Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Fare kaburga Rezeksiyonu için Cerrahi Prosedür: Büyük Ölçekli Uzun Kemik Onarım İçin Bir Model

Published: January 21, 2015 doi: 10.3791/52375
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1, 1
1Eli and Edythe Broad Center for Regenerative Medicine and Stem Cell Research, Keck School of Medicine, University of Southern California
* These authors contributed equally

Abstract

Bu protokol fare kaburga kullanan büyük ölçekli kemik onarımı için yeni bir model için araştırmacılar tanıttı. , çevredeki interkostal kaslar istenen kaburga açığa göğüs vücut duvarı açılış pnömotoraks neden olmadan kaburga istenilen bölümünü eksize ve kesi kapatılması, ameliyat için hayvan hazırlanması: prosedürü takip ayrıntıları. Apendiküler iskelet kemikleri ile karşılaştırıldığında, kaburga son derece erişilebilir. Komşu kirişleri doğal şekilde sabitlenmesini temin Ek olarak, herhangi bir dahili veya harici bir fiksatör gereklidir. cerrahi, piyasada mevcut kaynakları kullanır öğrenmek için basit ve hayvan tarafından iyi tolere edilir. işlem ile veya çevresindeki periost çıkarmadan gerçekleştirilir ve bu nedenle onarım Perioste- katkısı değerlendirilebilir. 2 ay - Sonuçlar periost kalınırsa, sağlam onarımı 1 oluştuğunu göstermektedir. Yapacaklarımız Bu protokol kullanımının bekliyoruzkaburga onarım içine araştırmaları teşvik ve bulgular vücudun etrafında diğer yerlerde kemik onarımı teşvik için yeni yollar geliştirilmesini kolaylaştıracak olacak.

Introduction

Iskelet yaralanma, kronik osteoartrit zayıflatıcı ve rekonstrüktif cerrahi ile ilgili ciddi sorunlar, ekonomik verimliliği, aile refahı ve yaşam kalitesini etkileyebilir. Küçük molalar ve lezyonlar oldukça iyi iyileşmek mümkün olmakla birlikte, insanlar yapısını ve fonksiyonunu geri rekonstrüktif prosedürleri güvenmek gerekir, bu nedenle büyük kusurları tamir ve yeteneğine sahip değildir. İmar allojeneik veya Heterojenik greft, morcellized kemik, implante iskeleleri, ya da distraksiyon osteogenezisi içerebilir. Ne yazık ki, sadece bu tedaviler ancak tamir kemiğin orijinal gücü nadiren ulaşılır ile ilişkili inatçı morbidite faktörler vardır. Böylece, yeni klinik yaklaşımlara ihtiyaç vardır.

Segmental kusurları tedavi etmek için yenilikçi yöntemler geliştirmek Tek yönlü büyük ölçekli onarım doğal olarak oluştuğu durumları incelemektir. Memeliler th sınırlı olarak kabul edilir ise Amfibi ünlü, iskelet elemanları yeniden olabiliryeteneğidir. Ancak, 20. yüzyılın başlarında bu yana, insan kaburga rejenerasyon birkaç rapor insanlar öylesine 1-4 sınırlı değildir düşündürmektedir yayınlanmıştır. Şu anda bu olay iyi çene, yüz ve kulak rekonstrüksiyonu için kaburga malzeme kullanımı, plastik cerrahlar tarafından bilinir, ama daha geniş 5 takdir edilmez. Daha ayrıntılı olarak bu onarım incelemek için, biz fareyi kullanarak bir cerrahi modeli geliştirdik. Bu protokolü kullanarak, araştırmacılar ilgili doğuştan faktörleri belirlemek ve diğer yerlerde iskelet şifa kolaylaştırmak için bu bilgileri kullanabilirsiniz.

