Odak lezyonlar: kolorektal hastalıkların yamalı, öngörülemeyen doğa yerleştirmek için, bu entegre skorlama sistemi sağlar inflamasyon şiddeti ile fokal lezyonların varlığında (çoğunlukla ülseratif doğada) için not verme. Kolon farelerde kısa, düz bir boru şeklinde segmenti olduğu için, bu lezyonların yerini tanımlamak için gereksiz görüldü. Bunun yerine, lezyonların sayısı kaydedilmiş ve ondalık tanımlayıcıları sistemini kullanarak toplam puana eklenir. Lezyonların konumuna vurgu gerekiyorsa Ancak, biz F. Ayrıntılı akıcı uygulamalar olabilir bölümünde aşağıda açıklanan 'Distal-Proksimal Endoskopik Kolit Puanlama Sistemi' (D-PECS) adında bir seçenek varBizim ondalık skorlama sisteminden türetilmiştir. Tümörleri nadir farelerde kolorektal bölgedeki enflamasyonun çeşit neden olmadan mevcut olduğundan, birbirinden (aşağıya bakınız) bağırsak sağlığı bağlamında tümörlerin çalışma sağlamak için ondalık tanımlayıcılar bölümünde tümörler dahil ettik.

0. Normal, hiçbir fokal lezyonlar.
1. Normal mukoza ile kaplı küçük düz yükselmesinin iyi tanımlanmış alanlar görülmektedir. Bu hafif kolit bulunduğu gibi, yerel ödemli alanlar veya hücre infiltrasyonu / çoğalmasının potansiyel alanları hitap etmektir.
2. Kızarıklık veya eroziv alanlar görülmektedir.
3. Ülserasyon veya darlıklar. Ülser nedeniyle ödemli veya fibrotik yara onarım kızarıklık ve deformite (anormal damarlanma kanıt düzensiz kenarlar) ile tanımlanır. NBI endoskopi algılama veya ülserlerin gözlem ayırt etmek için yararlıdır. Darlıklar sözleşme ya da eski gibi genişletmek değil anormal, dar yuvarlak veya düzensiz şekil ve statik alanlar olarak kabul edilmektedirşüphesi. Genellikle darlıklar ileumda anormal mukozal crypts, veya villus alanları içerir. Esnek endoskoplar (dış çap = 3.3 mm) durumunda kolonun daha yakın alanlara kapsamını ilerletmek için dikkat tutarlı biçimde post-mortem doğrulanmış anormal striktür ile ilişkilendirilmiştir.

Kayıt konumu, büyüklüğü ve sayısı B. Tümör çizelgeleri

1.. Sanal kolon harita: Bu harita lümen üst (0 °) kesme ve yayıyoruz tarafından yapılan distal kolon ve rektum sanal bir perspektif görüntü. Grafiğin üst ve alt sırasıyla, kolon (eğilme) proksimalinde ve anüs atanır. Merkez hattı (180 °) lümeninin alt (hayvanın ventral görünüş) işaret eder, ve yarım daire sağ ve sol yarıları sağ ve sol lümen duvarı göstermektedir. Harita, konumu ve tümörlerin yatay büyüklüğü tarif, hem de kullanılabilirülserasyon gibi.

2. Tümör işgal her bir derece için tümör numaraları: kolon haritası sadece iki boyutlu bilgi sağlasa çıkıntı bağırsak tıkanması veya tıkanmaya neden olabilir bu yana, tümörler bağırsak lümenine büyümeye ölçüde, tümörlerin önemli bir özelliğidir. Bu bilgileri elde etmek için, kolon tümörlerinin ölçüde değerlendirilmesi için üç boyutlu bir perspektif sağlayan, her bir yüzde aralığı tümörlerin sayısını belgeler lümenine yüzde çıkıntı için bir kayıt grafik ilave edildi.

Sayısal puanları anlamlı hale C. ondalık tanımlayıcılar ve fast-track ilgili davalar

Bizim puanlama sistemi, ilgili lezyonlar veya komplikasyonların varlığını kaydetmek için yeni bir ondalık tanımlayıcı sistemi kullanır. Bu tanımlayıcılar açıklayıcı amaçlıdır ve endoskopik ilgi bir sayısal puan ve fast-track vakalarının yorumunu kolaylaştırmak için tasarlanmıştır. Ancak, onlar da lezyonların ağırlığı baskın türleri sayısal ve parametrik istatistiklere mükellef veri setlerinin üretimi sağlayacak hizmet vermektedir. Geliştirilen puanlama formu kullanırken, uygun lezyonlar işaretlemek ve bir ondalık tanımlayıcı inflamatuar puanına eklenecek seçin.

