Summary
من أجل فهم الآليات الخلوية والجزيئية الكامنة وراء neotissue تشكيل وتطوير تضيق في الأنسجة المهندسة وصمامات القلب، تم تطوير نموذج الفئران من زرع صمام القلب منتبذ. تم زرع صمام القلب الرئوي إلى المتلقي باستخدام تقنية زرع القلب منتبذ.
Abstract
الأنسجة المهندسة وصمامات القلب والصمامات وخاصة decellularized، بدأت تكتسب زخما في الاستخدام السريري الجراحة الترميمية مع نتائج مختلطة. ومع ذلك، لا يتم بحثها الآليات الخلوية والجزيئية لتطور neotissue، صمام سماكة، والتنمية تضيق نطاق واسع. للإجابة على الأسئلة أعلاه، قمنا بتطوير الفئران منتبذ القلب صمام نموذج الزرع. وكان حصاد صمام القلب من الماوس المانحة صمام وزرعها لماوس المانحة القلب. تم زرع قلب مع صمام جديدة heterotopically إلى ماوس المتلقي. أظهرت القلب المزروع ضربات القلب الخاص به، مستقلة عن نبضات القلب المستلم. وكان كميا تدفق الدم باستخدام نظام الموجات فوق الصوتية عالية التردد مع موجة دوبلر نابض. أظهرت تدفق عبر الصمام الرئوي إلى الأمام مزروع تدفق مع الحد الأدنى من قلس وكان تدفق الذروة ما يقرب من 100 ملم / ثانية. هذا نموذج الفئران من زرع صمام القلب هو HIGHLذ تنوعا، لذلك يمكن تعديلها وتكييفها لتوفير بيئات مختلفة الدورة الدموية و / أو يمكن استخدامها مع مختلف الفئران المعدلة وراثيا لدراسة تطوير neotissue في الأنسجة المهندسة صمام القلب.
Introduction
العيوب الخلقية القلب والأوعية الدموية هي واحدة من الأسباب الرئيسية لوفيات الرضع في العالم الغربي 1،2. من بينها، الرئوي تضيق صمام ضاحكة وعيوب الصمام الأبهري هي شكل تحدث في كثير من الأحيان 3. جراحة استبدال صمام القلب هو خيار روتينية من العمليات الجراحية الترميمية؛ ومع ذلك، بما في ذلك مضاعفات تضيق وتكلس في صمام القلب، والاعتماد على مضادات التخثر مدى الحياة هي مصدر كبير من اعتلال الصحة المزمن والموت 4-7. وعلاوة على ذلك، فإن الافتقار إلى إمكانات النمو يتطلب مراجعة العمليات الجراحية، والذي يزيد من وفيات هؤلاء المرضى الصغار 4،8،9.
في محاولة لتطوير صمام قلب بديل وظيفي مع إمكانات النمو، Shinoka وآخرون. خلايا ذاتي المصنف الصعود إلى تحلل صمامات القلب الاصطناعية 8. صمام الاصطناعية تحول إلى صمام القلب الأصلي مثل هيكل مع potenti النموآل. أظهرت الدراسات على الحيوانات الكبيرة الأولية جدوى استخدام هذه المنهجية لخلق صمام القلب وظيفية 10. ومع ذلك، أثبتت الدراسات زرع المدى الطويل الفقراء المتانة نظرا لسماكة التدريجي للneotissue صمام مما أدى إلى تضييق صمام القلب. العمل من Sodian يستخدم آخرون منهجية Shinoka، ولكن في نهاية المطاف استبدال PGA مصفوفة مع المطاط الصناعي القابلة للتحلل، والذي أعطى خصائص النشاط الحيوي للصمام هندسة الأنسجة يرسموا صورة أكثر الفسيولوجية 9،11،12. في الدراسة في الجسم الحي، على الرغم من نجاح الزرع، لم تشكل بطانة الخلايا البطانية متكدسة التي يمكن أن تحد من نجاح على المدى الطويل من هذه السقالة 12.