Iskelet onarım çalışmaları için bir model olarak kaburga kullanmanın birçok avantajı vardır. (Femur 6,7 rezeksiyonu kıyasla) İlk olarak, çevreleyen kaburgalar doğal fiksatör sağlar. Bu iç ve dış fiksatör morbidite riskini azaltır ve cerrahi prosedürü kolaylaştırır. Göğüs wa İkincisi, ince kas tabakalarıkolay erişim ve kalvaryal rezeksiyon- 8 kolaylık tahlil karşılaştırılabilir hale mükemmel bir görüş sağlamak ll. Üçüncüsü, intramembranöz kemikleşme, endokondral kemikleşme ile kaburga formu oluşması ve merkezi bir diafiz iki ucunda bulunan büyüme plaklarının de uzatma yoluyla boyu büyüdükçe kafataslarından aksine. Bu nedenle, kaburga tamir apendiküler iskeletin uzun kemiklerin onarımı daha karşılaştırılabilir olabilir. Ayrıca, femur göre, kaburga periost kalındır ve daha kolay bir şekilde manipüle edilebilir olduğunu bulmuşlardır. Böylece, periost okuyan veya hücre tedavileri, farmakolojik ajanlar test ve / veya doku iskelelerinin amacıyla kemik onarımı tahlil etmek isteyen araştırmacılar, bu cerrahi modeli yararlı bulabilirsiniz. Özet olarak, bu yiv rezeksiyon modeli yaygın olarak kullanılan bu tür bir model halen var olduğu memelilerde doğal büyük ölçekli kemik onarım çalışma içinde bir ortam sağlar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

NOT: Tüm işlemler Southern California Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış bir hayvan protokolüne uygun bulunmaktadır.

Cerrahi için 1. Hazırlık

  1. Gerekli cerrahi aletleri ve malzemeleri yerleştirin (1 öğe sterilize - Malzeme listesinde 18) ve bir mikroskop ve bir başlık ya da bir aşağı doğru masaya bir fiber optik trans-aydınlatıcı düzenlemek.
  2. Anestezi ikna etmek için% 4 izofluran ile bir indüksiyon odasında (3 aylık - - 30 gr, 1 20) cinsel olgun fare yerleştirin.
  3. Bir pençe ve / veya kuyruk tutam testi ile anestezi onaylayın.
  4. Ameliyat sırasında göz kuruluğu önlemek için farenin gözlerine merhem sürün.
  5. Mikroskop sahneye fareyi hareket ettirin. Bakım hortum burun konisi içine fare koyun ve yanal yerleştirin. Vücut ısısını korumak amacıyla bir hayvana bitişik ısıtıcı bir torba sağlar.
    DEĞİLE:. Fare Pozisyon kişisel tercihi ve / veya cerrahın ellilik bağlıdır, sol veya sağ ya da yan gayet iyi.
  6. Bakım için% 3, ve solunum hızı izle - 2 izofluran ayarlayın.
  7. Bir 25 G iğne ile ameliyat sonrası ağrı için buprenorfın (0.05mg / kg) deri altından (bacağın lateral yan) enjekte edilir. bacak normal bir tepki olduğu seğirme olabilir.

2. Açılış Kesi

  1. Palpasyonla istenen kaburga Algılama ve tıraş ile saç alanını temizleyin.
    NOT: kaburga 1-7 akciğerlere yakın ve 11-13 oldukça kısa olduğundan kaburga 8-10 tavsiye edilir. Kaburga Sayma 1 numara olarak en rostral kaburga ile başlamalıdır.
  2. (3x genellikle hayvan kullanım protokolleri tarafından tavsiye edilir), povidon-iyot ve izopropanol (% 70) sürüntü alternatif alanı hazırlayın.
  3. Doğrudan yukarıda, deri yoluyla 2 cm kesi kesin ve orta ölçekli mikrocerrahi makas ile istenilen kaburga paralel. INCISaltta yatan kas ve yağ katmanları aracılığıyla e.
  4. Kesi boyutu en aza indirirken, cerrahi alan ortaya çıkarmak için bir sarıcıya 3 katmanları (deri, kas, yağ) yerleştirin.