0. Özel bulgular.
1. Perianal fistül, perianal veya aşırı iltihaplanma, rektal prolapsus.
2. Küçük duvar tutulumu öncelikle eroziv lezyonlar.
3. Çoğunlukla ülserli lezyonlar, bir (ülserlerin sayısı vs, iki tümörler için, bir tümör için 0,301 olarak on tümörler için 0,311 0,302 kaydedilebilir.) Kanama, fibrin ile kaplanmış, ya da bağlı küçük ülser birleştirilmesine düzensiz şekilleri ile büyük.
4. Bağırsak darlığı (isteğe bağlı darlık kolit ciddi bir inflamatuar komplikasyon olduğundan, toplam enflamatuar skoru 2 puan eklemek).
5. İyi tanımlanmış plak (bağırsak duvarının içinde kalın / nontransparent doku; örneğin & #160; düz bir düşük yükseklikte tümör). Lezyonlar için tarif edildiği gibi plak sayısı (yani, 0.401, 0.402, 0.411 ..., vb.) Kaydedilebilir. Bunlar bağırsak lümen çevresel görünümünü değiştiren yaklaşık% 5-10 kadar çıkıntı gibi görünebilir düz olmayan bir genişletilebilir yüzey olarak görünebilir.
6. Kitle veya tümoral lezyon çıkıntılı. Lezyonlar için tarif edildiği gibi kitlelerin sayısı (yani, 0,601, 0,602, ... 0.611, vb.) Kaydedilebilir. Onlar açıkça şişkin, ama düz görünebilir ama intestinal lümen şişmiş çevresinin>% 15 çıkıntılı.
7. Endoskopi sırasında gözyaşı / perforasyon uyardı.
8. Endoskopi sırasında hayvanın ölümü.
9. Diğer: _____________ (örn. ciddi proksimal endoskopik kolit, aşağıda Distal-Proksimal Endoskopik Kolit Puanlama Sistemi bakınız).

D. Örnekler ve uygulamaları

Bu çalışmada sunulan kemirgen endoskopi skorlama sistemi specifically kolon iltihabı ve kolorektal tümörler üzerindeki verilerin toplanmasını ve analiz entegre etmek için tasarlanmıştır. Tümör ile ilgili olarak, veriler eğri altındaki alan, medyan, mod ya da ana bileşen analizi de dahil olmak üzere çok sayıda istatistiksel yaklaşımlar kullanılarak analiz edilebilir. Bireysel düzeyde, skorlama sistemi araştırmacılar zamanla tek bir fare kolon sağlığını izlemek yardımcı olabilir. Enflamatuar alt puanları toplanarak tipi ve uygun olduğu yerde lezyon sayısı için uygun bir ondalık tanımlayıcı ekleme sonra, toplam puan araştırmacılar sayısal kolon iltihabı, lezyon en baskın tipi ve lezyonların sayısının boyutunu ölçmek için izin verir. Örneğin, 12,609 skoru bu fare tümoral kitleler çıkıntılı ciddi kolorektal iltihap ve dokuz olduğunu gösterir; endoskopi sırasında delindi normal perianal bölge ve kolorektal mukozası ile sağlıklı bir fare 0.7 toplam puan olurdu. Ondalık tanımlayıcı sistem olacakaraştırmacılar katalog ve kolayca attı farelerin büyük veri depoları aramak için izin verir. Örneğin, bir araştırmacı "0,6" ile biten tüm puanları belirlemek için arama kriterlerini belirlemek ve çıkıntılı tümörler tüm davaları almak olabilir. Diğer örnekler tamamlayıcı Şekiller S1-S3 'de gösterilmiştir.

E. Distal-proksimal endoskopik kolit skorlama sistemi (D-PECS)

Bu şiddetli / geniş proksimal kolit vakaları ayırt etmek bizim ondalık tanımlayıcı skorlama sistemi opsiyonel bir değişiklik olduğunu. Farelerde kolit ve kolorektal tümörlerin endoskopik işaretleri kolon distal segment sürekli olarak geliştirilmesi olduğu görüldüğü için önerdiğimiz:

• Kolon distal üçte ikisi özel dikkat, açıklanan kriterler aşağıdaki kolon puan ve görünüşe göre sağlıklı ise proksimal segmenti yok saymak için. Bu karışıklığı önler ve ayırıcı için endoskopi ayrımcı gücünü artırırgeniş kolit çeşitli derecelerde tiate hayvanlar.
• Diğer, 'şiddetli proksimal endoskopik kolit olarak etiketlenmiş olabilir - inflamatuvar veya tümör değişiklikler proksimal gözlenen, biz toplam puanı (1.0) bir nokta eklemek ve '0 0,9 gibi ondalık tanımlayıcı atamak öneririz. Harita ızgara ve çubuk grafik bulguları çiziniz.
• Kolonun proksimal üçte endoskopik anormallikleri var hayvanları izleyin. Hastalık olağandışı şiddetli olabilir veya proksimal kolonda doğru dalak eğme ötesine uzanabilir gibi, özel dikkat otopsi ödeyin.
• Bu öneri izledi ise, değerlendirme formu 'gözlemler bölümünde' in bu yaklaşımı kaydetmek ve deneyler karşısında bu trendi takip. Değerlendirme 0-13,9 arasında değişmektedir bizim uzak-yakın endoskopik kolit skorlama sistemi 'veya D-PECS, aşağıdaki yürütülen son yayında alıntı lütfen. Bu değişiklik yok s olduğunu unutmayın Geniş / ciddi proksimal kolit olmayan hayvanlarda kullanılması durumunda bizim puanlama sistemine tatistical etkisi.

Ek Rakamlar.

Şekil s1. Kolorektal tümörleri olan bir fare endoskopik değerlendirme örneği. Hayvanlar AOM ve DSS önce endoskopi ile tedavi edildi. Endoskopik bulgular ile dolu), sırasıyla, normal ve NBI modda Temsilcisi görüntü. B) Puanlama formu. İki ilgili bulgular olmasına rağmen, araştırmacı, klinik şiddeti ve araştırma hedeflere dayalı ondalık tanımlayıcı 0.6 atamak seçti unutmayın. Parametrik istatistiksel analiz çeşitli 'Tümörleri / ülser Haritası' ve grafikler 'tümör çıkıntıları Kaydı' kaydedilen veri ile yapılabilir. iles/ftp_upload/50843/50843figs1highres.jpg "target =" _blank "> büyük resmi görebilmek için buraya tıklayın.

Şekil s2. Bir kolon darlık ve endoskopik bir komplikasyon. Intestinal lümen daralması ve bir nonperforating, mukozal gözyaşı darlık siteye sadece uzak endoskopi sırasında uyarılmış olduğunu unutmayın bir fare örneği. Iltihaplı kolon daralması ve debilitation mukozal yırtılmasına neden olabilir. Hayvan genel anestezi altında oldu. Skorlama sistemi bize prosedürel komplikasyonları izlemek ve azaltmak için izin unutmayın. resmi büyütmek için buraya tıklayın .

43/FigureS3.jpg "width =" 500px "/>
Şekil s3. DSS-tedavi fare inflamasyon ve endoskopik puanlama zaman tabii örneği. Numaraları kendi kendini açıklayıcı olabilir, unutmayın ve kolon iltihabı (1-5 ve 8) ilerledi ve o göstermektedir gün 8 (ondalık 0.2 tarafından geliştirilen erozyonlar 11. günde) ve ülserler (ondalık 0.3). resmi büyütmek için buraya tıklayın .

Discussion

Farelerde endoskopik tekniğinin modifikasyonu ve sorun giderme ile ilgili çeşitli hususlar vardır. Esnek endoskopi kullanımı sırasında hakim olması gereken prosedürün kritik yönleri açılanma ve tork kontrollerinin koordinasyonu ile karın şişliği ve fare solunum uzlaşma önlemek için gerekli hava hacmi ayarı ve görünümü kontrol minör teknik yönlerini kapsamaktadır . Tork kontrol intestinal perforasyon riskini en aza indirmek için önemlidir. Düzgün bir şekilde ele alınıp, kemirgen esnek endoskopi direkt görüntülenmesini ve araştırma ilgi bağırsak alanlarda biyopsi örnekleme sağlayan çok güvenli, hızlı olur.

(Şekil 5) dışkı nedeniyle görünümü engelleri çözmek için, pislikleri bile genellikle oruç ya da laksatif kullanımı sonrasında gözlenen olduğunu anlamak önemlidir. Mevcut olduğunda, dışkı kolayca yumuşak bir hava ins ile proksimale hareket ettirilebilirufflation. Vakaların yaklaşık% 11 olarak, aynı zamanda PBS lavman 1 ml kullanmak gereklidir. Karın şişliği ya da hamile olması gibi hayvanları incelerken önce lavman yürütülmesi için, dikkatli olun. Peristaltik hareketleri için hava üfleme peristaltiğini durmuyor beri peristaltik dalga geçene kadar birkaç saniye beklemek önemlidir.