من أجل تصميم بعقلانية محسنة من الجيل الثاني صمام قلب اصطناعي، تم إنشاء نموذج الفئران من زرع صمام القلب للتحقيق في الآليات الخلوية والجزيئية underlyinتشكيل ز neotissue، صمام سماكة، والتنمية تضيق. نماذج الفئران تقدم مجموعة واسعة من الكواشف الجزيئية، بما في ذلك البذور المعدلة وراثيا، والتي لا تتوفر بسهولة في الأنواع الأخرى 7. في هذا القلب نموذج زرع صمام، تم تنفيذ بحكم فيفو مسانج استبدال صمام القلب الرئوي الأولى؛ ثم تم زرع قلب مع صمام القلب مزروع heterotopically في مجموعة مسانج باستخدام تقنية المجهرية. هذا النموذج يمكن استبدال صمام القلب من دون الحاجة لتغيير شرايين القلب.
في هذه الورقة، شرحا مفصلا للحصاد صمام القلب، الاستعدادات القلب المانحة، زرع صمام القلب، وزرع القلب منتبذ يوصف. أظهرت النتائج ضربات القلب المستمر من القلب المانحة، التي كانت مستقلة عن نبضات القلب المتلقي. وقد تم قياس تدفق الدم عبر الصمام الرئوي مزروع باستخدام نظام الموجات فوق الصوتية عالية التردد مع موجة نابض هلppler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
ملاحظة: تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية من قبل لجنة مستشفى المؤسسي رعاية الحيوان واستخدام البلاد للطفولة.
1. صمام القلب الرئوي الحصاد من صمام القلب المانحة ماوس
- الأوتوكلاف جميع الأدوات الجراحية قبل الجراحة: 1x أخرى مقص غرامة، وملقط الدقيقة 3X، والمشابك الأوعية الدموية الصغيرة 2X، 1X المشبك ملقط تطبيق، 1x أداة حامل الإبرة الصغيرة، مقص الربيع 1X، 1X ضام.
- ويستخدم 6-8 الاسبوع القديمة الإناث C57BL / 6 الماوس بوصفه الرئوي المانحة صمام القلب. إزالة الماوس من قفصه وتزن عليه، ثم الموت ببطء مع كوكتيل الكيتامين / زيلازين (الكيتامين، 200 ملغ / كغ وزيلازين، 20 مغ / كغ، IP) جرعة زائدة.
- مقطع منطقة الصدر ووضع الماوس في وضع رقود ظهري على وسادة. ثم جعل بضع الصدر. فضح القلب، وجعل قطع صغيرة على الأذين الأيمن، ويروي البطين الأيسر مع المياه المالحة الباردة الجليد.
- بصراحة تشريح الشريان الرئوي (السلطة الفلسطينية) من تصاعدي لأورتا. قطع صمام الرئوي (PV) جنبا إلى جنب مع 2 مم صفعة من الشريان الرئوي. التخلص من ما تبقى من القلب.
- تخزين الكهروضوئية في الهيبارين الباردة ومحلول ملحي (100 وحدة / مل). ملاحظة: PV يمكن أن تظل في حل لزرع قبل ساعتين إلى القلب المانحة.
2. إعداد القلب المانحة
- ويستخدم 6-8 الاسبوع القديمة الإناث C57BL / 6 الماوس بوصفه المانحة القلب. إزالة الماوس من قفصه وتزن عليه، ثم الموت ببطء مع كوكتيل الكيتامين / زيلازين (الكيتامين، 200 ملغ / كغ وزيلازين، 20 مغ / كغ، IP) جرعة زائدة. هذا هو إجراء المحطة.
- مقطع منطقة الصدر ووضع الماوس في وضع رقود ظهري على وسادة. ثم جعل بضع الصدر. بصراحة فصل القلب والوريد الأجوف السفلي (IVC)، متفوقة الوريد الأجوف (SVC)، الأبهر الصاعد، والسلطة الفلسطينية، والوريد الرئوي. يروي IVC مع الثلج الباردة ملحي معقم.
- Ligate في IVC، SVC، والوريد الرئوي مع الحرير 6-0 خياطة قطع ثم متفوقة علىالحروف المركبة.
- قطع الشريان الأورطي والسلطة الفلسطينية مع 2 مم الكفة.
- قطع الكهروضوئية والتصرف فيها.
3. زرع صمام القلب على القلب المانحة
- على الفور بعد الخطوة 2.5، وضع صمام القلب من الخطوة 1.5 إلى قلب المانحة وتوجيه صمام القلب.
- تأمين PV مع غرزة على الجانب الأيمن من صمام باستخدام 10-0 الغرز حيدة على الإبر مدبب والبدء في خياطة باستمرار مع 5-6 غرز من الجانب الآخر من PV.