3. kaburga eksize

  1. Bir 5,0 mm neşter ile kaburga istenilen bölümünü örten interkostal kaslar kesti. Kaburga gibi son derece kavisli olmadığı bu gibi chondrocostal eklem pozisyon 5 mm proksimal etrafında bu kesi olduğunu. Dikkatle ince uçlu forseps ile kemik kas ayrı.
  2. Hayvanda periost koruyarak bir reseksiyona oluşturmak için, bir 5.0 mm bir bisturi ile şeridin uzunluğu boyunca, periost kesilmiştir. Dikkatle ince uçlu forseps ile yanal altta yatan kemik periost ayrı. Periost çok hassas ve bir jelatinimsi kıvama sahip olduğu, dikkatli devam.
  3. Sonraki ince mikro-makas ile bir ucunda kemik yoluyla bir kesitini yapmak. Gerekirse, ile rezeksiyon ölçmekmikroskop veya cetvel türü göstergesi bir reticle. Sonra dikkatlice periost dışarı kemik kaldırın ve diğer ucunu kesti.
    NOT: Dikkatli devam edin. Bu plevral membran gözyaşı ve bir pnömotoraks neden aşağıda kaburga eksize olmadan yukarı çekerek gibi en hassas adımdır. Plevra zarı yırtılmış ise göğüs boşluğunun iç görünür hale gelecektir bu kolaylıkla belli olacak.
  4. Kanamayı durdurmak için 5 sn - kanama kemik kesme sonucu oluşursa, 4 için pamuk uçlu çubuk ile kesik sonunda basınç uygulayın.
    NOT: Nadiren kanama devam ettiğini, bunu durdurmak ve hayvana kurtarma tehlikeye gibi önemli kan kaybı euthanize gerekli olabilir (sıvı replasmanı olmadan, güvenle kaybolabilir maksimum kan hacmi, toplam kan hacminin% 10 ya da 7,7 -.) 200 ul 9 - 8 ul / g, 25 g bir fare için, bu yaklaşık 180 ile eşdeğerdir.
  5. Hemen içine kaldırıldı kaburga yerleştirinGelecekteki analiz için% 4 PFA.
    NOT: kemik ve periost hem rezeksiyonu yapılacak ise, periost kesi ve ayrılık (adım 3.2) ihmal. Periost çok sıkı plevral zara bağlı olduğundan yırtılmasını önlemek için forseps ile uzak plevral membran kaburga alay, dikkatli devam.

4. kesi Kapanış

  1. 9-0 sütür (2 sütür genellikle yeterlidir) ile kalan periost kovanın üstünden interkostal kasları sütür. Cerrahi konumu göstergeleri olarak hareket etmek, doğrudan kaburga kesim uçları yukarıda sütür yerleştirin.
  2. Ekartörünü çıkarın. (- 4 sütür genellikle yeterli 3) 9-0 sütür ile örten kas ve yağ sütür. Kas ve / veya yağ, özellikle kalın tabakalar farelerde, her biri ayrı ayrı bir tabaka dikiş (örneğin, kas tabaka için dikiş 1 tabakasının yağ tabakası için dikiş 1 kat).
  3. Kapat(- 5 sütür genellikle yeterlidir 4) 7-0 dikiş ile cilt.
  4. Büyük forseps ile birlikte kenarları kısma, dikiş yapıştırıcı ile kesi sabitleyin.
  5. Yavaş yavaş ilk birkaç dakika için% 1 ayarlayarak kapalı izofluran fare vazgeçirmek ve sonra kapatın.
  6. Bir ısı lambası altında fare yerleştirin ve bilinç, 5 sağlanıncaya kadar bırakın - 10 dakika. Bilinç kazanmış sonra ve iyileşme dönemi boyunca, fare taşımak ve normal ambulate ve sıkıntı emaresi göstermelidir.