Bugüne kadar, kemirgen bağırsak hastalığı değerlendirmek için kullanılan en endoskopik değerlendirme sistemleri kolit ya da kanser ya da özgüdür. Bu iki durum sıklıkla birlikte gerçekleştirilir ve birbirlerine, böylece kanser araştırmacıları tarafından gastrointestinal araştırma sırasında elde edilen bilgilerin kullanılabilirliğini arttırmak, iltihap ve tümör oluşumu hem de büyük ölçüde çapraz disiplin iletişimi kolaylaştırmak istiyorum dikkate alan bir standartlaştırılmış bir puanlama sistemi ile etkileşim göz önüne alındığında, ve tersi. Tümörler nadiren kolorektal bölgedeki iltihaplı alterasyon çeşit neden olmadan mevcut olduğundan in farenin, birbirinden bağırsak sağlığı bağlamında tümörlerin çalışma olanak sağlamak için skorlama sistemi ondalık tanımlayıcı bölümünde tümörler dahil ettik. Skorlama sistemi geçerlik ve güvenilirliğini arttırmak ve uzun süreli deneyler veya klinik çalışmalarda kullanımını kolaylaştırmak için, biz de sistematik olarak gerekli veri elemanlarını depolayan skorlama sistemi (Şekil 2), ile birlikte kullanmak için standart bir rapor formunu geliştirdi Her sınıflandırma kriterleri için kesin tanımlara dayanan kemirgen bağırsak iltihabı puanlarını hesaplamak.

Sınırlı geçerlilik birden kemirgen endoskopi skorlama sistemlerinin daha önceki durumu çalışmalar arasında sonuçların yorumlanmasını engellemektedir. Yönteminin kullanılacağını yayınlanan karar laboratuvar personeli tarafından yaşanan karışıklığı en aza indirmek için, iki-boyutlu görüntülerden anlaşılacağı kriterleri kullanılarak endoskopik değerlendirme yapıldıktan öneririz (örn. kriterlerini tha önlemekt doku veya kıvamı bakın - dışkı;.) mikrop içermeyen dahil olmak üzere bazı farenin yumuşak dışkılama olabilir unutmayın, ve co-lineer (yani olmadığı fizyolojik ve geçici Aynı inflamatuvar bağlamı tarafından tahrik olduğu) kardinal işaretler Çünkü .; 2) kanama, mukozal ve damar bütünlüğünün bir göstergesi olarak ilk duvar kalınlığı bir yansıması olarak, Becker ve ark ⁴ tarafından tarif 1) bağırsak şeffaflık,: inflamasyon, biz aşağıdaki kriterlere inflamatuar olayları kronolojik nedeniyle sıralı tavsiye edilir , 3) perianal bulgular, aşırı enflamasyon kolon bütünlüğü ve cilt tahrişi veya yatkınlık göstergesi ve sınıfa 4) fokal lezyonların öncelikle ülseratif farelerde enflamatuar lezyonların () şiddeti gibi. Bugüne kadar, biz% 3 DSS-kaynaklı kemirgen kolitin tipik modellerinde tümoral lezyon görmedim. Bu yazıda anlatılan kemirgen endoskopik skorlama sistemi bilgimize, ilk kez sağlarkolonik enflamasyonun bağlamında varlığı ve tümörlü lezyonlar indüksiyonunu değerlendirmek için bir nicel mekanizması.

Onlar bağırsak iltihabı, örneğin SAMP / Yit / Fc bazı hayvan modellerinde yaygın olarak mevcut olduğu görünen bu yana ilk kez, biz de, kemirgen endoskopi sırasında bir parametre olarak darlıklar dahil önemini vurgulamak. Darlıklarında nedeniyle acemi için endoskopik olarak değerlendirilmesi zor olan artmış fibroz, bağırsak elastiklik kaybı ile submukozal kronik iltihap (yarı) çevresel alanı, temsil eder. Biz nedeniyle yavaşladı bağırsak geçişinin muhtemelen (endoskopik muayene edilebilir) distal segmentler göre darlığa yakın olan kesimleri daha fazla iltihap olduğunu, endoskopik olarak tanımlanan darlık etkilenen farelerde fark etmiş. Araştırma amacıyla, daha iyi karakterize etmek için inflamatuar deneyler sonunda hayvanlar histolojik takip için tavsiye edilirAday darlık bölgeleri kuşatan duvarında inflamatuvar yanıtları.