- بعد الانتهاء من الجانب الأمامي، وتناوب على القلب أفقيا والبدء في خياطة الجانب الخلفي من PV على قلب المانحة.
- تخزين قلب في العقيمة الحل الهيبارين / المالحة الباردة. ملاحظة: يمكن الاحتفاظ القلب المانحة في حل لزرع قبل ساعتين على الماوس المتلقي.
4. زرع غيري مكاني القلب إلى مستلم ماوس
- تم استخدام 6-8 الاسبوع القديمة الإناث C57BL / 6 الماوس بوصفه RECIpient. إزالة الماوس من قفصه وتزن عليه، ثم تخدير مع كوكتيل الكيتامين / زيلازين (الكيتامين، 100 ملغ / كغ وزيلازين 10 ملغ / كلغ). يستخدم كيتوبروفين (5 ملغ / كلغ) كما مقدمات التخدير مسكن.
- بعد التحقق من مستوى التخدير عن طريق الذيل معسر، لقص الشعر في البطن والصدر. تليين العينين مع مرهم للعين معقمة، ووضع الماوس في وضع رقود ظهري على وسادة. تطهير البطن مع بتدين والكحول منصات. ثم تغطية الماوس مع ثنى العقيمة وفضح منطقة شق فقط.
- جعل خط الوسط شق البطن من تحت سيفي الشكل إلى منطقة فوق العانة، وإدراج ضام الاحتفاظ النفس. التفاف الأمعاء في المياه المالحة الشاش المبلل. تحدد بصراحة الشريان الأورطي infrarenal والوريد الأجوف.
- وضع اثنين من الغرز 6-0 الحرير قريب وبشكل أقصى حول الأبهر وIVC لكبح جماح الدورة الدموية.
- وضع القلب المانحة على الجانب الأيمن من الشريان الأورطي البطني وتغطية ذلك مع غاو العقيمةزي. ترطيب مع المياه المالحة.
- جعل بضع الأبهر في الشريان الأورطي البطني باستخدام إبرة G 30 وتمديد فتح مع مقص لحجم الشريان الأورطي المانحة.
- إجراء نهاية إلى جانب مفاغرة باستخدام الخيوط الجراحية المعقمة 10-0 حيدة على الإبر مدبب. تأمين الشريان الأورطي المانحة مع غرزة واحدة على نهاية القريبة من فتحة في الشريان الأورطي البطني والبدء في خياطة باستمرار مع 4-5 غرز من نهاية القاصية من الشريان الأورطي البطني.
- الوجه القلب إلى الجانب الأيسر، وتغطية ذلك مع الشاش غرست المالحة، والبدء في خياطة باستمرار مع 4-5 غرز من نهاية القاصية من الشريان الأورطي البطني.
- جعل فصد في IVC باستخدام إبرة 30 G وتوسيع الانفتاح على حجم الشريان الرئوي المانحة.
- إجراء مفاغرة نهاية إلى الجانب باستخدام العقيمة الغرز 10-0 حيدة على الإبر مدبب. تأمين المانحة للسلطة الفلسطينية مع غرزة واحدة على نهاية القريبة من فتحة في IVC والبدء في خياطة باستمرار مع 4-5 غرز منفي النهاية البعيدة من الوريد الأجوف السفلي. هذه المرة، لأن الشريان الأورطي هو في الطريق، تأكد من خياطة الجدار تبقى من السلطة الفلسطينية والمانحين في الداخل من IVC.
- مسح التجويف IVC مع الهيبارين ومحلول ملحي (100 وحدة / مل). إغلاق الحق جدار السلطة الفلسطينية المانحة والمتلقية IVC من قبل خياطة لهم بشكل مستمر لنهاية البعيدة.
- إزالة ربطة القاصي والسيطرة على النزيف من خلال تطبيق موضعي للامتصاص وكيل مرقئ العقيمة. عندما يتوقف النزيف تماما، وإزالة خياطة الداني والسيطرة على النزيف بنفس الطريقة.
- العودة الأمعاء وإغلاق الجهاز العضلي في البطن والجلد في طبقتين باستخدام مادة البولي أميد 6-0 سوداء خياطة حيدة.