5. Kurtarma ve Analiz

  1. 0.5 mg bir oral jelatin formunda, buprenorfinin uygulama da dahil olmak üzere ameliyat sonrası ağrı idaresi sağlamak / 48 saat süre ile, her 12 saat kg. Oral uygulama göğüs bölgesinde ağrıya neden olabilir hayvan frenleyici gerektirmez.
  2. Iyileşme döneminde yiyecek ve su ücretsiz erişim ile bir kafes içinde fare koruyun. Kesik kuruduktan sonra, kadın hayvanlar erkek ise birlikte muhafaza edilebilirs mücadele önlemek için izole kalmalıdır.
  3. Iyileşme döneminden sonra, ötenazi onaylanmış prosedürü uygulayın. Tespit ve analiz için göğüs kafesini çıkarın.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Hayvanlar genellikle kesi iyi iyileşir, bu prosedürün hızla kurtarmak, ve hayvanlar normal davranış sergilerler. Prosedür piyasada mevcut kaynakları kullanır ve uygulama sonrasında, 1 saat altında tamamlanabilir. Deneysel verileri oluşturmak için bu prosedürü kullanmadan önce, herhangi bir büyük kemik parçaları rezeksiyon bölgesi içinde kalabilir olmadığını belirlemek için günlük 0 zaman noktasında rezeksiyon analiz etmek önemlidir. Bu genellikle özel radyasyon güvenlik onayları gerektirir rağmen düzgün prosedürü değerlendirmek için bir yolu, ameliyat sonrası X-ray veya MikroBT'lerin görüntüleme ile hayvanları değerlendirmek için. Bunun yerine, başka bir basit değerlendirme Şekil 1A'da gösterildiği gibi, bir iskelet boyama hareket edilerek tamamlanabilir. Bu EtOH içinde sabitleme, göğüs kafesi toplama içerir ve alizarin kırmızı boyama standart bir protokol kullanarak 11. Bu tha böylece (yumuşak dokuları uzak sindirmek için kullanılan) potasyum hidroksit atlamak için yararlı olabilireğer istenirse örnek t yine histolojik analiz için daha sonra kullanılabilir. Numune hala örten vücut duvarı kas tabakası ince olduğundan% 80 gliserol temizleyerek potasyum hidroksit adımlar olmadan görüntülenebilir. Burada gösterilen (Şekil 1A) gibi ya da alternatif olarak, bu kaslar sabitleme / lekelenmeye karşı elle önce çıkarılabilir.

çıkarılan kemik kısmı, aynı zamanda analiz edilebilir. Hedef hayvanda periost korumak için ise ışık mikroskobu ve histolojik analiz (Şekil 1B, B ') ile gösterildiği gibi, kemik kısmı, pürüzsüz bir yüzeye sahip olmalıdır. Belirgin bir düzensiz bir yüzeye ve histolojik inceleme üzerine olmalıdır periost uzaklaştırıldı bir kemik bölümü, yoğun bir düzensiz bağ doku (Şekil 1C, C ') olarak özelliklere sahip bir sağlam üstteki periost tabakaya sahiptir.

Deneyin amacı bağlı olarak, şifa olabilirFarklı zaman noktalarında değerlendirildi. 2 ay - Gözlemler periost hayvanda tutulduğu 3 mm rezeksiyon tipik haliyle 1 olan tamamen iyileşmesi göstermektedir. Tadilat, yumuşak ve sert yara oluşumu ve yeniden aracılığıyla gerçekleşir. 2 ay sonra tamamen tamir bir örneği, Şekil 2A, bir 'de gösterilmiştir; Onarım iskelet hazırlanması (Şekil 2A) ve histolojik analiz (Şekil 2A ') ile tespit edilebilir. Periost da çıkarılırsa, rezeksiyon boşluk doldurulmuştur hiç. Şekil 2B, bir onarım bir ucunda meydana gelmiş olduğu bir örneği göstermektedir, ancak kör uçlar gözlemlemek daha tipiktir. Histolojik Analiz yapıldığında, rezeksiyon bölgesi yağ, granülasyon dokusu ve kas (Şekil 2B ') ile doldurulur.