Uygun eğitim ve uzman geribildirim olmadan, herhangi bir puanlama sistemi, herhangi bir zamanda değişkenlik olabilir. Bu sağlamak için tıp uzmanının eğitimli bir veteriner tarafından takip edilmelidir fareler üzerinde yapılan endoskopik eğitim prosedürlerini vurgulamak önemlidir: diğer bilim adamları veya teknisyenler i) uygun eğitim, ve ii) hayvanların sırasında yanlış teşhis ya da yanlışlıkla yaralı emin olmak için işlemdir. Mümkün olan en iyi uygulamaları ve hayvan refahını sağlamak için bu prosedürü uygulamaya geçmeden önce uzman tavsiyesi için hayvan araştırma tesisi sorumlu veteriner danışın. Bu rutin eğitimli endoskopistler performansını izlemek için tavsiye edilir. Biz kurallar olarak, hayvanların değerlendirilme sırası rastgele ve kör bir şekilde her hayvan değerlendirmek burada sunduk görüntüleri kullanın. Periyodik parametre tanımlarını ve protokol kriterlerini danışmak ve k) endoskopi ve puanlama Bölüm 6 elinizde onları EEP.

Özetle, tıp ve veterinerlik gastroenterolog bir ekip olarak, biz kolit ve tümörlerin fare modellerinin endoskopik değerlendirilmesi için standart bir protokol ve yarı-kantitatif puanlama sistemi mevcut. Bu araştırma araçları rutin kemirgen endoskopi yapmak için araştırmacılar sağlayacak, ve araştırma personeli laboratuvarlar ve disiplinler arasındaki bağırsak iltihap ve tümör oluşumu tekrarlanabilir ve karşılaştırılabilir tedbirleri oluşturmak için deneyim her düzeyde sağlayacaktır. Biz yüksek geçerliliği anlamlı sayısal puanları üretmek için sistem geliştirdi ve bireysel laboratuvarların içinde iç kullanım için özelleştirilebilir olabilir belirli bulgular, hızlı takibi için yeteneklerini sağladı. Biz de ̵ Bölüm E'ye bakınız (kolon içinde hastalığın bölgesel yatkınlık göz farklılıkları içine alan, ayrımcı bir puanlama alternatif tarif6; Distal-proksimal endoskopik kolit puanlama sistemi, kısaltma D-PECS). Veri raporu formu ve bazı rakamlar deneyimsiz bilim adamları yardım için duvar afiş olarak kullanılabilir (Şekil 1, 3, 5, 6). Anatomik farklılıklar ince endoskopik farkları ¹⁷ hesabı gibi kemirgen endoskopinin başarıyla uygulanması, anüs, rektum, kolon, ve çevredeki vissera'dan mukokutanöz kavşak normal anatomiye sahip tanıdık olma menteşeleri.

Mevcut bile, en küçük en esnek ve en iyi endoskopik teknolojileri hızlı yakın gelecekte fareler için kullanılabilir hale gelebilir kapsül ve tek lif endoskopi alanındaki teknolojik gelişmeleri hareketli, in vivo proksimal kolon ulaşamaz rağmen. Standart bir protokol ve bu yazıda sunulan endoskopik skorlama sistemi, canlı hayvanlarda kemirgen bağırsak ortamının durumunu görüntülenmesi ve değerlendirilmesi için değerli araçlar temsil eder. Bu araçlar tesislerinin olacakTate kağıtları arasında ve disiplinlerde sonuçlarının karşılaştırılabilmesi, yeni ve gelişmekte olan kemirgen endoskopik teknolojilerin uygulanabilirliği var olacaktır.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Isoflurane, USP	Webster Veterinary
Surgical lubricant	Savage laboratories	surgilube, 0281-0205-45
Phosphate Buffered Saline	Thermo Scientific	SH30256
RNAlater	Ambion	AM7021
Methylene Blue 1% Aqueous Solution	Fisher Science Education	S96393
Flexible digital ureteroscope	Olympus America	URF-V
Video system center	Olympus America	VISERA Pro OTV-S7 Pro
Xenon light source	Olympus America	VISERA Pro CLV-S40 Pro
Video recorder	MediCapture, Inc.	MediCap USB200
Flexible biopsy cup forceps	Olympus America	FBC-3115
Anesthesia machine	Euthanex Corporation	EZ-7000 Classic System