- حقن 0.5 مل تحت الجلد المالحة ووضع الماوس في قفص الانتعاش على وسادة الاحترار حتى الماوس النقالة بشكل كامل. بعد شفائهم، والعودة الماوس لقفص جديد مع الفراش ورقة. إعطاء مسكنات للألم (ايبوبروفين، 30 مغ / كغ، ومياه الشرب) لمدة 48 ساعة. فعللن يعود الحيوان الذي خضع لعملية جراحية للشركة من الحيوانات الأخرى حتى تعافى تماما.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
ويوضح الشكل (1) والخطط للقلب صمام نموذج باستخدام زرع القلب زرع منتبذ. وكان حصاد صمام القلب من القلب المانحة وزرعها على القلب من الماوس المانحة الثاني. ثم تم زرع قلب مع صمام القلب الجديد في البطن من الماوس المتلقي. يبين الشكل 2 مثالا من قلب مزروع على مساحة البطن (A)، والحق بعد زرع القلب (B)، و 5 دقائق بعد الزرع. عند إزالة الغرز على كلا الجانبين من الشريان الأورطي وIVC، والقلب يبدأ في فوز 1-2 دقيقة في وقت لاحق ويصبح أكثر بينكر مع الدورة الدموية. لاحظ أن الأذين الأيمن هو أكثر المتوسعة في (C) من (B). القلب يدق تدريجيا أقوى ومستقرة بعد 24 ساعة.
وقد تم قياس تدفق الدم عبر الصمام الرئوي عن طريق الجلد المزروع بعد 10 يوما باستخدام زرعنظام الموجات فوق الصوتية عالية التردد مع وضع نابض دوبلر موجة (الشكل 3). مواقع الشريان الأورطي، البطين الأيمن (RV)، زرع الصمام الرئوي (PV)، وتبين الشريان الرئوي (السلطة الفلسطينية) في وضع B في الشكل 3 (A). يقع العينة الأصفر حجم تراكب على PV مزروع. الشكل 3 (ب) يبين رسم تخطيطي للتشريح وموقع تراكب حجم العينة. كما هو مبين في الشكل (3) (C)، تم الكشف عن موجة QRS القلب المانحة بشكل متوازن ومستقل لموجة قلب المتلقي. الانقباضي قياس حجم الدم الانبساطي وعلى PV مزروع يقابل موجة القلب المانحة. كانت ذروة سرعة حوالي 100 ملم / ثانية.
الشكل 1.60؛ تخطيطي للقلب زرع صمام كان حصادها صمام القلب الرئوي من الماوس المانحة الأولى وزرعها في القلب من الماوس المانحة الثاني. ثم تم زرع قلب مع صمام جديدة heterotopically في الماوس المتلقي.
الشكل 2. قلب المزروع. أ) رسم تخطيطي لقلب مع صمام القلب الجديد إلى الفضاء مزروع في البطن (B) مباشرة بعد الزرع، و (C) 5 دقائق بعد الزرع.
الرقم 3. قياس تدفق الدم في طmplanted الصمام الرئوي. A) B-وضع الصور التي تشير إلى مواقع الشريان الأورطي، البطين الأيمن (RV)، صمام الرئوي مزروع (PV) والشريان الرئوي (السلطة الفلسطينية). ب) رسم تخطيطي للتشريح وموقع التراكب حجم العينة. C) قياس السرعة في PV مزروع مع ECG الموجة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
معدل وفيات من هذا الإجراء هو ما يقرب من 20٪، والذي يعود في الغالب من قبل نزف في موقع زرع PV مفاغرة وعلى الشريان الأورطي المانحة إلى الشريان الأورطي البطني المتلقي. في معظم الحالات، يقلل من معدل وفيات بشكل ملحوظ بعد الجراحة 48 ساعة. وأظهرت الفئران بقاء دقات القلب قوية وتدفق الدم من خلال PV مزروع. العملية برمتها تستغرق أربع ساعات للجراح الصغيرة من ذوي الخبرة. سوف يستغرق ما يقرب من 250 الفئران لإتقان هذه التقنية. زرع قلب منتبذ هو مستقيم إلى الأمام نسبيا بالمقارنة مع زرع PV إلى القلب المانحة. واحدة من أهم الخطوات الحاسمة لزرع HV الناجح هو حصاد بنية PV من الماوس المانحة. وينبغي مقطوع هيكل PV حوالي 1-2 ملم تحت صمام. إذا كانت الأنسجة المتبقية قصيرة جدا، سوف مفاغرة أن يكون تحديا. إذا كانت الأنسجة تحت PV طويل جدا (مثال. فإن السلطة الفلسطينية تكون طويلة جدا بالمقارنة مع الارتفاعجي الشريان الأورطي بعد الزرع)، يجوز للسلطة الفلسطينية مزروع تحريف أو شبك. خطوة حاسمة أخرى هي مفاغرة بين السلطة الفلسطينية وزرعها المتلقي IVC. منذ IVC رقيقة جدا، فمن السهل للغاية لالمسيل للدموع أثناء خياطة.
