Die exklusive Kombination aus hohem optischem Kontrast und hervorragender räumlicher Auflösung macht die Optoakustik (Photoakustik) ideal, um gleichzeitig anatomischen, funktionellen und molekularen Kontrast in tiefen, optisch undurchsichtigen Geweben zu erzielen. Während in jüngster Zeit ein enormes Potenzial bei der Anwendung der Optoakustik für die Kleintierforschung gezeigt wurde, wurden auch enorme Anstrengungen unternommen, um diese Bildgebungstechnologie in die klinische Praxis zu übertragen. Wir stellen hier einen neu entwickelten optoakustischen Tomographie-Ansatz vor, der in der Lage ist, hochauflösende und spektral angereicherte volumetrische Bilder der Gewebemorphologie und -funktion in Echtzeit zu liefern. Es wird eine detaillierte Beschreibung des experimentellen Protokolls für den Betrieb mit dem Bildgebungssystem sowohl im Handheld- als auch im stationären Modus bereitgestellt und für verschiedene potenzielle Szenarien mit funktionellen und molekularen Studien in Mausmodellen und beim Menschen vorgestellt. Die Möglichkeit der Echtzeit-Visualisierung in drei Dimensionen sowie das vielseitige Handheld-Design der bildgebenden Sonde machen den neu entwickelten Ansatz einzigartig im Pantheon der Bildgebungsmodalitäten, die in der heutigen präklinischen Forschung und klinischen Praxis verwendet werden.