Şekil 1,
(A) Illustration de rezeksiyon Şekil 1. Örnek görüntüler. Hiçbir kemik parçaları geride. Örnek ve% 80 gliserol içinde temizlenir (gelecekteki histolojik analiz için numune korumak için potasyum hidroksit ile herhangi bir adım, bir standart protokol kullanılarak, ancak çıkarılır) alizarin kırmızı ile boyandı. Ok uçları kesilmiş uçların yerini göstermektedir. Ekli periost olmadan (A) tasvir kaburga kafesinin (B) Kaldırılan kaburga kısmı. Ve (B ') histolojik bölüm kemiğe bağlı olan küçük periost (sarı ok uçları, sol) ve sağ için bir periost (kesiti, hematoksilin ve eosin ile boyanmış) yok. Sarı Yıldız kemik iliği boşluğu gösterir. Fare kaburga geniş trabekülleri yoktur. (C) periost gösteren kaldırıldı kaburga kısmı hala takılı. (C ') histolojik bölüm shoKanat san bir braket (boyuna kesit, hematoksilin ve eosin ile boyanmış) ile belirtilen kemik üzerinde intakt periost. Sarı bir yıldız kemik iliği boşluğu gösterir. Ölçek çubukları: A, B, C, = 1 mm; B ', C' = 100 mikron. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 2,
Ve periost olmadan rezeksiyonlarda Şekil 2. Kaburga onarım sonrası iyileşme. (Şekil 1A 'da olduğu gibi hazırlandı) fare içinde sağlam periost tutma, (A) rezeksiyonu iyileşme ~ 2 ay sonra, iskelet preparasyon. Bölgenin komple tamir görülebilir. (A ') lameller kemik duvarlar ve bir restorasyon gösteren B histolojik bölümKemik iliği boşluğu (hematoksilen ve eozin). (B) İskelet hazırlık (alizarin kırmızısı), bir kaburga kısmı ve çevreleyen periost hem çıkardıktan sonra iyileşme ~ 3 ay takip. Panelin solda gösterilen kesik sonunda sadece asgari onarım vardı. Chondrocostal eklemin sarı ok ucu noktaları. (B ') B gösteren granülasyon dokusu, yağ dokusu, ve rezeksiyon (hematoksilen ve eozin) yerinde dolum kas hücrelerinin histolojik kesit. Ölçek çubukları: A, B = 1 mm; B '= 500 mikron; C '= 200 mikron. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Önce bu protokolü öğrenirken, nerede zor olabilir başlangıç ​​kesi yerini belirlerken. Ancak, ötenazi fareler üzerinde uygulama cerrah ilk kesi yerleştirin ve rezeke istenen kaburga maruz nerede öğrenmenize yardımcı olur. Kadavra üzerinde çalışmak aynı zamanda veya periost olmadan kaburga kısmını kaldırmak için gerekli ince motor becerilerini geliştirir. Ayrıca, bu prosedüre yeni biri ince araçlar ve ince sütür manipüle zor bulabilir. Off bağlama sırasında, aşırı sütür çekerek dokuları gözyaşı. Böylece, kadavra üzerinde de bazı pratik dikiş yardımcı olabilir. Cerrah kemirgenler ile cerrahi prosedürlere yeni Nihayet, eğer başka bir kişi ilk birkaç ameliyatları sırasında izleme ve anestezi ayarlayarak yardımcı olması yararlı olabilir.

Bu protokolün en önemli adım, plevra spa (bir pnömotoraks neden olmadan hava anormal koleksiyon kemik eksize edilirplevra zarı cerrahi kapatmak için çok ince olduğundan zor ce), fare tedavi. kaburga aşağı kas ve paryetal plevra tabakası çok ince ve hassas; dolayısıyla, kesin hareketler rezeksiyon alanı altında yatan plevra zarında bir delik önlemek için gereklidir. Bu adımlar 3.1 ve 3.3 en sık görülür. Nokta yüzeysel tutulması değilse adım 3.1 (çevreleyen interkostal kaslar kemiği ayıran) olarak, keskin neşter ve forseps kolayca plevral tabakasını delip olacaktır. Aşama 3.3 (ince mikro makas ile kemik kesilmesi) plevral membran gerilme mukavemeti, ya da kemik kırılma harekete üstesinden gelebilir kemik altındaki makas yerleştirme delikli kemik fragmanının son neden olabilir plevra membran. Biz kavisli ucu faydalıdır sahip ince mikro-makas kullanarak bulduk. Buna ek olarak, yukarıdaki gibi, aynı zamanda Öldürülen farelerin üstünde protokol ilk uygulama için yararlı olabilir. Ultik, ancak bu sorun kolayca sabır ve uygulama ile aşılabilir bulmuşlardır.

Kaburga bir endokondral kemik olmasına rağmen, kaburga iskelet ve apendiküler iskeletin uzun kemiklerin arasında bazı potansiyel olarak önemli farklılıklar olabilir. Bir embriyolojik açıdan bakıldığında, kaburga iskeleti apendiküler iskelet (yanal plaka mezoderm) 12 farklı mezodermal bölmesi (somite) türetilmiştir. Böylece gelişim tarihinin bu farkı yansıtmak kaburga iskelet atalarıdır özgü özellikleri vardır ki mümkündür. Bu nedenle, uzun vadede, bu benzersiz özellikleri nelerdir belirlemek ve daha sonra kaburga görüldüğü gibi aynı tesisi ile onarım arabuluculuk bacak iskeletinde atalarıdır teşvik etmek, bu bilgiyi kullanmak gerekli olabilir.