في هذا النموذج، ويأتي الدم الأورطي عن طريق الشريان الأورطي، يتدفق عبر الشرايين التاجية، ثم يخرج عن طريق الجيب التاجي إلى RA المانحة. وبالتالي فإن حجم الدم بالمرور عبر PV مزروع هو 5٪ من حجم الدم الكلي في التقدير، والذي هو قيد أهم من هذا النموذج في دراسة TEHV. لزيادة تدفق الدم على الرغم من أن PV، تم إنشاء ثلاثة نماذج إضافية. أولا، تم إنشاء مفاغرة الثالث من RV المانحة للمتلقي IVC. مفاغرة الثالث يمكن أن تزيد من تدفق الدم بنسبة 10٪ إلى 50٪ من إجمالي حجم الدم. الثانية، لزيادة تدفق الدم، وبعد وضع مفاغرة الثالث، كان ligated في IVC الأقرب إلى مفاغرة الثالث. هذا الأسلوب المؤمن 50٪ من تدفق الدم من خلالPV مزروع. الثالث، من أجل زيادة تدفق من خلال PV مزروع والحفاظ على الدورة الدموية أكثر الفسيولوجية، وزرع القلب مع الرئتين. هذا الأسلوب يمكن أن يزيد من تدفق ما يصل الى 50٪ من إجمالي تدفق الدم والأهم من ذلك، البطين الأيسر والأذين الأيسر الحفاظ على تعميمها. هذه نماذج مختلفة تدفق الفسيولوجية تمكننا من دراسة كيفية الاختلاف في الظروف الفسيولوجية تدفق تؤثر على تطور neotissue وتضيق في صمام القلب المزروع.
في الآونة الأخيرة، أجرينا دراسة تجريبية لزرع decellularized HV دون بذر الخلية باستخدام التقنية المذكورة في هذه الورقة. أظهرت PV مزروع خصائص تدفق الدم مماثلة كما في السيطرة، predecellularized PV المزروعة. في المستقبل، سوف يكون المصنف أنواع مختلفة من الخلايا لدراسة تشكيل neotissue والتنمية تضيق من HV المزروعة. وعلاوة على ذلك، وذلك باستخدام الفئران المعدلة وراثيا، مثل البروتين الفلوري الأخضر (GFP) الفئران أو مذكرة التفاهمحد ذاتها نموذجا للمرض HV، يمكن دراسة عملية تشكيل neotissue ميكانيكيا من خلال دراسة مصدر الخلايا ملء صمام القلب decellularized أو المريضة باستخدام المناعية، والتي سوف تساعد على تطوير تصميم أكثر عقلانية، الجيل الثاني الأنسجة المهندسة وصمامات القلب. إمكانية استخدام مختلف الظروف الفسيولوجية تدفق، الفئران المعدلة وراثيا، زرع PV decellularized، والتركيبات الممكنة من كل ثلاثة تظهر براعة وفائدة قبل السريرية المهمة المحتملة لهذا النموذج زرع HV.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ليس لدينا شيء في الكشف عنها.