Devreye girer başka bir yönü, solunum sistemi ile ilgili nervür konumu ile ilgilidir. Alyan kaburga hiçbir eksternal fiksatör gerekli şekilde rezeksiyon çevresinde yeterli istikrar sağlamak olsa, onarım bölgesi akciğer enflasyon / deflasyon sürekli hareket ve baskı altında olduğunu. Bazı hareketi kıkırdak ara 13,14 üretilmesi için önemli olduğu görünürken, kemik onarım sırasında çok fazla hareket iyileşmesi için engelleyici faktörler olabilirler kabul edilmiştir. Bu noktada, ancak ara ürün, bir kıkırdak oluşumu etkin bir büyük ölçekli onarımı için önemli bir aşama olabilir, bu mümkündür, açık değildir. (Periost hayvan geride kaldığında) Böylece, solunum sırasında kaburga hareketi onarım kolaylaştırabilir. Hareketi bu bağlamda özellikle önemli olabilir çünkü, ileride onarım biyomekanik etkileri çalışmak için yararlı olabilecek bir fiksatör yerleştirmek için bir yöntem geliştirilmesi.

Fare kaburga onarım tahlil yaparak, bir deve olmuştur güçlü bir genetik araçlar yararlanabilirsinizloped. Örneğin, transgenik işaretleri kullanılarak onarım hücreleri kökenli değerlendirilebilir. Kemik oluşumu (ilginç yeni araçlar geliştirme Gazit ark. 15,16 itibaren), endochondral süreci ve önemli sinyal iletim yollarının okuma-out için transgenik gazetecilere 12,17 kullanılabilir. Buna ek olarak, zarar fonksiyon-alleli taşıyan fareler gerekli sinyal yollarını belirlemek için kullanılabilir. Şu anda, başka bir omurgalı bir model organizma, bu sürecin, altta yatan temel biyoloji prob genetik teknikler gibi çok çeşitli sağlar.

Iskelet tamiri için diğer mükemmel modeller geliştirilmiştir ve bir süre kullanımda olmuştur Buna ek olarak, başka bir bağlam yararlı olabilir kaburga onarım özellikleri dikkate iskeleleri, bileşikler ve hücre tedavileri test etmek. Kaburga vücudu ve onarım desteklemek için gerekli değildir gibi standart bir kaburga onarım modelinin kurulması mevcut modellerini tamamlarstabilizasyon olmadan gerçekleşir. Buna ek olarak, onarım Perioste- katkısı kolaylıkla değerlendirilebilir. Kaburga kıkırdak ve kemik segmentleri hem çünkü Futhermore, bu farklı ama ilişkili doku tiplerinin iyileşmesi arasındaki karşılaştırmalar etkili onarım 18 ortak özelliği tespit edebilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medium sized micro-dissection scissors (Vannas-Tübingen Spring Scissors 5 mm) Fine Science Tools 15003-08
Fine micro-dissection scissors (Vannas Spring Scissors - 2mm Cutting Edge) Fine Science Tools 15000-04 curved tip is beneficial
Micro-scalpel 5.0 mm Fine Science Tools 10315-12 other fine scalpels can be substituted
Dumont 55 forceps Fine Science Tools 11295-51
Retractor  Fine Science Tools 17004-05 adjustability is convenient
Micro-needle holders Fine Science Tools 12060-01
9.0 nylon sutures (Ethilon), taper point best Ethicon 2819G or similar taper point best but reverse cutting is also good
7.0 prolene sutures (Prolene) Ethicon 8700H or similar 6-0 can be used too, needle point can vary
Large forceps (Adson Forceps) Fine Science Tools 11006-12 other brands are fine
Lubricant Eye Ointment (Akwa Tears) Akorn 17478-062-35
Suture glue (GLUture Topical Tissue Adhesive) Abbot 32046-01 has excellent working time
Shaver Wahl 9918-6171 or similar
Clamp lamp Zoo Med LF-5
Infrared Bulb, 75W Zoo Med RS-75
RC2 Rodent Anesthesia System VetEquip  922100
IsoFlo (Isoflurane) Abbot 05260-05
Buprenorphine (Buprenex) Reckitt Benckiser 12496-0757-1
Betadine Purdue Frederick 67618015017
Flavored Gelatin, raspberry Jell-O B000E1FYL0 made up firm, to the consistency of 'jigglers'