Acknowledgments
وأيد هذا العمل في جزء منها عن طريق منحة من المعاهد الوطنية للصحة (RO1 HL098228) لCKB.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| DPBS | Gibco | 14190-144 | |
| Microscope | Leica | M80 | |
| C57BL/6J (H-2b), Female | Jackson Laboratories | 664 | 8-12 weeks |
| Ketamine Hydrochloride Injection | Hospira Inc. | NDC 0409-2053 | |
| Xylazine Sterile Solution | Akorn Inc. | NADA# 139-236 | |
| Ketoprofen | Fort Dodge Animal Health | NDC 0856-4396-01 | |
| Ibuprofen | PrecisionDose | NDC 68094-494-59 | |
| Heparin Sodium | Sagent Pharmaceticals | NDC 25021-400 | |
| Saline solution (Sterile 0.9% sodium chloride) | Hospira Inc. | NDC 0409-0138-22 | |
| 0.9% Sodium chloride Injection | Hospira Inc. | NDC 0409-4888-10 | |
| Petrolatum Ophthalmic Ointment | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Iodine Prep Pads | Triad Disposables, Inc. | NDC 50730-3201-1 | |
| Alcohol Prep Pads | McKesson Corp. | NDC 68599-5805-1 | |
| Cotton tipped applicators | Fisher Sientific | 23-400-118 | |
| Fine Scissor | FST | 14028-10 | |
| Micro-Adson Forcep | FST | 11018-12 | |
| Clamp Applying Forcep | FST | 00072-14 | |
| S&T Vascular Clamp | FST | 00396-01 | |
| Spring Scissors | FST | 15008-08 | |
| Colibri Retractors | FST | 17000-04 | |
| Dumont #5 Forcep | FST | 11251-20 | |
| Dumont #7 - Fine Forceps | FST | 11274-20 | |
| Dumont #5/45 Forceps | FST | 11251-35 | |
| Tish Needle Holder/Forceps | Micrins | MI1540 | |
| Black Polyamide Monofilament Suture, 10-0 | AROSurgical Instruments Corporation | TI638402 | For sutureing the graft |
| Black Polyamide Monofilament Suture, 6-0 | AROSurgical Instruments | SN-1956 | For musculature and skin closure |
| Non Woven Sponges | McKesson Corp. | 94442000 | |
| Absorbable hemostat | Ethicon | 1961 | |
| 1 ml Syringe | BD | 309659 | |
| 3 ml Syringe | BD | 309657 | |
| 10 ml Syringe | BD | 309604 | |
| 18 G 1 1/2 in, Needle | BD | 305190 | |
| 25 G 1 in., Needle | BD | 305125 | |
| 30 G 1 in., Needle | BD | 305106 | |
| Warm Water Recircultor | Gaymar | TP-700 | |
| Warming Pad | Gaymar | TP-22G | |
| Trimmer | Wahl | 9854-500 | |
| VEVO2100 High Frequency Ultrasound | VisualSonics | http://www.visualsonics.com/vevo2100 | The catalog number and pricing can be acquired from the sales representatives. |
| Ultrasound transmission gel | Parker Laboratories, INC. |
01-02 | |
| Table Top Laboratory Animal Anesthesia System | VetEquip, INC. | 901806 | |
| Isoflurane | Baxter | 1001936060 |
References
- Polito, A., et al. Increased morbidity and mortality in very preterm VLBW infants with congenital heart disease. Intens Care Med. 39, 1104-1112 (2013).
- Wren, C., Reinhardt, Z., Khawaja, K. Twenty year trends in diagnosis of life threatening neonatal cardiovascular malformations. Arch Dis Child Fetal. 93, F33-F35 (2008).
- Vacanti, J. P. Beyond transplantation Third annual Samuel Jason Mixter lecture. Archives of surgery. 123, Chicago Ill. 545-549 (1960).
- Tudorache, I., et al. Orthotopic replacement of aortic heart valves with tissue-engineered grafts. Tissue engineering Part A. 19, 1686-1694 (2013).
- van Geldorp, M. W., et al. Patient outcome after aortic valve replacement with a mechanical or biological prosthesis weighing lifetime anticoagulant related event risk against reoperation risk. The Journal of thoracic and cardiovascular surgery. 137, 881-886 (2009).
- El Oakley, R., Kleine, P., Bach, D. S. Choice of prosthetic heart valve in today's practice. Circulation. 117, 253-256 (2008).
- Quinn, R. W. Animal Models for Bench to Bedside Translation of Regenerative Cardiac Constructs. Progress in Pediatric cardiology. 35, (2013).
- Shinoka, T., et al. Tissue engineering heart valves valve leaflet replacement study in a lamb model. The Annals of thoracic surgery. 60, S513-S516 (1995).
- Sodian, R., et al. Tissue engineering of heart valves in vitro experiences. The Annals of thoracic surgery. 70, 140-144 (2000).
- Shinoka, T., et al. Tissue engineered heart valves. Autologous valve leaflet replacement study in a lamb model. Circulation. 94, II164-II168 (1996).
- Sodian, R., et al. Evaluation of biodegradable three dimensional matrices for tissue engineering of heart valves. ASAIO journal (American Society for Artificial Internal Organs. 46, 107-110 (1992).
- Sodian, R., et al. Early in vivo experience with tissue-engineered trileaflet heart valves). Circulation. 102, III22-III29 (2000).