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Philip, S. J., Kumar, R. J., Menon, K. V. Morphological study of rib regeneration following costectomy in adolescent idiopathic scoliosis. Eur Spine J. 14 (8), 772-776 (2005).
  2. Munro, I. R., Guyuron, B. Split-rib cranioplasty. Ann Plast Surg. 7 (5), 341-346 (1981).
  3. Taggard, D. A., Menezes, A. H. Successful use of rib grafts for cranioplasty in children. Pediatric neurosurgery. 34 (3), 149-155 (2001).
  4. Head, J. R. Prevention of Regeneration fo the Ribs: A problem in thoracic surgery. Archives of Surgery. 14 (6), 1215-1221 (1927).
  5. Kawanabe, Y., Nagata, S. A new method of costal cartilage harvest for total auricular reconstruction: part I. Avoidance and prevention of intraoperative and postoperative complications and problems. Plastic and reconstructive surgery. 117 (6), 2011-2018 (2006).
  6. Cheung, K. M., et al. An externally fixed femoral fracture model for mice. Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society. 21 (4), 685-690 (2003).
  7. Matthys, R., Perren, S. M. Internal fixator for use in the mouse. Injury. 40, Suppl 4. S103-S109 (2009).
  8. Cooper, G. M., et al. Testing the critical size in calvarial bone defects: revisiting the concept of a critical-size defect. Plastic and reconstructive surgery. 125 (6), 1685-1692 (2010).
  9. Ask the Vet. JAX NOTES. 499, Available from: http://jaxmice.jax.org/jaxnotes/archive/499c.html (2005).
  10. Flecknell, P. A., Roughan, J. V., Stewart, R. Use of oral buprenorphine ('buprenorphine jello') for postoperative analgesia in rats--a clinical trial. Laboratory animals. 33 (2), 169-174 (1999).
  11. Rigueur, D., Lyons, K. M. Whole-mount skeletal staining. Methods in molecular biology. 1130, 113-121 (2014).
  12. Evans, D. J. Contribution of somitic cells to the avian ribs. Developmental biology. 256 (1), 114-126 (2003).
  13. Colnot, C., Thompson, Z., Miclau, T., Werb, Z., Helms, J. A. Altered fracture repair in the absence of MMP9. Development. 130 (17), 4123-4133 (2003).
  14. Lu, C., et al. Cellular basis for age-related changes in fracture repair. Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society. 23 (6), 1300-1307 (2005).
  15. Zilberman, Y., Gafni, Y., Pelled, G., Gazit, Z., Gazit, D. Bioluminescent imaging in bone. Methods in molecular biology. 455, 261-272 (2008).
  16. Pelled, G., Gazit, D. Imaging using osteocalcin-luciferase. Journal of musculoskeletal. 4 (4), 362-363 (2004).
  17. Elefteriou, F., Yang, X. Genetic mouse models for bone studies--strengths and limitations. Bone. 49 (6), 1242-1254 (2011).
  18. Srour, M. K., et al. Natural large-scale regeneration of rib cartilage in a mouse. J. Bone Miner. , (2014).

Tags

Tıp Sayı 95 Kaburga rezeksiyon kemik periost fare uzun kemik endokondral kemikleşme
Fare kaburga Rezeksiyonu için Cerrahi Prosedür: Büyük Ölçekli Uzun Kemik Onarım İçin Bir Model
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Tripuraneni, N., Srour, M. K.,… More

Tripuraneni, N., Srour, M. K., Funnell, J. W., Thein, T. Z. T., Mariani, F. V. A Surgical Procedure for Resecting the Mouse Rib: A Model for Large-Scale Long Bone Repair. J. Vis. Exp. (95), e52375, doi:10.3791/52375 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter